灭菌柜验证十大注意事项

注意事項 1：选择正确的灭菌周期

有三种基本类型的灭菌周期根据待灭菌物质的类型进行选择。

适用于那些易于灭菌的物质因为空气清除和蒸汽穿透对这些物质是高度有效的。例如：敞开的玻璃器皿和大口径的管道

典型的坚硬物品灭菌循环在通入蒸汽达到设定灭菌温度前需要达箌一个真空度

用于灭菌困难的物品，因为和坚硬品比起来空气清除和蒸汽穿透更难实现

例如，有盖子的空瓶（玻璃或塑料）洁净服，长软管/管子抽气过滤器，进/出口小的便携式容器

一个典型的包裹品灭菌循环在灭菌前至少进行 3 次抽真空。灭菌后通过真空将负载中嘚蒸汽抽走

一般含有液体的物品不能有大的真空度，否则液体会溢出针对液体来说高压灭菌锅循环是在没有真空度的情况下加热和冷卻。蒸汽进入腔室顶部置换空气空气推入腔室的底部并排出。

选择正确灭菌循环的步骤：

注意事项 2：使用那一种负载配置

需要考虑的一個因素是选择固定装载还是可变的装载在验证和操作灵活性之间需要一个权衡- 你是否验证最大最小装载以增加生产的灵活性？下面是需偠考虑的一些典型装载模式：

固定装载/固定位置模式 意味着, 任何待灭菌装载将以完全相同的方式放置在室内在标准作业流程（SOP）中应有負载配置的图表，因此操作者可以在脑海中再现每一个运行过程的负载这种情况要求最少的验证运行（3），但负载配置没有灵活性

固萣负载/可变位置模式 指负载在高压灭菌器内的位置是可变的。在 SOP 中只需一个负载列表在测试运行过程中，验证运行应通过轮换负荷物品逐个位置论证不同位置的等效性如果经过 3 个run的验证证明了位置的等效性那就可以停止。固定负载/可变位置的模式给操作者操作高压灭菌器时带来灵活性针对包含不同物品的大负载来说，这样可以节省时间

可变负载配置 指腔室内物品种类和/或数量不固定。验证运行时必須表明此循环周期可以满足最大和最小两个负载模式最小负载测试高压灭菌器腔室一个物品，必须证明其是最难灭菌的一个物品

注意倳项 3：选择合适的液体循环监控装置

液体灭菌时所选的监控决定了待灭菌的负载能否通过接收标准。

需要不止一个液体监控装置以证明不哃类型的瓶子和液体能满足灭菌要求选择液体循环监控装置时需考虑以下因素：

理想情况下，液体监控装置所在应是最难灭菌的（最坏凊况）放置在腔室内最冷点（靠近前门或在排水口正上方）。

不要试图使用与待灭菌装载完全不通过的液体监控装置如果液体控制需偠很长时间来达到灭菌温度，则负载其他位置中的蛋白质可能会变性（在监控装置到达灭菌温度的过程中可能已经超出所要求的温度）。

不要对不同组分的负载尝试控制如果液体控制需要很长时间还达不到灭菌温度，则负载介质中的蛋白质将会变性（这可能已经超出了控制的时候达到杀菌所需的温度）

可以根据相似粘度，瓶子大小和填充量大小进行分组减少不同类型的液体和瓶子所需验证测试的次數。每个液体控制将有一个与之相关的最大和最小负载配置

使用程序化的控制，以确保每个液体控制所使用的液体、瓶子体积、填充量及其在腔室内的位置，在验证期间和后续操作过程中保持一致

注意事项 4：确定哪些装载物品是最难灭菌的和哪些位置最能代表灭菌的朂差情况

由于负载包含很多不同类型物品，需要检测的位置似乎很多在不影响物品灭菌能力或破坏物品（关注贵重物品）的情况下，将熱电偶和指示剂（BI 与 CI）放入物品中也是非常困难的

我们必须逐个逐个评估每个物品，确定最佳挑战方式通常,物品必须以某种方式密封,鉯确保其蒸汽渗透状态不变。

问：一个直径均一的软管内哪一点最难灭菌

答：在软管长度的中心。

问：如何将一个 3 米长的热电偶插入 20 米嘚软管中间

答：在软管中间刻一插槽，热电偶沿着插槽插入软管确保用硅胶将插槽密封，如果你没有密封则不能挑战软管。或者將两个 10 米的软管（如有）插入热电偶后用连接器将其连接，用这种方法则不用破坏 20 米长的管子

问：瓶子、锥形瓶和柱形瓶那个位置最难滅菌？

答：在靠近底部的中间（但不接触底面）

问：如何保持热电偶在一个密封瓶子里的位置？

答：选择一个内径与热电偶探头相近的矽橡胶管件套住它以确保不会滑落在瓶盖上钻一个和管子外径一样大的孔。通过孔将管子插入瓶中将探头推入管子中，推动探头直至箌达瓶子中所需位置确保它不会触碰瓶壁。对于橡胶瓶塞的瓶子在筛子中间钻一个小孔，足以使热电偶通过

注意事项 5：有线热电偶較复杂，且并非总是提供准确的数据

下面重点介绍一些使用热电偶传感器时的注意事项：

即使前/后校准确认符合标准某些位置热电偶电阻也会发生变化，从而导致数据不准确和/或不可靠

此示例包含装载腔室内的9个热电偶。他们均匀分布在顶部中部和底部，以及前、中、后部

该研究使用有线热电偶用于测试 121.1℃ 40 分钟的负载腔体 。内室最大压力 2.16bar（在任何时间）相当于 122.7℃一个探头（顶部前左）温度持续维歭在123.3 °C - 123.5 °C之间。所有其他探头则在规定温度范围120.1℃ +2 ° C/-1 ° C内在122.4 ° C 至 122.7 ° C 之间

温度偏差开始于加热阶段，并在灭菌和真空冷却阶段仍然存在該设备工程师和制造商一致认为，在这个点的温度读数是不准确和不可靠的热电偶读数与蒸汽压力读数以及其他热电偶读数不一致。因此在这一点没有任何有用的数据。

注意事项 6：确定接受标准

当您运行验证测试时您只认识到能不能达到接受标准。但是是不是真的需要摆在首位？

重要的是要了解灭菌柜的周期及其参数例如，是用于灭菌还是降低负荷负载是热敏感的吗？还是可以承受过度灭菌昰多孔装载（坚硬/包裹的物品）吗？还是液体？

大多数验证部门有标准操作程序（SOP）详细说明灭菌工艺验证的要求列出所有接受标准嘚完整清单。

灭菌柜不同阶段的循环周期存在不同的遵循标准：

第一阶段 - 热分布（空载）

第二阶段 - 热分布（装载）

第三阶段 - 热分布（装载）内部冷点测定

对于灭菌液体（非真空）和多孔装载（真空）第三阶段和第四阶段可能存在不同的要求，例如灭菌结束时 F0>15（只针对液体）

注意事项 7：充分记录验证测试

记录验证测试期间进行的工作,就是了解需要记录的内容以及如何记录它。记录清晰、一致和一目了然,并苴必须符合所有 GMP 要求它必须是完整的,并且必须包括以下项目:

当进行验证测试过程中，如果你没有良好记录在报告时，你将无法进行数據分析用不充分或不良的数据来支持验证过程将无法通过审计。

注意谨慎使用热电偶的精确度接受标准如果标准过高（如所有的热电耦必须达到接受标准），如有一或两个热电偶停止工作或在测试后超出温度容许偏差则可能会丢失大量运行。

注意事项 8：热电偶准确度確认的频率

如果你正在进行（如在几个星期内）大量的验证测试，你需要考虑热电偶的准确度可以在每次运行和/或在整个测试周期结束后进行。如果等到测试周期结束,则存在由于热电偶未满足接受验收标准而导致所有测试失效的风险但是，在每次测试后做检查则会夶大增加完成测试所需的时间。每三次运行或每隔几天执行一次准确性检查是一种合理的折衷方案

正如注意事项 6 指出，验证热电偶的准確度应允许至少一个或两个热电偶失效。

注意事项 9：确保足够的时间和支配来完成验证

人们很容易低估验证高温灭菌器所需的时间以忣在整个验证过程中你需要做些什么。

例如可能需要长达四个小时进行准备，例如准备装载，放置探头将BI和 CI 放入负载中等。如果生產需要使用高压灭菌器你需要将探头，BI 和 CI挪出来然后从头再来，白白浪费一天在规划验证项目时与生产部门合作，以确保你能有足夠的支配

另一种方法是将阶段II、阶段III（热分布）与阶段IV（热渗透）结合在一起，以节省时间

这三个阶段结合一起做可以减少完成验证嘚时间，不过这样做需要考虑以下几点：

1、需要同时将探头放入墙体内和负载物上。通过高压灭菌器验证依据口你能安装所有的探头吗如果不能，那么你需要单独验证每个阶段或降低探头的数量。

2、这三个阶段结合在一起做会大大增加你的准备时间如果你的时间较緊(例如，在需要在特定时间撤离的建筑工地上),你可能没有时间完成这项分析。如果发生这种情况那么它需要完成的时间比单独做每个階段的时间要长。

3、如果你的时间很紧将很容易遗忘一些东西或者犯错误。

4、还有更多的数据需要考虑进行下一个研究前，如果你只檢查了几个关键点您可能会疏忽一些不符合验证标准的内容，这可能意味着所有后续的研究处于风险之中因为数据无法得到证实。例洳一个探头读数可能过高。

5、准备充足的时间来完成报告

如果你是对新的高压灭菌器进行验证，那么你需要足够的时间进行：

（二）編写试机和 IQ方案

（五）编写 OQ / PQ 的报告准备文件等

如果你正在进行（例如，在几个星期内）大量运行测试那么你需要确保有足够的时间准備文件和编写报告。确保测试一天再用一天来分析数据，也就是说每项测试2天。同样预留充足的时间编写方案和报告并进行审核签批（如适用）。如果你正在开发验证程序那么这也将需要时间。

注意事项 10：制定正确的程序进行控制以确保持续一致和正确操作

恭喜伱，你刚刚完成了一个包含不同周期和负载的新灭菌柜的验证现在，需要那些控制确保一致地使用经验证的装载？

months.对于高压灭菌器和裝载来说持续再确认程序是必需的，频率可为 612 或 24 个月。来源：GMP办公室

编辑整理：德斯特cGMP

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