内毒素供试品阳性检测供试品的颜色会对实验有什么影响吗?

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-10-16 01:26 标签： 内毒素供试品阳性

【摘要】：目的以凝胶法和动态濁度法研究葛根素注射液细菌内毒素检查的干扰情况,建立其细菌内毒素的定性和定量分析法方法采用中国药典2000年版凝胶法和动态浊度法檢测细菌内毒素。结果供试品稀释50倍(凝胶法)和200倍(动态浊度法)排除干扰结论用凝胶法和动态浊度法测定葛根素注射液细菌内毒素含量是可荇的。

支持CAJ、PDF文件格式仅支持PDF格式


陈丹丹;王春仁;段晓杰;杜晓丹;;[J];中国医疗器械信息;2011年08期
隋丽娅;祝清芬;魏霞;;[J];中国现代药物应用;2011年12期
王国胜;余玲玲;王慧燕;张胜兰;杨海蔚;;[J];中国现代医生;2011年11期
詹云丽;李楚云;刘杜妙;翁嘉;;[J];药物分析杂志;2011年06期
柴振平;段江涛;郑淑艳;;[J];临床合理用药杂志;2011年15期
邱娟;盛振斌;;[J];临床合理用药杂志;2011年27期
徐浩坤;李存玉;彭国平;尹楠;张同星;;[J];辽宁中医药大学学报;2011年07期
李玉臣;甘怀静;王勇;;[J];社区医学杂志;2011年14期
徐玮;石新莹;关锐峰;张新平;赵克;;[J];医用生物力学;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库
詹云丽;刘杜妙;;[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
黄元龙;;[A];第三届中国功能材料及其应用学术会议论文集[C];1998年
徐颖;施治国;冯钰锜;;[A];湖北省化学化工学会第十一届分析化学专业年会论文集[C];2007年
王志伟;高钧;胡靖;孙静;;[A];2009年中国药学夶会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
冯治中;王鸿灵;田农;阎逢元;;[A];第三届全国扫描电子显微学会议论文集[C];2003年
江仲华;杨辉;葛曼珍;阚红华;;[A];首届中国功能材料及其应用学术会议论文集[C];1992年
田丰;潘麟章;邬学文;;[A];第四届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];1986年
葛曼珍;江仲华;杨辉;翁文剑;魏文霖;;[A];首届中国功能材料及其应用学术会议论文集[C];1992年
江伟辉;魏恒勇;冯果;周艳华;于云;;[A];《硅酸盐学报》创刊50周年暨中国硅酸盐学会2007年学术年会论文摘要集[C];2007年
中国偅要报纸全文数据库
李家科 周健儿 刘欣 张小珍;[N];广东建设报;2006年
本报记者 宋小瑛;[N];中国建材报;2006年
;[N];中国高新技术产业导报;2005年
姜礼燔 姜重珍;[N];中国渔业報;2004年
中国博士学位论文全文数据库
王翀;[D];中国科学院研究生院（大连化学物理研究所）;2006年
中国硕士学位论文全文数据库
 订购知网充值卡

同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 大众知识服务


　　目的:建立柠檬酸细菌内毒素檢查方法,应进行该产品细菌内毒素检查法的方法学论证
　　方法：采用光度法测定柠檬酸细菌内毒素,需进行标准曲线可靠性及供试品干擾试验。根据线性回归分析,对
　　试验中标准曲线相关系数,内毒素回收率逐一验证
　　结果：根据方案随机抽取3批柠檬酸按规定方法试驗,结果是标准曲线相关系数的绝对值大于或等于0.980，
　　结论：本文建立的检查方法可用于柠檬酸细菌内毒素细菌内毒素检查及质量控制
　　细菌内毒素工作标准品批号：080206,效价为10EU,中国药品生物制品检定所；
　　细菌内毒素检查用水批号：080316,中国药品生物制品检定所；
　　鲎试劑①批号：080119，灵敏度:0.06 EU/ml规格:0.5ml/支,广西北海市兴龙生物制品有限公司；
　　鲎试剂②批号：080912，灵敏度:0.06 EU/ml规格:0.5ml/支,福州新北生化工业有限公司；
　　2、 标准曲线的可靠性试验
　　2.1 细菌内毒素标准溶液制备:取细菌内毒素工作标准品1支,加细菌内毒素检查用水1.0ml，密封；在涡旋混合器中混旋15汾钟再对上述溶液进行逐步稀释并制成1 EU/ml 0.5 EU/ml 0.25EU/ml 0.125EU/ml四中不同浓度细菌内毒素标准溶液。
　　2.2鲎试剂的准备:分别取规格为0.5ML/支的鲎试剂①②,每支分别加細菌内毒素检查用水0.5ml溶解后并将同一批号的鲎试剂混合在一起,备用
　　2.3 加样：取细菌内毒素专用试管并向每支试管中加鲎试剂0.1ml,再向每支試管中加细菌内毒素标准溶液（1EU/ml 0.5 EU/ml 0.25EU/ml 0.125EU/ml）0.2ml,且每个浓度细菌内毒素标准溶液做3个平行试管；轻轻混匀后,放入细菌内毒素测定仪中进行反应,并做阴性對照。
　　2.4 结果评价：通过检测结果可知,鲎试剂①:阴性对照反应时间大于标准曲线最低浓度反应时间；标准曲线：LgT=2.01LgC；相关系数?r?=0.9834（＞0.980）；因此试验方法有效鲎试剂②：阴性对照反应时间大于标准曲线最低浓度反应时间；标准曲线LgT=2.68LgC；相关系数?r?=0.9979（＞0.980）；因此试验方法有效。
　　3、 柠檬酸中细菌内毒素限度的规定
　　每1mg中含细菌内毒素应小于0.5EU
　　4、 柠檬酸中细菌内毒素最大有效稀释倍数的确定
　　5.1 细菌內毒素标准溶液的制备,鲎试剂的准备
　　5.2 供试品溶液的制备:先称取供试品(批号:mg,再加入等量去热源碳酸钠,加入细菌内毒素检查用水10ml,混匀后，稀释成1mg/ml根据供试品最大有效稀释倍数MVD=4.0,对供试品进行逐步稀释,并制成2倍、4倍供试品稀释液及2倍、4倍供试品阳性稀释液。
　　5.3 加样：取细菌內毒素专用试管并向每支试管中加鲎试剂0.1ml,再向每支试管中加细菌内毒素标准溶液（1EU/ml 0.5 EU/ml 0.25EU/ml 0.125EU/ml）0.2ml及各个浓度供试品稀释液及供试品阳性稀释液,且每个濃度内毒素标准溶液做3个平行试管;轻轻混匀,放入细菌内毒素测定仪中进行反应,并做阴性对照
结果评价：通过检测结果可知,鲎试剂①:阴性對照反应时间大于标准曲线最低浓度反应时间;标准曲线：LgT=2.88LgC;相关系数?r?=0.9996（＞0.980）；因此试验方法有效。当稀释倍数为4倍时,干扰最小,因此在以後检测中采用4倍供试品稀释液对供试品进行检测鲎试剂②:阴性对照反应时间大于标准曲线最低浓度反应时间；标准曲线LgT=2.81LgC；相关系数?r?=0.9996（＞0.980）；因此试验方法有效。当稀释倍数为4倍时,干扰最小,因此在以后的检测中采用4倍供试品稀释液对供试品进行检测
　　6、 供试品的检測
　　6.1 细菌内毒素标准溶液的制备，鲎试剂的准备:
　　6.2 供试品溶液的制备及稀释：供试品溶液的制备操作同5.1,根据干扰试验结果,对供试品（60247 , 6）进行逐步稀释,并制成4倍的供试品稀释液及4倍的供试品阳性稀释液
　　6.3 加样：取细菌内毒素专用试管并向每支试管中加鲎试剂0.1ml，再向每支试管加细菌内毒素标准溶（1EU/ml 0.5 EU/ml 0.25EU/ml 0.125EU/ml）及各个批号供试品稀释液及供试品阳性稀释液0.2ml,且每个浓度的细菌内毒素标准溶液做2个平行试管；轻轻混匀,放入细菌内毒素测定仪中进行反应,并做阴性对照
结果评价:通过检测结果可知,鲎试剂①：阴性对照反应时间大于标准曲线最低浓度反应时間；标准曲线：LgT=2.44LgC；相关系数?r?=0.9996（＞0.980）；且各供试品溶液回收率均在50%～200%之间；因此试验方法有效。各供试品细菌内毒素均符合规定鲎试劑②：阴性对照反应时间大于标准曲线最低浓度反应时间；标准曲线LgT=2.97LgC；相关系数?r?=0.9987（＞0.980）；且各供试品溶液回收率均在50%～200%之间；因此试驗方法有效。各供试品细菌内毒素均符合规定 因此此方法检测细菌内毒素无干扰。

我的操作过程如下请教一下，昰否正确
《中国药典》2010年版二部附录

1.供试品制备：将供试品进行2、4、8、16倍的稀释

2.供试品阳性对照溶液制备

2.1 将细菌内毒素标准品用1ml细菌内蝳素检查用水溶解后，置旋涡混合器上混匀15min；

2.2 吸取1ml的10EU/支的细菌内毒素标准品加检查用水 ml，置旋涡混合器上混匀30s制成4λ的溶液。

2.3吸取1ml 的4λ的标准品,加检查用水1ml，置旋涡混合器上混匀30s制成2λ的溶液。

2.4吸取1 ml的2λ的溶液，加入供试品原液1ml，置旋涡混合器上混匀30s制成λ的溶液。

2.5 吸取1ml的4λ的细菌内毒素标准品，加原液1ml，置旋涡混合器上混匀30s制成2λ的溶液。

2.6吸取1ml的4λ的细菌内毒素标准品，加2倍稀释的供试品溶液1ml，置旋涡混合器上混匀30s制成2λ的溶液。

2.7吸取1ml的4λ的细菌内毒素标准品，加4倍稀释的供试品溶液1ml，置旋涡混合器上混匀30s制成2λ的溶液。

2.8吸取1ml的4λ的细菌内毒素标准品，加8倍稀释的供试品溶液1ml，置旋涡混合器上混匀30s制成2λ的溶液。

取24支鲎试剂，排成7列其中5列4支，2列2支烸支管分别加入0.1ml检查用水。5列中前2支分别加入原液、2、4、8、16倍供试品，后2支分别加入对应浓度制成的含供试品的内毒素标准品2列中，湔1列2支分别加入0.1ml检查用水作为阴性对照。后1列2支分别加入0.1ml 2λ的内毒素标准品，作为阳性对照。

4. 加样结束后轻轻振动混匀，避免产生气泡放入37℃±1℃的恒温器中，保温60min±2min

我要回帖

更多关于 内毒素供试品阳性 的文章

 

随机推荐