深夜芭蕉空染雨， 林风沐雨拂乱陶然居。 浮露化珠随江水， 不见小桥迎舟渔。

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-06-26 17:49 标签： 林风沐雨
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&&&Notch1通路活化对胶质瘤干细胞迁移和侵袭能力的影响
Notch1通路活化对胶质瘤干细胞迁移和侵袭能力的影响
Effect of Notch1 pathway activation on migration and invasion of glioma stem cells
.05).Transwell迁移及侵袭实验均显示与shRNA-NC组和空白对照组相比,shRNA-Notch1组穿膜的细胞数目降低,差异有统计学意义(P
目的 观察Notch1通路活化对胶质瘤干细胞(GSCs)迁移和侵袭能力的影响并探讨其潜在机制. 方法 将U87胶质瘤细胞置于干细胞培养基中悬浮培养,使用免疫磁珠法分选获得CD133阳性的胶质瘤细胞,免疫荧光染色检测CD133及巢蛋白鉴定GSCs.将携带Notch1抑制物核苷酸序列(shRNA-Notch1)、阴性对照核苷酸序列(shRNA-NC)的重组慢病毒转染至体外培养的U87来源的GSCs中,分别作为shRNA-Notch1组、shRNA-NC组,同时设不做处理的空白对照组,在成球后行通过荧光定量PCR检测3组细胞Notch1 mRNA的表达;Western blotting检测3组细胞Notch1、Hes1、Akt、pAkt、mTOR、pmTOR蛋白的表达;Transwell细胞迁移和侵袭实验观察3组细胞迁移和侵袭能力的强弱. 结果 免疫荧光染色检测显示肿瘤细胞球阳性表达神经干细胞标志物CD133和巢蛋白.与shRNA-NC组和空白对照组相比,shRNA-Notch1组GSCs的Notch1 mRNA和蛋白、pAkt、mTOR、pmTOR蛋白表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05),而Akt蛋白水平没有明显变化,差异无统计学意义(P>.05).Transwell迁移及侵袭实验均显示与shRNA-NC组和空白对照组相比,shRNA-Notch1组穿膜的细胞数目降低,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 抑制Notch1通路活性后可能通过PI3K通路来调节GSCs的迁移和侵袭能力.
摘要： 目的 观察Notch1通路活化对胶质瘤干细胞(GSCs)迁移和侵袭能力的影响并探讨其潜在机制. 方法 将U87胶质瘤细胞置于干细胞培养基中悬浮培养,使用免疫磁珠法分选获得CD133阳性的胶质瘤细胞,免疫荧光染色检测CD133及巢蛋白鉴定GSCs.将携带Notch1抑制物核苷酸序列(shRNA-Notch1)、阴性对照核苷酸序列(shRNA-NC)的重组慢病毒...&&
Abstract：
Objective To investigate the effect of Notchl pathway activation on migration and invasion of glioma stem cells (GSCs) and its potential molecular mechanism.Methods U87 cells were cultured in tCD133-positive glioma cells were isolated by magnetic activatedcell sorting method.GSCs were identified by immunofluorescence to detect CD133 and nestin.The recombinant lentivirus aimed at Notchl silencing was prepared.GSCs derived from U87 were employed and assigned into three groups:shRNA-Notchl group,shRNA-negative control group and control group (without any treatment).Real-time PCR was used to detect the NWestern blotting was used to detect the expressions of Notchl,Hesl,Akt,phosphorylated Akt (pAk0,mTOR and phosphorylated mTOR (pmTOR);the abilities of migration and invasion of GSCs were observed by Transwell cell migration and invasion assay.Results Immunofluorescence analysis showed that the GSCs tumor spheres could express neural stem cell marker CD133 and nestin.The mRNA and protein expressions of Notchl,and protein expressions ofpAkt,mTOR,pmTOR in the shRNA-Notchl group were significantly lower than those in the shRNA-negative control group and control group (P＜0.05),while the Akt protein levels did not change significantly (P＞0.05).Transwell assay showed that the migration and invasion abilities in the shRNA-Notch1 group were significantly reduced as compared with those in the shRNA-negative control group and control group (P＜0.05).Conclusion The suppression of Notchl pathway activity may regulate the migration and invasion of GSCs through PI3K pathway.
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