谁有把抽奖p成十张荧光定量pcr点点的那张图吗,给我

荧光定量pcr定量PCR用10ul反应成

荧光定量pcr萣量PCR是通过荧光定量pcr染料或荧光定量pcr标记的特异性的探针对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程结合相应的软件可以对产物进荇分析,计算待测样品模板的初始浓度|||原理不同:荧光定量pcr定量pcr实时监测与dna结合的荧光定量pcr染料激发的荧光定量pcr;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光反应要求:荧光定量pcr定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的爿段如果不需要检测产物分子量大小,荧光定量pcr定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析普通pcr必须电泳。结果:荧光定量pcr定量可以實现精确定量普通pcr则不行。荧光定量pcr定量体现可以看到整个扩增过程可以看到扩增效率,溶解温度直接得到的标准曲线等,这些是普通pcr无法实现的|||这个还真不大清楚|||貌似前者是定量,后者属于半定量|||简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段,用于克隆、测序等实验后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量,而荧光定量pcr定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA的含量等前些年有人讲过普通PCR后,通过電泳也可以进行定量其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了|||引物设计是sybr定量PCR法的最大难点,机會好的话设计一对引物就能得到很好的结果,机会不好的话7、8对引物也出不来我就遇到过这样的问题,我在prime5.0上设计了8对引物符合实驗要求的一对也没有,我把退火温度提高到了68度也没能把引物二聚体搞定后来我想通了,可能我这对引物把其它序列扩增出来了而且擴增效率很高(我一个同学设计了十几对才找到一对好用的)。记住primer5.0设计出来的100%好的引物到了定量PCR上不一定好使,这是我最大的经验萣量pCR的引物对匹配度要求不高,我现在使用的引物就有几个碱基不匹配但实验结果很好。有一个办法可以帮助我们绕过引物设计这道坎直接到罗氏网站上专区上找引物。罗氏网站在线有一个引物设计软件你只要找好你目的基因的种属,输入你的片段序列就可以得到你偠的引物这个软件有很大的好处,他会自动地把你的种属序列背景扣除最大限度地去除引物二聚体产生的可以。

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