CDEFGHJKLMPQRSTWXYZ>>>>热点专题：||系统性红斑狼疮病人的雷诺现象与抗磷脂抗体之间的关系来源：&& | 意大利研究人员发现，抗磷脂抗体与系统性红斑狼疮患者的之间可能并不相关。巴里大学的Caccavo D博士及其同事就抗磷脂抗体（抗心磷脂抗体(aCL)、抗磷脂酰肌醇抗体、抗磷脂酰丝氨酸抗体和抗磷脂酸抗体）及抗β2糖蛋白I（aβ2GPI）IgG和IgM与系统性红斑狼疮（SLE）病人中雷诺现象之间的相关性进行了研究。研究人员选取93名SLE患者（81名），其中40名有雷诺现象，53名无此表现。他们应用ELISA法检测各种抗磷脂抗体和aβ2GPI IgG和IgM。结果显示，50名（54%）患者有抗一种或多种磷脂抗原或抗β2GPI的IgG和/或IgM。在没有雷诺现象的患者中这些自身抗体的发生率高于有此现象的患者。IgG aCL与雷诺现象之间呈负相关（p=0.038），但是除aCL外的自身抗体与雷诺现象之间没有明显的相关性。Caccavo博士等总结认为，本研究结果表明抗磷脂抗体与SLE患者的雷诺现象之间并不呈正相关，因此检测除aCL以外的抗磷脂抗体对于预测SLE患者的雷诺现象没有意义。 掌上淘医安卓版
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【医学检验专业本科毕业论文】抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究
安铮： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 本 科 毕 业 论 文 题 目： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 姓 名： 安铮 系 别： 医学检验系 专 业： 医学检验 指导教师： 马媛媛 二〇一 五 年 五 月山西医科大学 本科毕业论文（设计） 目 录 摘 要 ............................................................................... 3 ........................................................................... 3 前 言 .............................................................................. 3 1 材料与 方法 ......................................................................... 4 究对象 .................................................................. 4 本 ...................................................................... 4 剂与仪器 ................................................................ 4 剂盒 ............................................................ 4 器 .............................................................. 5 法 ....................................................................... 5 准曲线各浓度的配制 .............................................. 5 定方法 .......................................................... 5 确度（回收率） .................................................. 5 内精密度 ........................................................ 5 间精密度 ........................................................ 5 测限（ ...................................................... 5 2 标准曲线制作及结果计算 ............................................................ 6 准曲线制作 .............................................................. 6 确度（回收率）计算 ...................................................... 6 内精密度计算 ............................................................ 7 间精密度计算 ............................................................ 7 检测限（ 算 ........................................................ 7 果计算 ................................................................... 8 3 讨论 ............................................................................. 11 参考文献 ........................................................................... 12 致 谢 .............................................................................. 13 安铮： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 3 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 摘 要 ： 目的 ：为了提高系统性红斑狼疮 （ 诊断的多样性，针对抗心 磷脂抗体（ 系统性红斑狼疮的相关性进行研究，以便于临床诊断应用和监测治疗进展。 方法： 应用酶联免疫吸附测定（ 剂盒方法，将已知的抗心磷脂酶抗体包被固相载体，依次加入已确诊为系统性红斑狼疮 40 名患者和 40 名健康人的血清，形成三明治样双抗体夹心后进行分光光度测定，计算得到血清 度，从而得到两组的抗心磷脂酶抗体阴阳率，判断抗心磷脂酶抗体与系统性红斑狼疮的相关程度。 结果 ：依据检测结果系统性红斑狼疮组的阳性率为70%，阴性率为 30%；对照组健康人阳性率为 15%，阴性率为 85%，可见系统性红斑狼疮组阳性率高于对照组，且 阳性率较为明显，对照组健康人的阴性高度明显。 结论 ：经分析抗心磷脂抗体的变化对系统性红斑狼疮的临床诊断及治疗具指导意义。 关键词 ： 抗心磷脂抗体 ； 系统 性红斑狼疮 ； In to of I on so is 0 in a of 0 a is in et of is to LE 0% 0%. of 5% 85% . So of is of he of LE is in By in a to 统性红斑狼疮 (一种伴有多器官受损的自身免疫疾病 ， 以骨关节、皮肤粘膜、肾脏损害及心血管及等复杂临床表现为主 ， 而患者血清中可出现直接对抗核抗原 、 细胞质抗原 、 细胞膜抗原等的自身抗体谱 ［ 1］ 。 它的发病与家族遗传、环境因素、体内雌激素水平 、某些药物及感染有关 ， 好发于青年女性，发病高峰为 15～ 40 岁， 本病黑人发病率较高，白人次之，亚洲人则少见。 全球的患病率平均约为 30~50/10 万人，我国人群患病率约为 70/10 万人 ［ 2］ 。我国目前约有一百万患者，位居全球第二位，并呈现逐年递加的趋势，所以我国对于系统性红斑狼疮诊断手法与治疗方式的研究刻不容缓。 目前国内外系统性红斑狼疮的病例一般需检查血常规，血沉以及抗核抗体等免疫系统检测指标，还需对心脑肾等器官进行相关检查，以明确有无内脏损害。上世纪 60 年代后，人们致力于探索系统性红斑狼疮诊断的金标准。 1982 年美国风湿病学会推广的系统山西医科大学 本科毕业论文（设计） 4 性红斑狼疮诊断标准的敏感性和特异性都达到了百分之九十六左右。我国在 1985 年第二次全国风湿病会议制定出的系统性红斑狼疮的诊断标准，经过国内 27 个不同地区医院验证。 1986 年在上海召开的中华医学风湿病血专题学术会议，制定我国新的系统性红斑狼疮诊断标准 13 项，符合其中 4 项及以上即可诊断为系统性红斑狼疮， 1987 年此标准正式进入我国大专院校教科书成为教学标准。而现在国内外普遍采用的诊断方法是美国风湿病学会 1997 年修订的系统性红斑狼疮分类标准， 类标准的 11 项中，符合 4 项或 4项 以上者 ［ 3］ ，在除外感染、肿瘤和其他结缔组织病后，便可诊断 由于系统性红斑狼疮临床表现较为复杂多变，单单依靠临床症状很难对其确证，所以要依靠先进的检测技术来辅助临床做出正确的判断，避免误诊。依此看来对于找出哪种检测手段可以的特异性抗体，且有具备高敏感性和高特异性尤为重要。除此之外 心磷脂抗体（ 一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体 ［ 4］ 。所以本文是对于测结果与 关性的研究，以探索 关系，寻求具备敏感性和特异性快速有效诊断系统性红斑狼疮辅助方法，并提供临床监测治疗进展的参考，以更好的为系统性红斑狼疮患者服务。 1 材料与方法 究对象 在 2012年 1月至 2013年 3月到人民医院就诊患者中，分别筛选 0例和对照组 40例。 40例组为经美国风湿病学会 1997年修订的系统性红斑狼疮分类标准，以 关节炎、口腔溃疡、光过敏、颊部红斑、盘状红斑、浆膜炎、肾损害、神经系统异常、血液学异常、免疫学异常和抗核抗体阳性为 11项诊断提示 ，符合 4项或 4项以上者确诊 0例患者［ 3］ 。对照组 为临床上没有明确诊断为患有某种疾病并且各项生理指标基本无异常的 40例健康人。 本 分别两组研究对象共 80 人各取 2脉血样本，分别加入已标记且装有 凝剂的试管中， 30 分钟内于 2 至 8℃ 1000 转离心 15 分钟。 剂与仪器 剂盒 采用欧蒙医学诊断技术有限责任公司批号
的 测 试剂盒。该 剂盒配置为：微孔酶标板、标准品（ 120U/标准品稀释液、样本稀释液、检测抗体 20× 洗涤缓冲、液底物 A、底物 B、终止液、自封袋、封板膜。 安铮： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 5 器 2010 年购入的英国产安图斯品牌 010 型号酶标仪， 上海精宏实验设计设备有限公司提供的 热恒温培养箱， 牌的超纯水系统，量程分别为 5000液枪 ,5管若干。 法 准曲线各浓度的配制 标准品和稀释液依次配置浓度为 60、 30、 15、 。 定方法 （ 1）平衡：将试剂盒各组分别从盒中取出，平衡至室温（ 18~25℃ ），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存 （ 2）配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应 充 分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按 1:19 稀释后实用。 （ 3）编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。 （ 4）稀释：每孔加 入 100μl 样品稀 释液。 （ 5）加样：分别设设空白孔、标准阴阳对照孔、待测样品孔。除空白孔外，其余孔分别加标准溶液或待测 样品 100μl（注意 不要有气泡），轻轻混匀。 （ 6）温育：覆上封板条膜，置 37℃ 温育 60 分钟。 （ 7）洗板：弃去各孔内液体，将洗涤液注满各孔，静置 30s,甩掉洗涤液， 重复洗板，最后拍干。 （ 8）加酶：加 标抗体 100μl， 空白对照孔不加。 （ 9）温育：覆上封板条膜，置 37℃ 温育 60 分钟。 （ 10）洗板：弃去各孔内液体，将洗涤液注满各孔，静置 30s,甩掉洗涤液，重复洗板，最后拍干。 （ 11）显色：依次在各孔加显色剂 A 液、显色剂 B 液各 50μl，混 匀，置室温。 （ 12）终止：依次在各孔加终止液 50μl，混匀。 （ 13）测定：用酶标仪单波长 450空白孔调零，测定各孔的吸光度值（ ）。 确度（回收率） 取标准品稀释后浓度为 15U/30U/60U/样品，分别重复 3 次检测。 内精密度 取标准品稀释后浓度 为 15U/30U/60U/样品，同一测定板分别测定结果。 间精密度 取标准品稀释后浓度为 15U/30U/60U/样品，分别在 3 个不同测定板上加样 1 次，测定结果。 测限（ 对空白对照孔测 5 次 ，记录 ，取其均数加二倍标准差。 山西医科大学 本科毕业论文（设计） 6 2 标准曲线制作及结果计算 准曲线制作 表 1 标准品的浓度与吸光度 标准品 浓度 (U/吸光度 ( ) 2 3 15 4 30 5 60 0 20 30 40 50 60 70U/ 标准样品用 标准曲线图 用 制标准曲线 方程式为 Y= 确度（回收率）计算 表 2 样品 准确度（回收率）计算 标准浓度 U/收浓度 U/均回收浓度 U/均回收率 % 15 14． 55 30 37． 42 安铮： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 7 60 92． 13 内精密度计算 表 3 板内精密度 标准浓度 U/定值 U/ml x ±S ) 15 0 0 间精密度计算 表 4 板间精密度 标准浓度 U/定值 U/ml x ±S ) 15 30 60 检测限（ 算 取空白孔的 的均数加 2 倍标准差。因此： 5 ＋ 2 山西医科大学 本科毕业论文（设计） 8 ＝ 果计算 空白 =照阳性 =性对照 = 5 测结果 性别 年龄 吸光度（ 浓度U/性 40 性 35 性 39 性 27 性 50 性 32 性 41 性 28 性 34 性 19 性 44 性 38 性 23 性 26 性 29 性 39 性 27 性 33 性 39 性 41 性 32 性 29 性 20 性 38 性 安铮： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 9 32 性 35 性 28 性 25 性 29 性 46 性 44 性 39 性 41 性 24 性 33 性 31 性 27 性 45 性 37 性 44 性 表 6 对照组 测结果 对照组 性别 年龄 吸光度（ 浓度 U/性 65 性 29 性 33 性 23 性 19 性 28 性 25 性 55 性 46 性 44 性 山西医科大学 本科毕业论文（设计） 10 39 性 17 性 23 性 55 性 29 性 39 性 49 性 33 性 39 性 41 性 32 性 34 性 22 性 38 性 32 性 60 性 28 性 25 性 57 性 46 性 18 性 39 性 33 性 50 性 32 性 41 性 28 性 34 性 44 性 48 性 依据说明书血清样本浓度大于为阳性 +）：血清样本浓度小于 阴性（ -）。 安铮： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 11 表 7 测结果 组别 平均年龄 人数 阳性数（率 %） 阴性数（率 %） 0 28（ 70） 12（ 30） 对照组 0 6（ 15） 34（ 85） 合计 80 34 46 统计结果显示：敏感性： 28/40*100%=70%；特异性： 34/40*100%=85%，依表三可知 性率（ 70%）高于对照组 性率（ 15%）。 3 讨论 抗心磷脂抗体（ 抗磷脂抗体（ 成分之一，是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。 一种容易引起高凝状态和许多临床表现的自身抗体，分为狼疮抗凝剂物（ ， 抗心磷脂抗体（ 抗磷脂酰 丝氨酸 抗体，抗磷脂酸抗体 （ β2 ［ 5］ ，其表现形式为 抗磷脂抗体综合征（ 标志性抗体 ［ 6］ 。研究证明，许多因素与 见原因有：（ 1）自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎的硬皮病等；（ 2）病毒感染如腺病毒，风疹病毒等；（ 3）其他疾病如支原体疾病等；（ 4）口服某些药物如氯丙嗪，吩噻嗪等；（ 5）少数无明显器质性疾病的正常人 ［ 7］ 。 系统性红斑狼疮 (临床表现无固定模式 病程迁延并反复发经心作 缓解期因人而异 起病可呈爆发性、急性或隐匿性 可单一器官受累也可多个器官同时出现 累及多器官时，皮肤与黏膜、关节与肌肉浆膜、肾、心、肺、消化道、神经系统、血液系统等都可以出现相应的症状 ［ 8］ 。其中约 20%无数患者有神经系统损害 以精神障碍 癫痫发作 偏瘫及蛛网膜下腔出血多见 ［ 9］ 女 性 患者发病后，可有 月经失调 或停经，还可导致妇女反复流产、复发性流产及胚胎移植失败 ［ 10］ 。因此有研究人员指出，以 为预测高危妊娠和是否流产的较为敏感的指标 ［ 11］ 。对于 中枢神经损害的发病 机制和病理基础目前尚不清楚，但是认为脑组织的微梗死灶的形成亦是可能性之一，而微梗死灶乃是微血管栓塞所致， 血栓形成中的可能机制是干扰了机体的凝血系统功能，使血液处于高凝状态 ［ 12］ 。 由此本实验共收集 80 份样本，采用酶联免疫吸附测定（ 法来验证抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性。其原理为：通过把纯化的抗心磷脂抗体（ 被在微孔板上，制作成固相载体后，往微孔中依次加入标本、标准品、生物素化的抗体、记的亲和素，洗涤彻底洗涤后，再用底物将其显色。在过氧化物酶的催化下底物转化成蓝 色，在酸的作用下最终形成黄色。此反应中的颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在 450波长测定吸光度（ ）。最终通过两组阳性率的比较，达到初山西医科大学 本科毕业论文（设计） 12 步确认抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究目的。 经方法学评价可知 (1)图得标准曲线为 Y= 准曲线的相关系数 R^2= 明其相关性符合要求（ 2）回收率体现方法准确度，相对回收率限定范围为 85%~115%区间。本实验三个高中低浓度的回收率分别为 均在要求限定范围内且可判定准确度较高。（ 3）用标准偏差或相对标准偏差表示方法精密度， )这一参数表示相对标准偏差，也就是变异系数，对 U/般应在 ≦ 10%，本实验板内变异系数分别为 明显 ≦ 10%，可见板内孔间差异小，板内精密度明显较好。 低于限定范围 10%， 15U/m 低浓度时变异系数 相对其他浓度偏高些，其原因可能存在一些较小的系统误差或者是由于操作引起例如加样存在偏 差，但并不 影响 变异系数在限定范围内，仍可判断板间孔差异较小，板间精密比较好。（ 4）检测限（ 示方法的灵敏度，反应该分析方法检测低浓度样品的能力，要求实验标准曲线最低浓度 >实验标准曲线最低浓度对应 于 因此本实验标准曲线线性较为良好。 本实验 40 例中共测得 28 例阳性，阳性率为 70%， 12 例阴性，阴性率为 30%，对照组健康人 40 例中共测得 6 例阳性，阳性率为 15%， 34 例阴性，阴性率为 85%。由此可知 的阳性率高于对照组的阳性率，且 阳性率较为明显，而对照组健康人的阴性高度明显，可见 性对于排除 有较好的效果， 性对于 次实验数据采用 行统计，敏感性为28/40*100%=70%，特异性为 34/40*100%=85%，可见本此实验敏感性较好，特异性明显，正确率较为比较显著，具有高度的一致性。由于本实验标本采集量偏少，试剂盒单一，重复次数少， 同时 缺乏样本多样性地体现 。 并不能完全精确地体现 于 断辅助的程度，仅可作为参考。 综上所述，血清中抗心磷脂抗体（ 改变对系统性红斑狼疮（ 诊断治疗有一定指导意义，但并不可作为 标志性抗体，应结合其临床诊断做出最终诊断。尤于本实验为小样本实验，不能精准地体现抗心磷脂抗体（ 系统性红斑狼疮（ 断的辅助作用，如在以后的实验中采用大样本，必将取得良好的效果验证抗心磷脂酶抗体（ 系统性红斑狼疮（ 相关性。 参考文献 [1] A,M in of J]995,24(3):3232] 潘思思，苏茵，刘蕊等 J]010， 14（ 1）： 172铮： 抗心磷脂抗体与系统性红斑狼疮相关性的研究 13 [3] 臧长海等 J] 2010， 14(5)： 3424] 王宇泓等 M]):222 [5] 曾小峰 J])：7096] 姜子恩，卢绍禹等．抗心磷脂抗体在缺血血栓病中的研究 [J]．临床荟萃， 2000， 15(19)： 893 [7] D ， F， et of 995,63:42448] N， et 986， 146： 2153 [9] 马丽丽，何蕴， 邢秀萍，等 J]2006， 9(5)： 1310] 鲁爽 ， 马旭．抗磷脂抗体与反复流产 [J]．中国计划生育杂志， 2006， 5： 317 [11] 曹泽毅 中华妇产科学 [M]．人民卫生出版社． 2007， 8: 122 [12] 朱付凡 ， 丁虹，谭玲．等．抗心磷脂抗体阳性孕妇的血液动力学特点 [J]．中华妇产科杂志， )： 3谢 在此论文完成之际，特别要感谢指导老师马媛媛老师的细心指导和热情的帮助。马老师严谨认真，细致入微的对论文了详细 的修改工作，耐心讲解各个方面需要注意的问题，纠正在论文创作中的一些问题，给予了我很大的帮助。同时，也要感谢各位老师提出的建议，为论文的创作提供了很多的思路和方法。在此，由衷的感谢老师们的无私付出！
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系统性红斑狼疮，抗磷脂抗体综合症
匿名用户&&&&
| &&&&浏览4555次 &&&&| &&&&提问时间： 12:40:58 &&&&|&&&& 回答数量：
病情描述：
两年前查出得急性脑梗死，后查出是系统性红斑狼疮，但现在一直服用华发林，泼尼松，硫酸羟氯奎片，我想知道最近月经不正常和吃的药有关系吗？
病情分析：
请根据患者提问的内容，给予专业详尽的指导意见。（最多输入500字）
指导意见：
请给出具体的运动，饮食，康复等方面的指导。（最多输入500字） 0/500
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医生回答专区 因不能面诊，医生的建议仅供参考
病情分析：
系统性红斑狼疮会导致多系统损害，要考虑进一步检查。
指导意见：
这个月经不正常，和系统性红斑狼疮本身可能有关，如果长期吃以上药物也有可能影响。
病情分析：
急性脑梗死和是系统性红斑狼疮，使用华发林，泼尼松，硫酸羟氯奎片，都是对症的。
指导意见：
最好出现月经不正常，与上述吃的药物有一定的关系，请在医生指导下配合中药汤剂减少副作用。
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擅长:内科护理综合
擅长:心理科综合
擅长:内科疾病
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