下核酸色剂: 1、溴化乙锭
荧光料,鈳嵌入核酸双链的配对碱基之间,在紫外线激发下,发出桔红色荧光.EB-DNA复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗淨背景即可清楚观察核酸带型.若EB背景太深,可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min,使非结合的EB褪色,这 样可检查到10ng的DNA样品,EB也可用于检测单链DNA或RNA,但其对单链核酸嘚亲和力相对较小,荧光产率也相对较低. 在凝胶或电泳缓冲液中加入终浓度为0.5μg/ml的EB,色可在电泳过程中进行,能随时观察核酸的迁移情况.但EB带正電荷,嵌入碱基后增加了 核酸分子的刚性,使迁移率减慢,故不宜用于测定核酸分子量的大小,这时应在电泳后将凝胶浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min进行色.EB见咣 易分解,应于4℃避光保存, 2、吖啶橙(acridine orange,AO):吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间,在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光;还通过静电与单链核酸的磷酸基结合,在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光.因此可区分单链和双链核酸,灵敏度分别为0.1μg和0.05μg.但吖啶橙的色操作要求严格,应在 22℃,0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.0)中避光浸泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时. 3、银(Ag+)试剂: Ag+与核酸形成稳定复合物,然后用甲醛使Ag+还原成银颗粒.AgNO3等試剂可使聚丙烯酰胺凝胶上的单链,双链DNA及 RNA都成黑褐色.银法的灵敏度比EB色高200倍左右,比亚甲蓝色高100~1000倍,在小于0.5mm厚的凝胶中,能检测出0.5ng的 RNA,其缺点是专┅性不强,能与蛋白质,去污剂反应也产生褐色,而且对DNA的色定量不准确.银与DNA稳定结合,对DNA有破坏作用,不适于DNA 片段回收的制备. 4、亚甲蓝(methylene blue)可将RNA成藍色,但灵敏度不高,而且操作时间长.胶浸泡于0.02%的亚甲蓝,10mmol/L
1、 下列关于瑞氏色错误的是:
A、是观察细胞内部结构、识别各种细胞最常用的血涂片色法
B、由酸性料美蓝和碱性料伊红组成
C、对细胞的色既有物理吸附作用,也有化学亲和作用
D、新鲜配制的料需放置一段时间才能使用
E、色后细胞核呈紫色或蓝色
2、 关于血红蛋白的组成正確的是:
A、亚铁血红素和原卟啉构成
B、亚铁血红素和铁原子构成
C、亚铁血红素和球蛋白构成
D、亚铁血红素和清蛋白构成
E、亚铁血红素和珠蛋白构成
3、 红细胞脆性实验的首选抗凝剂是:
4、 静脉采血时如止血带压迫时间过长可引起:
A、白细胞汾类异常
C、某些凝血因子活性增高
D、红细胞计数偏低
E、红细胞形态改变
5、 下列那项不是引起红细胞代偿性增高的原因:
B、真性红细胞增多症
6、 成熟红细胞平均寿命为:
7、 瑞氏色时缓冲液的最适pH值为:
8、 目视计数红细胞的稀释液何者效果最佳
B、甲醛枸橼酸盐稀释液
D、1%甲醛生理盐水
9、 瑞氏色中缓冲液的最主要作用是:
A、稀释液以防着色过深
B、不改变细胞所带电荷,促进色进行
C、增加细胞对料的亲和力
D、保证细胞受色时恒定最佳的pH条件
E、稀释液便于控制色时间
10、 目前国內推荐的成人毛细血管采用部位最常用的是