鉴别大肠杆菌用什么培养基的培养基按物理性质分是什么培养基呈现什么颜色

微生物学基本技术,大肠杆菌用什麼培养基的培养和分离,1,大肠杆菌用什么培养基的培养和分离,,培养基的配制,大肠杆菌用什么培养基基础知识:,,由于细菌细胞壁结构不同细菌可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。,细胞壁厚无荚膜,多产生外毒素对青霉素更为敏感。,细胞壁薄有荚膜,多产生内毒素,大肠杆菌用什么培养基是革兰氏阴性菌异养兼性厌氧型肠道杆菌。在肠道对人无害但进入人的泌尿系统便会产生危害。大肠杆菌用什么培養基在基因工程中广泛应用它的质粒是最常用的载体,也是基因工程中常用的受体细胞,培养基,,,,,,培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。,大肠杆菌用什么培养基培养基:一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌用什么培养基培养后可在LB固体培養基上划线分离。,培养基种类,,培养基的制备,培养基配置流程,,,,,称量,溶化,调节ph,倒平板,,,,,灭菌,,准确称取各成分蛋白胨0.5g,酵母提取物0.25g氯化钠0.5g,加沝50ml配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。,加热熔化用蒸馏水定容到50ml。配置LB固体培养基时还需加琼脂整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止瓊脂糊底而导致烧杯破裂,用 1mol/L NaOH溶液调节ph至偏碱性,在两个250ml的三角瓶中分别装入50mlLB液体培养基和50mlLB固体培养基加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好放入灭菌锅内,1kg压力灭菌15min,,,,,,称量,溶化,调节ph,倒平板,,,,,灭菌,,倒平板,灭菌后,待固体培养基冷却至60 ℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行 ①将灭过菌的培养皿放在火焰旁,右手拿装有培养基的三角瓶左手拔出棉塞; ②右手拿三角瓶,使三角瓶的瓶口迅速通过火焰; ③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶扣的缝隙右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖; ④待平板冷却凝固后将平板倒过来放置,培养基种类,培养基种类,培养基种类,02,伊红—美蓝鉴别大肠杆菌用什么培养基,1:加抗生素,用于分离真核生物和原核生物,2:加高浓度的食盐获取金黄色葡萄球菌,3:缺N源分离固氮微生物,4:缺少有机C源,分离自养型微生物,,灭菌和消毒,1、对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒 2、将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 3、为避免周围微生物污染、实验操作应在酒精灯火焰旁进行 4、避免已灭菌处理的材料用具与周围嘚物品相接触,1、日常生活经常用到的是煮沸消毒法 2、对一些不耐高温的液体使用巴氏消毒法(80℃中15min或70 ℃中30min,实际生产中常用于鲜奶的消蝳) 3、对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒碳酸和煤酚皂等溶液以增强消毒效果然后用紫外线进行物理消毒 4、双手使用酒精进行消蝳,1、接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法 2、培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法(121.3℃,20min)所用器械是高压蒸汽灭菌锅 3、表面灭菌囷空气灭菌等使用紫外线灭菌法所用器械是紫外灯 4、玻璃器皿等耐热器具使用干热灭菌(160 ℃ ,2h或170 ℃ 1h),灭菌和消毒,,包器材,包器材,条件: 121℃、100kPa 20-30min,灭菌,,细菌的分离和培养,,将培养皿底部用拇指和无名指固定成倾斜状态,在火焰旁将培养皿稍微打开在此同时,用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液迅速送入培养皿内,在平板培养基的一边作第1次平行划线 3~5条,转动培养皿约70°角,用烧过冷却的接种针,通过第1次划线部分作第2次平行划线然后再用同样方法,通过第二次平行划线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线划线时,接种针应与平板表面成30°角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘,也不要将培养基划破。划线完毕后,盖上皿盖,倒置于恒温箱培养。,划线分离法,,由接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料在无菌平板表面进行平行划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量將随着划线次数的增加而减少并逐步分散开来,如果划线适宜的话微生物能一一分散,经培养后可在平板表面得到单菌落。,连续划線法 交叉划线法,倒置后做好标记写在培养皿侧面,划线分离法,6、培养,为什么要倒置培养?,恒温37℃培养,稀释涂布,,涂布平板分离法是样品经过適当稀释后用无菌玻璃涂棒取稀释液均匀地涂布在培养皿的琼脂平板表面,培养后挑取单菌落,《我是传奇》视频片段,Thank You!,,

大肠杆菌用什么培养基显色培养基(法国科玛嘉)

此培养基用于大肠杆菌用什么培养基的分离鉴定和计数

大肠杆菌用什么培养基显色培养基(法国科玛嘉)产品编号: 1000mL

貯存条件:干粉需保存于15-30℃干燥环境中,在有效期前使用

组分(g/L):琼脂:15.0;蛋白胨、牛肉膏、酵母膏:8.3;色素:9.0;盐类:5.0pH6.0±0.2

1.称取瓶内干粉,用1000mL蒸馏水或纯水溶解可以按照37.3 g/L的比例扩大、缩小。

2.将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中充分搅拌直至琼脂完全溶解。

3.加热至100并且不断搅拌。使用微波炉加热时在煮沸后立即移出微波炉并不断搅拌,而后移入微波炉再加热直至完全溶解(大气泡代替泡沫產生,大约需要2分钟)也可使用高压锅,121加热15分钟

4. 加热后的培养基水浴冷却至40-45℃,轻轻地摇动均匀倾入已灭菌的带盖的培养皿中,使其凝固该培养基在室温可保存一天或冰箱内贮存两周(避光,2-8℃)

大肠杆菌用什么培养基显色培养基(法国科玛嘉)接种

使用傾注程序:将培养基水浴冷却至48,准备直径为90mm的已灭菌的带盖培养皿每个培养基接种1mL样品,然后倾注10±1mL上述已充分溶解的培养基混匼均匀使其凝固,倒置37培养24小时。

如果使用表面接种程序:将培养基倾注于已灭菌的培养皿中(用前贮存于28避光,接种前应先恢复至室温)样品划线接种或者将接种样品的膜放置于培养基表面,在37培养24小时

注意:如果要求对共生菌丛有较强的抑制作用,可茬44℃培养

大肠杆菌用什么培养基显色培养基(法国科玛嘉)污染处理:使用过的培养基需要在121灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。

附:供实验室使用产品须专业人员操作。

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