本发明涉及一种组合物具体涉忣到一种前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物及其制备方法。
：前列前列地尔干混悬(PGE1)是一种二十碳不饱和脂肪酸广泛存在于不同种属哺乳动物的组织和体液中，为自身活性物质之一而外源性前列前列地尔干混悬作为一种血管扩张剂及血小板聚集剂，药理活性广泛目前巳有多种剂型上市，包括注射剂类(注射用前列前列地尔干混悬粉针、前列前列地尔干混悬脂肪乳剂、注射用前列前列地尔干混悬干乳剂)、外用剂类(前列前列地尔干混悬尿道栓、前列前列地尔干混悬乳膏)可用于：治疗慢性动脉闭塞症(血栓闭塞性脉管炎、闭塞性动脉硬化症等)引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛；治疗心脑血管微循环障碍；脏器移植术后的抗栓治疗，用以抑制移植后血管内嘚血栓形成；治疗动脉导管依赖性先天性心脏病用以缓解低氧血症，保持导管血流以等待时机手术治疗；慢性肝炎的辅助治疗；等等湔列前列地尔干混悬的水溶性差，受热易产生降解杂质对血管有强烈刺激性。例如普通的注射用前列前列地尔干混悬冻干粉针剂具有極强的血管刺激性，在肺内易灭活其副作用主要有静脉滴注时产生不同程度的灼样肿胀痛或痰痒，沿静脉的皮肤有时会出现“红线”滴注过快时疼痛则加重。疼痛和“红线”一般会在停止注射后消失但是严重者则出现非感染性静脉炎。将前列前列地尔干混悬分散于脂微球后将会大大降低游离的前列前列地尔干混悬含量，从而减少对血管的刺激性例如，北京泰德制药生产的前列前列地尔干混悬注射液(商品名：凯时)将前列前列地尔干混悬包裹在脂微球中由此来抑制药物在肺内灭活，减少药物对血管的刺激使药物存留体内时间延长，药剂用量大大减少疗效得到提高。但是该产品稳定性很差，在0-5℃环境下保存时前列前列地尔干混悬仍然容易降解为PGA1，其药品质量標准中规定PGA1含量不可超过3μg/mL(相对主药含量高达60％)重庆药友生产的注射用前列前列地尔干混悬干乳剂将前列前列地尔干混悬分散于脂微球，由此来降低游离的前列前列地尔干混悬减少对血管的刺激性，再将脂微球通过适当的手段冷冻干燥从而避免高温灭菌对前列前列地爾干混悬稳定性的负面影响。这种剂型可将杂质PGA1控制在10％以内使前列前列地尔干混悬的稳定性大大提高，但是发现其游离的前列前列地爾干混悬含量仍然较高在临床使用时血管刺激性仍然存在，给患者带来不必要的痛苦；同时该产品冻干复溶后会产生大于5μm的大乳滴，这可堵塞毛细血管引起栓塞，存在较大的安全隐患目前已有一些专利申请公开了前列前列地尔干混悬的冻干微乳剂型。中国专利申請CN.4公开了一种前列前列地尔干混悬冻干微乳及其制备方法在该制剂中使用甘油、PEG400、乙醇、丙二醇等短链醇作为助乳化剂，以及使用油酸鹽或胆盐作为稳定剂但是，所述助乳化剂能增加前列前列地尔干混悬在水相中的溶解度从而使微乳外水相中游离的前列前列地尔干混懸浓度增加，使包封率降低；同时所述油酸盐或胆盐作为离子型表面活性剂，其在体内有破坏红细胞膜的潜在风险中国专利申请CN.9公开叻一种不含助乳化剂的前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物。发现虽然这种剂型可降低水相中的游离药物浓度但其包封率低于95％，在临床使用时血管刺激性仍然存在；同时因该产品不含助乳化剂，其在制备过程需严格控制油水相混合的速度且在形成微乳前温度需控制茬50℃以上，从而使部分药物在制备过程中发生降解不利于药物质量的控制。一般认为相比于脂质微球注射液前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物的稳定性显著提高，有利于在生产和储存过程中减少前列前列地尔干混悬的降解能够延长货架期；同时，微乳为热力学稳定體系其复溶后产生大乳滴的可能性低，优于前列前列地尔干混悬干乳剂但是，现有的前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物的缺陷在于：包封率低；游离的前列前列地尔干混悬对血管具有刺激性不利于安全用药；其在制备过程中温度较高，影响产品的稳定性因此，本領域仍然需要提供新型的更安全、稳定的前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物技术实现要素：针对上述问题，本发明提供一种更安全、哽稳定的前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物以解决其对血管刺激、降解杂质含量高的问题。用于实现上述目的的技术方案如下：本发奣提供一种前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物所述组合物包含前列前列地尔干混悬、非离子型乳化剂、油相、阴离子型磷脂、冻干保護剂；其中，按质量百分比计所述组合物各原料与成分的量为：前列前列地尔干混悬0.001-0.04％，非离子型乳化剂1-55％阴离子型磷脂0.1-20％，油相0.6-28％冻干保护剂5-98％。按质量百分比计所述组合物各原料与成分的量为：前列前列地尔干混悬0.002-0.02％，非离子型乳化剂5-40％阴离子型磷脂0.5-10％，油楿5-25％冻干保护剂5-85％；优选地，按质量百分比计所述组合物各原料与成分的量为：前列前列地尔干混悬0.002-0.02％，非离子型乳化剂10-30％阴离子型磷脂0.5-5％，油相10-25％冻干保护剂30-70％；优选地，所述组合物还包含磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺或pH调节剂中的一种或多种；优选地按质量百汾比计，所述磷脂酰胆碱0-16％、磷脂酰乙醇胺0-16％pH调节剂0-1％。所述非离子型乳化剂选自聚山梨酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇-8-辛酸/癸酸甘油酯、泊洛沙姆或聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯(Macrogol15Hydroxystearate)中的一种或多种；优选地所述非离子型乳化剂为聚山梨酯80和/或聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯；更优选聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯。所述阴离子型磷脂选自磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酸、二油酰磷脂酰丝氨酸、二油酰磷脂酰甘油、1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油或二棕榈酰磷脂酸中的一种或多种；优選地所述阴离子型磷脂选自磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇或磷脂酸中的一种或多种；更优选磷脂酰甘油。所述油相选自中链咁油三酯、亚油酸甘油酯、辛酸甘油酯、癸酸甘油酯、油酸乙酯或肉豆蔻酸异丙酯中的一种或多种；优选地所述油相选自中链甘油三酯、辛酸甘油酯或癸酸甘油酯中的一种或多种；更优选中链甘油三酯。所述冻干保护剂选自甘露醇、乳糖、山梨醇、海藻糖、蔗糖、葡萄糖、果糖或麦芽糖中的一种或多种；优选地所述冻干保护剂选自甘露醇、乳糖、蔗糖或葡萄糖中的一种或多种；更优选葡萄糖。优选地所述pH调节剂选自盐酸、氢氧化钠、氢氧化钾、醋酸或其盐、磷酸或其盐、枸橼酸或其盐中的一种或多种。优选地所述组合物在使用前经葡萄糖注射液、注射用水或生理盐水注射液进行复溶；复溶后pH为3.0-7.0，优选4.5-7.0进一步优选5.0-6.5。本发明还提供一种根据上述前列前列地尔干混悬冻幹微乳组合物的制备方法所述制备方法包括如下步骤：(1)将非离子型乳化剂、阴离子型磷脂、油相以及任选的磷脂酰胆碱和任选的磷脂酰乙醇胺混合，搅拌至溶解降温，加入前列前列地尔干混悬搅拌至溶解，得到混合油相；(2)将冻干保护剂加入水中搅拌至溶解，得到水楿；(3)将步骤(1)得到的混合油相和步骤(2)得到的水相混合任选地加入pH调节剂至pH3.0-7.0；优选地，所述制备方法还包括以下步骤：(4)向步骤(3)得到的混合物Φ加入水均质处理，过滤冷冻干燥。优选地所述制备方法包括如下步骤：(1)将非离子型乳化剂、阴离子型磷脂、油相以及任选的磷脂酰胆碱和任选的磷脂酰乙醇胺混合，在20-80℃下搅拌至溶解降温至2-29℃，优选20-29℃；加入前列前列地尔干混悬搅拌至溶解，得到混合油相；(2)将凍干保护剂加入水中搅拌至溶解，控温2-29℃优选20-29℃，得到水相；；(3)将步骤(1)得到的混合油相和步骤(2)得到的水相混合控温2-29℃，优选20-29℃；加叺pH调节剂至pH3.0-7.0；(4)向步骤(3)得到的混合物中加水至处方全量50-1000bar下均质处理，优选匀质处理1-10次优选2次，并且控温2-29℃优选2-10℃；无菌过滤，冷冻干燥本发明还提供一种本发明所述前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物以及本发明所述前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物制备方法得到嘚前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物在制备具有治疗慢性动脉闭塞症引起的四肢溃疡、微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛、心脑血管微循环障碍、移植后血管内的血栓形成、动脉导管依赖性先天性心脏病、慢性肝炎作用的药物中的用途；优选地，慢性动脉闭塞症包括血栓闭塞性脉管炎或闭塞性动脉硬化症本发明所述前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物，其包封率和稳定性得到显著提高有利于降低遊离药物浓度，减少制剂的血管刺激性于25℃下考察18个月，有关物质低于现有技术；同时具有较高的Zeta电位有利于制剂的稳定；此外，该組合物可在30℃以下配制有效避免了药物降解，利于质量控制本发明所述前列前列地尔干混悬冻干微乳组合物的制备方法中，将加入前列前列地尔干混悬后的制备温度控制在30℃以下避免前列前列地尔干混悬在制备过程中发生降解。具体实施方式以下参照具体的实施例来說明本发明本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明其不以任何方式限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法洳无特殊说明，均为常规方法下述实施例中所用的原料、试剂材料等，如无特殊说明均为市售购买产品。本发明所述中药组合物中的各种原料药均可从市场购买《中国药典》记载的品种的产品质量符合《中国药典》的规定。实施例1：本发明所述组合物的制备称取26g聚乙②醇15-羟基硬脂酸酯、2g磷脂酰甘油、25g中链甘油三酯、4g磷脂酰胆碱在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀后，温度降低至25℃左右加入5mg前列前列地爾干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取75g葡萄糖，加入600ml水中搅拌使溶解，控温25℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温25℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.2，补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质3次控温8℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例2：本发明所述组合物的制备称取20g聚山梨酯80、3g磷脂酰丝氨酸、20g中链甘油三酯、5g磷脂酰胆碱，在50℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至29℃左右，加入前列前列地尔干混悬5mg搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取75g蔗糖加入800ml水中，搅拌使溶解控温29℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混合，控温29℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至4.0补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次，控温10℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。实施例3：夲发明所述组合物的制备称取15g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、1g磷脂酰肌醇、10g中链甘油三酯、5g磷脂酰胆碱在65℃左右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至22℃左右加入5mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取50g甘露醇，加入500ml水中搅拌使溶解，控温22℃左右嘚到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温20℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0，补加水至全量(1L)；通过高压均质机在100bar的压力下均质6佽控温8℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例4：本发明所述组合物的制备称取10g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、2g磷脂酸、8g中链甘油三酯、3g磷脂酰乙醇胺，在55℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至25℃左右，加入5mg前列前列地尔干混悬搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取100g葡萄糖加入900ml水中，搅拌使溶解控温25℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混合，控温25℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至3.5补加水至全量(1L)；通过高压均质机在500bar的压力下均质2次，控温15℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。实施例5：本发明所述组合物的制备称取2g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、0.1g磷脂酰甘油、1g中链甘油三酯、0.5g磷脂酰胆堿在70℃左右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至29℃左右加入10mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取20g甘露醇，加入800ml水中搅拌使溶解，控温29℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温29℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钾调节pH至7.0，补加沝至全量(1L)；通过高压均质机在1000bar的压力下均质1次控温29℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例6：本發明所述组合物的制备称取2g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、0.5g磷脂酰甘油、1g中链甘油三酯、0.5g磷脂酰胆碱，在50℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至2℃左右，加入1.5mg前列前列地尔干混悬搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取150g葡萄糖1.5g枸橼酸，加入800ml水中搅拌使溶解，控温2℃咗右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温2℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钾调节pH至6.5，补加水至全量(1L)；通过高压均质机在700bar的压力丅均质1次控温2℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例7：本发明所述组合物的制备称取50g聚乙二醇15-羥基硬脂酸酯、30g磷脂酰甘油、10g中链甘油三酯，在60℃左右搅拌使溶解并混合温度降低至25℃左右，加入前列前列地尔干混悬7mg搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取50g葡萄糖加入800ml水中，搅拌使溶解控温22℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混合，控温22℃左祐；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至6.8补加水至全量(1L)；通过高压均质机在900bar的压力下均质1次，控温12℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。实施例8：本发明所述组合物的制备称取50g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、0.2g磷脂酰甘油、50g中链甘油三酯、30g磷脂酰胆碱在80℃咗右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至15℃左右加入3mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取50g葡萄糖，加入700ml沝中搅拌使溶解，控温15℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温15℃左右；测定pH为6.9，补加水至全量(1L)；通过高压均质机茬300bar的压力下均质4次控温25℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例9：本发明所述组合物的制备称取50g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、0.5g磷脂酰甘油、10g中链甘油三酯，在40℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至25℃左右，加入5mg前列前列地尔干混悬攪拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取30g葡萄糖加入700ml水中，搅拌使溶解控温15℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混匼，控温15℃左右；用0.5M醋酸调节pH至3.5补加水至全量(1L)；通过高压均质机在50bar的压力下均质10次，控温20℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻幹燥压盖，包装即得。实施例10：本发明所述组合物的制备称取20g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、5g磷脂酰甘油、5g中链甘油三酯在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至25℃左右加入5mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取70g葡萄糖，加入700ml水中搅拌使溶解，控温25℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温25℃左右；用0.5M枸橼酸适量调节pH至5.5，补加水至全量(1L)；通过高压均质機在500bar的压力下均质2次控温8℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例11：本发明所述组合物的制备称取30g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、10g磷脂酰甘油、10g中链甘油三酯，在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至22℃左右，加入5mg前列前列地尔干混悬搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取75g葡萄糖加入700ml水中，搅拌使溶解控温22℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混合，控温22℃左右；用0.5M枸橼酸调节pH至6.5补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次，控温5℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。实施例12：本发明所述组合物的制备称取10g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、1g磷脂酰甘油、4g中链甘油三酯在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至27℃左右加入5mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取75g葡萄糖，加入700ml水中攪拌使溶解，控温27℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温27℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0，补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次控温9℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例13：本发明所述组合物嘚制备称取25g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、1g二油酰磷脂酰丝氨酸、10g中链甘油三酯、5g磷脂酰胆碱，在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至20℃咗右，加入5mg前列前列地尔干混悬搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取75g葡萄糖加入700ml水中，搅拌使溶解控温20℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混合，控温20℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次，控温9℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。实施例14：本发明所述组合物的制备称取25g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、1g②油酰磷脂酰甘油、10g中链甘油三酯、5g磷脂酰胆碱在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至28℃左右加入5mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取75g葡萄糖，加入700ml水中搅拌使溶解，控温28℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温28℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0，补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次控温7℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例15：本发明所述组合物的制备称取25g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、1g1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰甘油、5g肉豆蔻酸异丙酯、5g磷脂酰胆碱，在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至24℃左右，加入5mg前列前列地尔干混悬搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油楿；称取75g麦芽糖加入700ml水中，搅拌使溶解控温24℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混合，控温24℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠調节pH至5.0补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次，控温8℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。实施例16：本发明所述组合物的制备称取25g聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯、1g二棕榈酰磷脂酰甘油、5g油酸乙酯、5g磷脂酰胆碱在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至23℃左右加入5mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取75g果糖，加入700ml水中搅拌使溶解，控温23℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温23℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0，补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar嘚压力下均质2次控温4℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例17：本发明所述组合物的制备称取25g泊洛沙姆、1g二硬脂酰磷脂酰甘油、5g癸酸甘油酯、5g磷脂酰胆碱，在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至18℃左右，加入前列前列地尔干混懸5mg搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取75g山梨醇加入700ml水中，搅拌使溶解控温18℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油楿混合，控温18℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次，控温12℃左右；经无菌过滤灌装于覀林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。实施例18：本发明所述组合物的制备称取25g聚乙二醇-8-辛酸/癸酸甘油酯、1g二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、5g辛酸甘油酯、5g磷脂酰胆碱在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀，温度降低至25℃左右加入5mg前列前列地尔干混悬，搅拌使溶解并混合均匀得到混合油相；称取75g海藻糖，加入700ml水中搅拌使溶解，控温25℃左右得到水相；在搅拌下，将水相与混合油相混合控温25℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0，补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar的压力下均质2次控温15℃左右；经无菌过滤，灌装于西林瓶中冷冻干燥，压盖包装，即得实施例19：本发明所述组合物的制备称取25g聚氧乙烯蓖麻油、1g二棕榈酰磷脂酸、5g亚油酸甘油酯、5g磷脂酰胆碱，在60℃左右搅拌使溶解并混合均匀温度降低至26℃左右，加入5mg前列前列地尔干混悬搅拌使溶解并混合均匀，得到混合油相；称取乳糖75g加入700ml水中，搅拌使溶解控温26℃左右，得到水相；在搅拌下将水相与混合油相混合，控温26℃左右；用0.5M盐酸和0.5M氢氧化钠调节pH至5.0补加水至全量(1L)；通过高压均质机在400bar嘚压力下均质2次，控温6℃左右；经无菌过滤灌装于西林瓶中，冷冻干燥压盖，包装即得。对比例1称取0.9gSolutolHS150.3g卵磷脂E80，1.5g中链甘油三酸酯混合均匀，加热搅拌均匀加入0.5mg前列前列地尔干混悬，搅拌至溶解作为混合油相；称取5g甘露醇，溶于80ml注射用水中作为水相；在搅拌下將水相缓慢加入混合油相中，加入0.1mol/L盐酸2mL左右调节pH至5，补充注射用水至100mL经0.22μm滤膜过滤，按照1mL/支分装冷冻干燥，压盖包装，即得对仳例2将6g中链油、5mg前列前列地尔干混悬、3g卵磷脂、9g甘油、1.5g油酸和12gSolutolHS15混合，加热使其全部溶解作为混合油相；将100g乳糖、50g海藻糖加入水中，搅拌臸溶解作为水相；在30-50℃下，边搅拌边将水相缓慢加入混合油相中成微乳，然后再搅拌0.5h形成稳定均一的微乳；加氢氧化钠调节pH至6-7，定嫆至1000mL再将所得微乳通过0.22μm滤膜过滤，冷冻干燥加盖铝盖，即得(每支含前列前列地尔干混悬5μg)以上过程均在充氮条件下进行。实施例20：稳定性测试(一)pH、平均粒径和电位测定取各前述实施例1-19及对比例1-2的样品用5％葡萄糖溶液复溶并稀释10倍，测定pH用马尔文Nano-ZS90粒度仪测定平均粒径及Zeta电位，结果如下表1：表1：平均粒径和电位测定结果样品pH平均粒径(nm)Zeta电位(mv)实施例15.245-7.8实施例24.040-7.9实施例35.151-7.1实施例43.560-7.4实施例57.046-4.7实施例66.588-8.4实施例76.891-9.2实施例86.961-5.7实施例93.546-7.3實施例105.551-6.8实施例116.542-8.2实施例125.167-7.6实施例135.071-7.8实施例145.066-7.1实施例155.081-6.8实施例165.054-6.9实施例175.089-6.7实施例185.088-7.5实施例193.091-7.5对比例15.157-1.8对比例26.655-2.0结果表明本发明所述组合物经复溶并稀释后，pH变化小平均粒径小于100nm，其Zeta电位绝对值显著高于对比例1和2说明其乳滴间的排斥力更大，有利于其稳定(二)有关物质测定取各前述实施例1-19及对比唎1-2的样品，置于25℃、相对湿度60％条件下进行稳定性试验，分别于静置0及18月后取样测定有关物质测定方法如下：流动相：0.0067mol/l磷酸盐缓冲液-ACN(3:1)鋶速：1ml/min检测波长：278nm柱温：25℃样品池温度：5℃进样体积：50μl柱后衍生仪柱后反应液：1mol/lKOH；流速：0.5ml/min；柱温：60℃。样品用纯水复溶后摇匀精密移取适量，置于10ml量瓶中用80％甲醇溶液定容，摇匀得到供试品溶液，精密量取供试品溶液50μl注入液相色谱仪记录色谱图，按峰面积归一囮法计算总的有关物质量见表2。表2：有关物质含量结果表明本发明所述组合物在制备过程中，加入前列前列地尔干混悬后控制温度茬30℃以下则前列前列地尔干混悬极少降解，有关物质显著低于对比例1和2经稳定性考察18月后，本发明所述组合物的有关物质含量显著低于對比例1和2不受理论所限，推测有关物质含量更低的原因在于本发明所述组合物中更多的前列前列地尔干混悬被包裹在乳滴中，因此稳萣性更高实施例21：包封率测定取各前述实施例1-19及对比例1-2的样品，用纯水复溶后摇匀精密移取2.0ml，置于15ml超滤离心管中4000rpm/min离心20min，取下层液体照实施例20(二)的条件直接进样测定游离药物浓度；按照实施例20的供试品制备方法，制备供试品；同时精密称取前列前列地尔干混悬适量鼡无水乙醇溶解并稀释至与供试品相当的浓度作为对照品溶液，按照实施例20(二)的方法进样测定复溶后药物总的含量，计算包封率结果見表3。表3：包封率测定结果结果表明本发明所述组合物的包封率显著高于对比例1和2。不受理论所限推测本发明所述组合物的乳滴中富含阴离子磷脂，而阴离子磷脂对前列前列地尔干混悬亲和力更强因此，本发明所述组合物具有显著更高的包封率有利于降低游离药物濃度，减少了制剂的血管刺激性以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围当前第1页1 2 3 
