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下载须知 | 常见问题汇总
人白介素-18(IL-18)ELISA试剂盒说明书
1人白细胞介素-18（IL-18）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用 目的本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素 18（IL-18）的含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-18（IL-18 ）水平。用纯化的人白细胞介素-18（IL-18）抗体 包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-18，再与 HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原- 酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-18（IL-18）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值） ，通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-18 （IL-18）含量。试剂盒组成试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片（48） 2 片（96）密封袋 1 个 1 个酶标包被板 148 196 2-8℃ 保存标准品135ng/L 0.5ml1 瓶 0.5ml1 瓶 2-8℃ 保存标准品稀释液 1.5ml1 瓶 1.5ml1 瓶 2-8℃ 保存酶标试剂 3 ml1 瓶 6 ml1 瓶 2-8℃ 保存样品稀释液 3 ml1 瓶 6 ml1 瓶 2-8℃ 保存显色剂 A 液 3 ml1 瓶 6 ml1 瓶 2-8℃ 保存显色剂 B 液 3 ml1 瓶 6 ml1 瓶 2-8℃ 保存终止液 3ml1 瓶 6ml1 瓶 2-8℃ 保存浓缩洗涤液 （20ml20 倍）1 瓶 （20ml30 倍）1 瓶 2-8℃ 保存样本处理及要求1. 血清室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（ 转/分） 。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2. 血浆应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心20 分钟左右（ 转/ 分） 。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3. 尿液用无菌管收集，离心 20 分钟左右（ 转/分） 。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。24. 细胞培养上清检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 转/分） 。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分钟左右（ 转/分） 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4） ，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（ 转/分） 。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7. 不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。操作步骤1. 标准品的稀释与加样在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品 100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取 100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl弃掉，再各取 50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取 50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第九第十孔中各取 50μl弃掉。 （稀释后各孔加样量都为 50μl，浓度分别为 90 ng/L，60 ng/L，30 ng/L，15 ng/L ，7.5 ng/L） 。2. 加样分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为 5 倍） 。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。4. 配液将 30（48T 的 20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30（48T 的 20 倍）倍稀释后备用。5. 洗涤小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。6. 加酶每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。7. 温育操作同 3。8. 洗涤操作同 5。9. 显色每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10. 终止每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。11. 测定以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值） 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。注意事项1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最3好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD值大于标准品孔第一孔的 OD 值） ，请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（n5） 。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6． 底物请避光保存。7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9． 本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标， 在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释 倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值 代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释 倍数，即为样品的实际浓度。 试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.95 以上。2.批内与批见应分别小于 9和 11检测范围7.8 pg/ml-500 pg/ml灵敏度1.95 pg/ml保存条件及有效期1.试剂盒保存；2-8℃。2．有效期6 个月
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elisa试剂盒说明书这个网上找的还是比较杂乱！至于elisa试剂盒说明书在哪里可以下载这样吧，我找找，然后帮你整理出来！然后让你直接下载elisa试剂盒说明书！
好的 收集好了麻烦发给我 谢谢了！网上确实很杂乱！
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试剂盒 使用手册
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试剂盒 使用手册
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人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒使用说明书
&国内权威的科研试剂供应商，专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒，品质保证，技术严格，无效果退款退货。欢迎来电咨询及订购：021-536566
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
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超氧化物歧化酶(SOD)超氧化物歧化酶(SOD)超氧化物歧化酶(SOD)
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒&试剂盒组成】
：<span style="mso-spacerun:'yes';font-family:宋体;font-size:10.5000mso-font-kerning:1.ng/ml
标准品稀释液
备注：用标准品稀释液依次稀释为：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材】
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、本和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50L；待测样本孔中先加入待测样本10L，再加样本稀释液40L（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50L，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A&液50L，再加入显色剂B液&50L，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止L（颜色由蓝色立转黄色）
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用50吸光值。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒&样本要求】
1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒注意事项】
1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4、牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。
5、本试剂盒定量范<span style="mso-spacerun:'yes';font-family:宋体;font-size:10.5000mso-font-kerning:1.-200ng/ml范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（<span style="mso-spacerun:'yes';font-family:宋体;font-size:10.5000mso-font-kerning:1.-200ng/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。
6、若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
8、试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
9、底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒操作程序总结】
准备试剂，样品和标准品&
加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟
洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟
洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟
加入终止液
15分钟之内读OD值
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒检测范围】
<span style="mso-spacerun:'yes';font-family:宋体;font-size:10.5000mso-font-kerning:1.-200ng/ml
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒规格】
96T/盒、48T/盒
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒贮藏】
<span style="mso-spacerun:'yes';font-family:宋体;font-size:12.0000mso-font-kerning:1.℃，避光防潮保存。
【人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒有效期】
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