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> L-乳酸钠
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L-乳酸钠实验室科研试剂，公司专业经营生产科研试剂，产品深受广大客户喜爱，我公司自2009以来实行三包原则：保证产品质量，保证产品效果，保证产品售后。
产品详细资料：
L-乳酸钠英文名称:Sodium
cas:867-56-1
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氯铂酸钠 Sodium chloroplatina
氯亚铂酸铵 Platinum(II)-ammoniu
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四氯钯酸钾 Potassium chloropall
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四氯钯酸钠 Tetraamminepalladium
四三苯基膦钯 Tetrakis(triphenylph
三苯基膦醋酸钯 Bis(triphenylphosphi
二腈苯二氯化钯 Bis(benzonitrile)pal
4-硝基邻苯二胺 96-56-9
异4B酸 118-88-7
4B酸 4-Aminotoluene-3-sul 88-44-8 187.22
2,2-二甲基琥珀酸酐 2,2-Dimethylsuccinic
2,2-二甲基琥珀酸 2,2-Dimethylsuccinic 597-43-3 146.14
碳酸乙烯酯 Ethylene carbonate 96-49-1 88.06
氯法拉滨 Clofarabine -1 303.68
法舒地尔 FASUDIL -7 291.37
三氟甲基三甲基硅烷 Trimethyl(trifluorom
左旋舒必利 Levosulpiride
坦索罗辛 Tamsulosin hydrochlo -6 444.97
吲唑 Indazole 271-44-3 118.14
培南类主环中间体 Side chain for imipe
美罗培南侧链（DMP） Side chain for merop
顺式茉莉酮 Jasmone 488-10-8 150.22
甲基癸烯醇 4-Methyl-3-decen-5-o
2,2-二氟-3,5-二苯甲酰氧基呋喃内酯 2-Deoxy-2,2-difluoro -7 376.31
4-羟基咔唑 9H-Carbazol-4-ol
2-甲氧基苯氧基乙胺盐酸盐 2-(2-Methoxyphenoxy)
2-氨基-3,4-二甲基苯甲酸 2-Amino-3,4-dimethyl
3-[1-(二甲基氨基)乙基]苯酚 3-(1-(Dimethylamino) -5 165.23
N-乙基甲基氨基甲酰氯 Ethylmethyl-carbamic
N-甲基乙基胺盐酸盐 N-Methylethylamine h 624-60-2 95.57
4-甲基间苯二酚 4-METHYLRESORCINOL 496-73-1 124.14
4-乙基间苯二酚 4-Ethylresorcinol
4-硝基-2-磺基-苯甲酸钾盐 4-Nitro-2-Sulfo-benz 323.36282
三-(3,6-二氧杂庚基)胺 Tris(2-(2-methoxyeth
色甘酸二乙酯 Diethyl cromoglycate
4-(3-甲基-2-丁烯氧基)苯甲醛 4'-(3-Methyl-2-butye
2,3,4-三羟基苯甲醛 2,3,4-Trihydroxybenz
4-甲基-6-羟基-7-乙酰氧基香豆素 4-METHYL 6-HYDROXY 7
6-羧基香豆素 Coumarin-6-carboxyli
4-甲基七叶亭 4-METHYLESCULETIN 529-84-0 192.17
7-乙酰氧基-4-甲基香豆素 7-Acetoxy-4-methylco
2-乙氧基羰基甲氧基-4-(3-甲基-2-丁烯氧基)苯乙酮
4-甲基邻苯二酚二乙酸甲酯
(&)-1,1'-联-2-萘酚 1,1'-Bi-2-naphthol 602-09-5 286.32
(R)-(-)-联萘酚二(三氟甲磺酸酯) (R)-(-)-1,1'-Binapht -7 588.49
(R)-(-)-联萘酚二乙酸酯 (R)-(-)-1,1'-Bi(2-na -9 374.43
(R)-(-)-联萘酚二对甲苯磺酸酯 (R)-(-)-2,2'-Bis(p-t -7 594.7
(S)-(+)-联萘酚二乙酸酯 (S)-(+)-1,1'-Bi(2-na
(S)-(-)-1-(4-溴苯)乙胺 (S)-(-)-4-Bromo-alph
(S)-(+)-联萘酚二(三氟甲磺酸酯) (S)-(+)-1,1'-Binapht -8 588.49
(S)-(+)-联萘酚二对甲苯磺酸酯 (S)-(+)-1,1'-Bi-2-na -9 598.73
(S)-(-)-2,2'-二甲氧基-1,1'-联萘 (S)-(-)-2,2'-Dimetho
(S)-(+)-2-辛醇 D(+)-2-Octanol
三苯基氢氧化锡 Fentin hydroxide 76-87-9 367.03
2-氨-4-羟基苯甲酸
三环唑 Tricyclazole
邻溴苯甲腈
2,4-D丁酯 2,4-D Amine salt 277.14
异戊烯醇 3-Methyl-2-buten-1-o 556-82-1 86.13
六氟丙酮三水化合物 Hexafluoroacetone tr
六氟环氧丙烷(HFPO) Hexafluoropropylene 428-59-1 166.02
五氯邻二甲苯 ALPHA'-PENTACHLORO-2
2,4-二甲基苯乙酮 2',4'-Dimethylacetop 89-74-7 148.2
间羟基苯乙酸 3-Hydroxyphenylaceti 621-37-4 152.15
2,4-二甲基苯甲酸 2,4-Dimethylbenzoic 611-01-8 150.17
&,&-二甲基苯乙酸 2-Methyl-2-phenylpro 826-55-1 164.2
3,4-二氯苯乙酸 3,4-Dichlorophenylac
间苯二甲醛 m-Phthalaldehyde 626-19-7 134.13
对乙氧基苯甲醛 4-Ethoxybenzaldehyde
4,4'-二苯醚二甲酸 4,4'-Oxybisbenzoic a
3-二甲氨基-1-丙醇 3-Dimethylamino-1-p
3-苯基丙酰胺 3-Phenyl-propionamid 102-93-2 149.18974
4-甲基丙烯酰胺基水杨酸 4-Methylacrylamidesa
丙烯酸卡必酯 2-(2-Ethoxyethoxy)et
甲基丙烯酸酐 Methacrylic anhydrid 760-93-0 154.16
2-叔丁基蒽醌 2-tert-Butylanthraqu 84-47-9 264.32
2-叔戊基蒽醌 2-(1,1-Dimethylprop
叔戊基苯 tert-Amylbenzene
4-溴-4',4''-二甲基三苯胺 4-Bromo-4',4''-dimet -1 352.27
4-溴苯基苯胺 4-Bromodiphenylamine
(4-甲基苯基)苯胺 4-Methyldiphenylamin 620-84-8 183.25
2-巯基吡啶-N-氧化物 2-Pyridinethiol 1-ox
4-甲氧基二苯胺 4-METHOXYDIPHENYLAMI
N-(4-甲氧基苯基)-4-甲基苯胺 N-(4-Methoxyphenyl)-
4,4'-二甲氧基二苯安 4,4'-DIMETHOXYDIPHEN 101-70-2 229.27
4-甲基三苯胺 4-Methyltriphenylami
4-甲基-N-苯基苯胺 4-Methyldiphenylamin
3-甲基二苯胺 3-Methyldiphenylamin
3,4-二甲基二苯胺 3,4-Dimethyldiphenyl
N,N,N',N'-四苯基联苯胺 N,N,N',N'-Tetrapheny
N,N,N',N'-四(4-甲苯基)联苯胺 N,N,N',N'-Tetrakis(4
三(4-碘苯)胺 Tris(4-iodophenyl)am
4-硝基三苯胺 4-Nitrophenyl diphen
三(4-甲酰苯基)胺 TRIS(4-FORMYLPHENYL) -3 329.35
三(4-溴苯)胺 ris(4-bromophenyl)am
二苯骈噻庚酮 Dibenzo[b,e]thiepin-
N,N-二甲基丙烯基脲 1,3-Dimethyl-3,4,5,6
N,N-二甲基甘氨酸钠
(3R)-3-特丁基二甲硅基-5-氧代-6-三苯基磷烯己酸甲酯() -2 534.7
达泊西汀 Dapoxetine -1
(R)-3-氨基-3-苯基丙酸 (R)-3-氨基-3-苯基丙酸
S-3-氨基-3-苯基丙酸
S-3-氨基-3-苯基丙酸乙酯盐酸盐 -4 229.7
磷酸三镁 MAGNESIUM PHOSPHATE
焦磷酸二氢二钠 Disodium pytophospha
无水磷酸氢钙 136.1
N,N-二乙基苄胺 N-BENZYLDIETHYLAMINE 772-54-3 163.26
N,N-二[3-(二甲氨基)丙基]-N',N'-二甲基-1,3-丙二胺 N,N-bis[3-(dimethyla
盐酸2-三苯甲胺基-a-甲氧亚胺基-4-噻唑乙酸 2-(Tritylamino)-a -( -4 479.99
N-甲基二环己基胺 N,N-Dicyclohexylmeth
9-十一炔酸 9-Undecynoic acid
10-十一碳炔酸 10-Undecynoic acid
2-羟基-6,7-二甲基喹喔啉 6,7,-Dimethyl-2-hydr
2-羟基-6,7-二氯喹喔啉 6,7-Dichloro-2-hydro
二吗啉烷基醚
2-羟基-6-甲基喹喔啉 2-Hydroxy-6-methylqu
2-羟基-6-甲氧基喹喔啉 2-Hydroxy-6-methoxyq
2-羟基-6-氯喹喔啉 6-Chloro-2-hydroxyqu
6-氨基-5-溴喹喔啉 5-Bromoquinoxalin-6-
6-氨基喹喔啉 6-Aminoquinoxaline
2-氯-4-氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉 4-Amino-2-chloro-6,7
2,3,6-三氯喹喔啉 2,3,6-TRICHLOROQUINO
2,3,6-三甲基喹喔啉 2,3,6-TRIMETHYLQUINO
4-硫尿嘧啶 4-THIOURACIL 591-28-6 128.15
2-(1,3-二氧合-2-基)-6-甲基吡啶 2-(1,3-Dioxolan-2-yl
6-甲基-2,3-吡啶二羧酸 6-METHYL-2,3-PYRIDIN
均苯四甲酸 1,2,4,5-Benzenetetra 89-05-4 254.15
2-氯-6-甲氧基吡啶 2-Chloro-6-methoxypy
4-苯基吡啶-N-氧化物 4-Phenylpyridine-N-o
4,7-二氯喹啉 4,7-Dichloroquinolin 86-98-6 198.05
4-苄氧基吡啶 N-氧化物 4-(Benzyloxy)pyridin
交联剂(LCA-DA)
异辛酸钾 Potassium isooctanoa
阿伐他汀钙内酯 Atorvastatin lactone -1 1167.31
四溴对苯二酚 Tetrabromohydroquino
3-溴-4-甲基苯胺 3-Bromo-4-methylanil
5-溴-2-甲基苯胺 5-Bromo-2-methylanil
2-溴-6-甲基苯胺 2-Bromo-6-methylanil
2-萘磺酰氯 2-Naphthalenesulfony 93-11-8 226.68
2,3,4,5,6-五甲基苄氯 2,3,4,5,6-Pentamethy 484-65-1 196.72
2-[2-(4-氟苯基)-2-氧代-1-苯基乙基]-4-甲基-3-氧代-N-苯基戊酰胺 M-4 -2 417.47
(4R-Cis)-6-氨乙基-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-己酸叔丁酯 ATS-9
(4R-Cis)-6-氰基-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环乙酸叔丁酯 ATS-8
2,4,6-三甲基氯苄 alpha-2-Chloroisodur
2,5-二甲基苄氯 2,5-Dimethylbenzyl c 824-45-3 154.64
2,4,6-三甲基苯磺酰氯 2-Mesitylenesulfonyl 773-64-8 218.7
4-二甲氨基苯甲酰氯 4-Dimethylaminobenzo
2,4-双(氯甲基)三甲基苯 2,4-Bis-(chloromethy
4-氟-2-硝基甲苯 4-Fluoro-2-nitrotolu 446-10-6 155.13
4-溴-2-氟苯基异氰酸酯 4-Bromo-2-fluorophen
4-氟苯基异氰酸酯 4-Fluorophenyl isocy
2-氟苯基异氰酸酯 2-Fluorophenyl isocy
4-氟苯磺酰氯 4-Fluorobenzenesulfo 349-88-2 194.61
4-甲苯磺酰氟 4-Toluensulfonyl flu 455-16-3 174.19
3-氨基苯磺酰氟盐酸盐 3-Aminobenzenesulfon
3-氟苯基异硫氰酸酯 3-Fluorophenyl isoth 404-72-8 153.18
2-溴-4-硝基甲苯 2-Bromo-4-nitrotolue
1-乙氧基萘 1-Ethoxynaphthalene
2-溴-6-硝基甲苯 2-Bromo-6-nitrotolue
4-溴-2-硝基甲苯 4-Bromo-2-nitrotolue
3-溴-2-硝基甲苯 3-Bromo-2-nitrotolue
1,2,3,4-四氢咔唑 1,2,3,4-Tetrahydroca 942-01-8 171.24
R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 (R)-(+)-4-chloro-3-h
4-氯-3-羟基丁酸乙酯 S-4-chloro-3-hydroxy
氟代碳酸乙烯酯 4-Fluoro-1,3-dioxola -8 106.05
氯代碳酸乙烯酯 Chloroethylene carbo
纳米银水溶液 Nano Silver
磷酸甲苯二苯酯 Cresyl diphenyl phos
磷酸三甲苯(酚)酯 TRI-O-CRESYL PHOSPHA 78-30-8 368.36
O-乙基磷酰二氯 Phosphorodichloridat
吡啶甲酸，N-氧化物 Picolinic acid N-oxi 824-40-8 139.11
3-苯基吡啶 3-Phenylpyridine
2，4-二羟基吡啶 2,4-Dihydroxypyridin 626-03-9 111.1
5-氯-2-苯并恶唑酮 5-Chloro-2-benzoxazo 95-25-0 169.57
2,4-双羧甲基-1,3,5-三甲基苯 2,4-Bis(Carboxymethy 236.26
2,4-双-(羟甲基)三甲基苯 2,4-Bis-(hydroxymeth
上硫基氯茚 Epithiochlorhydrin
4-硝基茚 4-Nitroindan
茚(馏分) Aromatic hydrocarbon
2-羟基苯并咪唑 2-Hydroxybenzimidazo 615-16-7 134.14
2-(三氟甲基)苯并咪唑 2-(Trifluoromethyl)b 312-73-2 186.13
环己硫醚 CYCLOHEXENE SULFIDE 286-28-2 114.21
二硫代二环己烷 Dicyclohexyldisulphi
2,5,6-三甲基苯并咪唑 2,5,6-Trimethylbenzi
磷酸三(丁氧基乙基)酯 TBEP 78-51-3 398.47
5-溴吲哚-2-酮 5-Bromo-2-oxindole
邻硝基苯丙酮酸 2-Nitrophenylpyruvic
3-氰基-6-三氟甲基吡啶 6-(Trifluoromethyl)n -5 172.11
6-三氟甲基烟酸 6-(Trifluoromethyl)p -8 191.11
6-氨基烟酸甲酯 6-aminopyridine-3-ca
6-氟吲哚 6-Fluoroindole 399-51-9 135.14
6-硝基吲哚 6-Nitroindole
2,3,7-三甲基吲哚 2,3,7-Trimethylindol
3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-醇 3,5,5-Trimethyl-2-cy 470-99-5 140.22
9-十一炔-1-醇 9-Undecyn-1-ol 168.28
10-十一炔-1-醇 10-Undecyn-1-ol
2-氨基-1-丁醇 (S)-(+)-2-Amino-1-bu
对羧基苯肼 4-Hydrazinobenzoic a 619-67-0 152.15
2,4-二氯苯肼盐酸盐 2,4-Dichlorophenylhy
6-甲基芦竹碱 6-Methylgramide
1,2-二甲基-5-羟基-3-吲哚甲酸乙酯 Mecarbinate
N-乙酸-3-吲哚甲醛 N-Acetic acid-indole -0 203.19
6-甲基吲哚 6-Methylindole
5-甲基吲哚 5-Methylindole 614-96-0 131.17
N-甲基吲哚 1-Methylindole 603-76-9 131.17
2-吲哚酮 Oxindole 59-48-3 133.15
3,3'-二吲哚甲烷 3,3'-Diindolylmethan
3-吲哚乙酰胺 3-Indoleacetamide 879-37-8 174.2
3-乙酰吲哚 3-Acetylindole 703-80-0 159.18
3-吲哚甲腈 3-Cyanoindole
钯石墨催化剂
钯石棉催化剂
钯氧化硅催化剂
红色基KD 3-Amino-4-methoxyben 120-35-4 242.27
钯硫酸钡催化剂
钯碳酸钡催化剂
钯树脂催化剂
钯碳酸钙催化剂
钯氧化铝催化剂
氢氧化钯炭催化剂
钯炭催化剂
4-乙酰氨基苯甲酸 p-Acetylamino benzoi 556-08-1 179.17
5-硝基水杨酸 5-Nitrosalicylic aci 96-97-9 183.12
4-氯邻苯二酸 4-Chlorophthalic aci 89-20-3 200.58
N-乙酰-4-(2-氨乙基)-苯磺酰胺 N-(P-SULFAMOYLPHENET
氢氧化钯 Palladium hydroxide
1-萘基异氰酸酯 1-Naphthyl isocyanat 86-84-0 169.18
2-硝基苯酚异丁酸酯 2-Nitrophenyl isocya
2,4-二氯苯基异氰酸酯 2,4-Dichlorophenyl i
水合DL-苏-3-苯基丝氨酸 DL-threo-3-Phenylser 69-96-5 181.19
碳氢清洗剂
2-氨基-6-甲醛吡啶 2-Aminopyridine-6-ld
2,6-二氨基吡啶 2,6-Diaminopyridine 141-86-6 109.13
2-氯-5-氰基吡啶 2-Chloro-5- Cyano Py
环丙基甲醛 Cyclopropanecarboxal
2-氯-5-羟基吡啶 2-Chloro-5-hydroxypy
2-氯-5-氟吡啶 2-Chloro-5-fluoropyr
2,6-氯-3-碘吡啶 2,6-Dichloro-3-Iodo 273.89
2-氨基异烟酸 2-Aminoisonicotinic
6-溴烟酸 6-Bromonicotinic aci
2-氯-5-溴吡啶 5-Bromo-2-chloropyri
2,4-二氯吡啶 2,4-Dichloropyridine
6-羟基吡啶-2-羧酸 6-Hydroxypicolinic a
2,6-二硝基氯苯 2-Chloro-1,3-dinitro 606-21-3 202.55
2,6-二硝基苯胺 2,6-Dinitroaniline 606-22-4 183.12
5-氨基-1H-1,2,4-三氮唑-3-羧酸 3-Amino-1,2,4-triazo
非那西丁 Phenacetin 62-44-2 179.22
邻氨基苯乙醚 o-Phenetidine 94-70-2 137.18
对乙氧基苯胺 Phenetidine 156-43-4 137.18
11-哌嗪-二苯并[b,f][1,4]硫氮杂卓盐酸盐 -4 368.32386
N,N-二甲基甘氨酸 N,N-Dimethylglycine
肼基甲酸叔丁脂 Tert Butyl Carbazate
氨基甲酸丁脂 592-33-8 117.15
2-氯乙基磺酸钠 Sodium 2-chloroethan
肼基甲酸甲酯 Methyl carbazate
枸橼酸铋雷尼替丁 Ranitidinebismuthcit -0
N-苄基甘氨酸乙酯 N-Benzylglycine ethy
次没食子酸苍铅 BISMUTH SUBGALLATE 99-26-3 394.09
柳氮磺胺吡啶 Sulfasalazine 599-79-1 398.39
右旋反式苯醚菊酯 Fenpropathrin
氟氯菊酯 Bifenthrin
虫酰肼 Tebufenozide -8 352.47
1-氨基海因盐酸盐 1-Aminohydantoin Hyd
1-苄基-5-乙氧基海因 1-Benzyl-5-ethoxyhyd
氟氯氰菊酯 Cyfluthrin
3,4,5-三苯基-TP-1,2,4-三唑 3,4,5-Triphenyl-4H-1
4,7-二苯基-1,10-菲罗啉 Bathophenanthroline
2,9-二甲基-4,7-联苯-1,10-邻二氮杂菲 Bathocuproin
N,N'-二苯基-N,N'-二(4'-(N,N-二(1-萘基)-胺基)-4-联苯基)-联苯胺 TATE -4
N, N'-二(3-甲基苯基)-N,N'-二(苯基)-9,9-螺环芴 Spiro TPD -4
(1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-蒎烷二醇 (1S,2S,3R,5S)-(+)-2,
N, N'-二(1-萘基)-N,N'-二苯基)-9,9-螺环芴 N,N'-DIGLYCYLETHYLEN -9
11,11,12,12-四氰基萘-2,6-喹啉甲烷 11,11,12,12-TETRACYA
盐酸氨丙啉/1-(4-氨基-2-丙基-5-嘧啶甲基)-2-甲基吡啶氯化物盐酸盐/盐酸安普罗胺/盐酸安普霉素/盐酸安普罗铵/盐酸安普罗林/氨丙基嘧吡啶/氨丙嘧吡啶/AmSFroliumhydroSFhlorideBR，99%137-88-2RT
酒石酸泰乐菌素/泰乐二甲基酸/酒石酸太东菌素/酒石酸泰洛星/TylosintartrateBR，800U/mg～8℃
泰乐霉素/酒石酸泰乐菌素/泰乐二甲基酸/酒石酸太东菌素/酒石酸泰洛星/TylosintartrateBR～8℃
磷酸泰乐菌素/泰乐霉素磷酸盐/TylosinSFhosSFhateBR，800U/mg～8℃
卡托普利/1-(3-巯基-2-D-甲基丙酰基)-L-脯氨酸/巯甲丙脯酸/甲巯丙脯酸/1-((2S)-2-甲基-3-巯基-1-氧代丙基)-L-脯氨酸/巯甲丙脯氨酸/SFaSFtoSFrilBR，99%RT
乳酸诺氟沙星/乳酸氟哌酸/1-乙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸乳酸盐/NorfloxaSFinLaSFtateBR，99%2～8℃，避光 D0041100bSFDNALadderⅡ/DL3000片段：100、200、300、400、500、600、700、800、900、、、、3000bSF保存：-20℃
D00421kbDNALadderⅡ/DL10000DNALadder片段：、、、bSF保存：-20℃
SF1085 HE琼脂（HE） 250g 用于沙门氏菌的选择性分离培养（GB标准）
Hekton Enteric Agar
SF1086 尿素酶琼脂基础 250g 生化培养基，用于细菌脲酶检测（GB，SN标准）
Urease Agar Base
SFS0001 L-丙氨酸/&-氨基丙酸/L-&-丙氨酸/L-初油氨基酸/氨基丙酸/2-氨基丙酸/L-&-丝析氨酸/L-氨基丙酸/L-SFSlSFSnine BR，99% 56-41-7
SFS0002 D-丙氨酸/D-2-氨基丙酸/D-氨基丙酸/D-初油氨基酸/D-丝析氨酸/ D-丙胺酸/D-&-氨基丙酸/D-&-丙氨酸/D-SFSlSFSnine豆丁微信公众号
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《有机化学》专科试题及答案
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第三章氨基酸日期：
第3章 氨基酸 四大类生物分子中蛋白质是生物功能的主要载体，而氨基酸（amino acid）是蛋白质的构件分子。自然界中存成千上万在的种蛋白质，在结构和功能上的惊人的多样性归根结底是由20种常见氨基酸的内在性质造成的。这些性质包括①聚合能力，②特有的酸碱性质，③侧链的结构及其化学功能的多样性，④手性。本章主要讲述这些性质，它们是讨论蛋白质和酶的结构、功能以及许多其他有关问题的基础。 一、氨基酸—蛋白质的构件分子 （一）蛋白质的水解 一百多年前就开始了关于蛋白质的化学研究。在早期的研究中，水解作用提供了关于蛋白质组成和结构的极其价值的资料。蛋白质可以被酸、碱或蛋白酶催化水解。在水解过程中，逐渐降解成相对分子质量越来越小的肽段（peptide fragment），直到最后成为氨基酸的混合物。根据蛋白质的水解程度，可分为完全水解和部分水解两种情况。完全水解或称彻底水解，得到的水解产物是各种氨基酸的混合物。部分水解即不完全水解，得到的产物是各种大小不等的肽段和氨基酸。下面简略地介绍酸、碱和酶3种水解方法及其优缺点：(11)酸水解 常用H2SO4或HCl进行水解。一般6mol/L HCl，4mol/L H2SO4；回流煮沸20h左右可使蛋白质完全水解。酸水解的优点是不引起消旋作用（racemization），得到的是L-氨基酸。缺点是色氨酸完全被沸酸所破坏，羟基氨基酸（丝氨酸及苏氨酸）有一小部分被分解，同时天冬氨酸和谷氨酰胺的酰胺基被水解下来。 (12)碱水解 一般与5mol/L NaOH共煮10~20h，即可使蛋白质完全水解。水解过程中多数氨基酸遭到不同程度的破坏，并且产生消旋现象，所得产物是D-和L-氨基酸的混合物，称消旋物（见本章氨基酸的光学活性部分）。此外，碱水解所需时间较长。因此酶法主要用于部分水解。常用的蛋白酶有胰蛋白酶（trypsin）、胰凝乳蛋白酶或称糜蛋白酶（chymotrypsin）以及胃蛋白酶（pepsin）等，它们主要用于蛋白质一级结构分析以获得蛋白质的部分水解产物。 （二）α-氨基酸的一般结构 从蛋白质水解产物中分离出来的常见氨基酸只有20种（更确切地说为19种氨基酸和1种亚氨基酸即脯氨酸）。除脯氨酸及其衍生物外，这些氨基酸在结构上的共同点是与羧基相邻的α-碳原子（Cα）上都有一个氨基，因此称为α-氨基酸。连接在α-碳上的还有一个氢原子和一个可变的侧链，称R基，各种氨基酸的区别就在于R基的不同。α-氨基酸的结构通式见图3-1.因为氨基酸同时含有氨基和羧基，所以它们能以首尾相连的方式进行聚合反应，除去一分子水形成一个共价酰胺键或称肽键：在水溶液中此反应的平衡有利于肽键的水解，因此在生物系统或实验室中形成肽键都是以输入能量的间接方式进行的（见第4章和下册第38章）。氨基酸在中性pH时，羧基以-COO- ，氨基以-NH3+形式存在。着样的氨基酸分子含有一个正电荷和一个负电荷，称为兼性离子。α-氨基酸除R基为氢（甘氨酸）以外，其α-碳原子实一个手性碳原子，因此都具有旋光性。并且蛋白质中发现的氨基酸都是L型的。α-氨基酸都是白色晶体，熔点很高，一般在200℃以上。每种氨基酸都有特殊的晶体形状。利用结晶形状可以鉴别各种氨基酸。除胱氨酸和酪氨酸外，一般都能溶于水。脯氨酸和羟脯氨酸还能溶于乙醇或乙醚中。 二、氨基酸的分类 从各种生物体中发现的氨基酸已有180多种，但是参与蛋白质组成的常见氨基酸或称基本氨基酸只有20种。此外在某些蛋白质中还存在若干种不常见的氨基酸，它们都是在已合成的肽链上由常见的氨基酸经专一酶催化的化学修饰转化而来的。180多种天然氨基酸中，大多数是不参与蛋白质组成的，这些氨基酸被称为非蛋白质氨基酸。参与蛋白质组成的20种氨基酸称为蛋白质氨基酸。为表达蛋白质或多肽结构的需要，氨基酸的名称常使用三字母的简写符号表示，有时也使用单字母的简写符号表示，后者主要用于表达长多肽链的氨基酸序列。这两套简写符号见于表3-1。 （一） 常见的蛋白质氨基酸前面说过，各种氨基酸的区别就在于侧链R基的不同。这样组成蛋白质的20种常见氨基酸可以按R基的化学结构或极性大小进行分类。按R基的化学结构20种常见氨基酸可分为脂肪族、芳香族和杂环族3类，其中以脂肪族氨基酸为最多。1． 脂肪族氨基酸（1）中性氨基酸①甘氨酸（氨基乙酸）是唯一不含手性碳原子的氨基酸，因此不具旋光性。②丙氨酸（α-氨基丙酸）③缬氨酸（α-氨基-β-甲基丁酸）④亮氨酸（α-氨基-γ-甲基戊酸）⑤异亮氨酸（α-氨酸-β-甲基戊酸） （2）含羟基或硫氢氨基酸（图3-3）⑥丝氨酸（α-氨基-β-羟基丙酸）⑦苏氨酸（α-氨基-β-羟基丁酸）⑧半胱氨酸（α-氨基-β-巯基丙酸）在蛋白质中经常以其氧化型的胱氨酸存在。胱氨酸是由两个半胱氨酸通过它们侧链上的-SH基氧化成共价的二硫桥（disulfide bridge）连接而成的。 ⑨甲硫氨酸或称蛋氨酸（α-氨基-γ-甲硫基丁酸）它是体内代谢中甲基的供体。 （3）酸性氨基酸及其酰胺（图3-4）：⑩天冬氨酸（α-氨基丁二酸）11谷氨酸（α-氨基戊二酸）12天冬酰胺13谷氨酰胺这两个酰胺在生理pH范围内其酰胺基不被质子化，因此侧链不带电荷。 （4）碱性氨基酸14赖氨酸（α，ε-二氨基己酸）15精氨酸（α-氨基-σ-胍基戊酸）在蛋白质代谢中很重要，它是动物体内尿素形成中的中间物。2. 芳香族氨基酸16苯丙氨酸（α-氨基-β-苯基丙酸）血浆和尿中游离氨基酸浓度的测定被临床上用作诊断的指标，其中苯丙氨酸浓度的测定就被用于苯丙酮尿症的诊断。17酪氨酸（α-氨基-β-对羟基丙酸）18色氨酸（α-氨基-β-吲哚基丙酸）在植物和某些动物体内能转变为尼克酸（维生素PP）。3. 杂环族氨基酸19组氨酸（α-氨基-β-咪唑基丙酸）也属于碱性氨基酸。大量存在于珠蛋白（globin）中。 20脯氨酸（β-吡咯烷基-α-羧酸）它与一般的α-氨基酸不同，没有自由的α-氨基，它是一种α-亚氨基酸，后者可以看成是α-氨基酸的侧链取代了自身氨基上的一个氢原子而形成的杂环结构。 按R基的极性性质，20种常见氨基酸可以分成以下4组：①非极性R基氨基酸；②不带电荷的极性R基氨基酸；③带正电荷的R基氨基酸；④带负电荷的R基氨基酸（指在细胞内的pH范围即pH 7左右时的解离状态）。 1. 非极性R基氨基酸 这一组共有8种氨基酸。4种带有脂肪烃侧链的氨基酸，即丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸；两种含芳香环氨基酸：苯丙氨酸和色氨酸；一种含硫氨酸即甲硫氨酸和一种亚氨基酸，脯氨酸。这组氨基酸在水中的溶解度比极性R基氨基酸小。这组氨基酸中以丙氨酸的R基疏水性最小，它介于非极性R基氨基酸和不带电荷的极性R基氨基酸之间。 2. 不带电荷的极性R基氨基酸 这一组有7种氨基酸。这组氨基酸比非极性R基氨基酸易溶于水。它们的侧链中含有不解离的极性基，能与水形成氢键。丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸中侧链的极性是由于它们的羟基造成的；天冬酰胺和谷氨酰胺的R基极性是它们的酰胺基引起的；半胱氨酸则是由于含有巯基（-SH）的缘故。甘氨酸的侧链介于极性与非极性之间，有时也把它归入非极性类，但是它的R基只不过是一个氢原子，对极性强的α-氨基和α-羧基影响很小。这一组氨基酸中半胱氨酸和酪氨酸的R基极性最强。半胱氨酸的巯基和酪氨酸的酚羟基，虽然在pH 7时电离很弱，但与这组中的其他氨基酸侧链相比失去质子的倾向要大的多，例如半胱氨酸的-SH。3. 带正电荷的R基氨基酸 这是一组碱性氨基酸，在pH 7 时携带正净电荷。属于碱性氨基酸的有赖氨酸、精氨酸和组氨酸。赖氨酸除α-氨基外，在侧链的ε位置上还有一个-NH3；精氨酸含有一个带正电荷的胍基；组氨酸有一个弱碱性的咪唑基。在pH 6.0时，组氨酸分子50%以上质子化，但在pH 7.0时，质子化的分子不到10%。组氨酸是唯一一个R基的pKa值在7附近的氨基酸。 4. 带负电荷的R基氨基酸 5. 属于一组的是两种酸性氨基酸：天冬氨酸和谷氨酸。这两种氨基酸都含有两个羧基，并且第二个羧基在pH 7左右也完全解离，因此分子带负电荷。 （二） 不常见的蛋白质氨基酸 有些氨基酸虽然不常见但在某些蛋白质中存在。它们都是相应的常见氨基酸经修饰而来的。其中包括5-羟赖氨酸（5-hydroxylysine）和4-羟脯氨酸（4-hydroxyproline），它们存在于结缔组织的胶原蛋白中。某些肌肉蛋白如肌球蛋白含有甲基化的氨基酸，包括甲基组氨酸（methylhistidine）、ε-N-甲基赖氨酸（ε-N-methyllysine）和ε-N，N，N-三甲基赖氨酸（ε-N，N，N-trimethyllysine）。γ-羧基谷氨酸（γ-carboxyglutamic acid）最先在凝血酶原中发现，它也存在于其他一些与血液凝固有关的蛋白质中。焦谷氨酸（pyroglutamic acid，p-Glu）在细菌紫膜质（bacteriorhodopsin）中找到，它是一种光驱动的质子泵蛋白质。某些涉及细胞生长和调节的蛋白质可以在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的-OH上进行可逆性磷酸化，磷酸化的氨基酸还有组氨酸和精氨酸。从甲状腺球蛋白中分离出甲状腺素和3，3’，5-三碘甲腺原氨酸（3，3’，5-triiodothyronine），它们是酪氨酸的碘化衍生物，其结构式见第17章。在染色体缔合的组蛋白（histone）中发现N-甲基精氨酸（N-methylarginine）和N-乙酰赖氨酸（N-acetyllysine）。此外，从谷物中分离的蛋白质中存在α-氨基已二酸（α-aminoadipic acid）。 （三） 非蛋白质氨基酸 除了参与蛋白质组成的20~30种氨基酸外，还在各种组织和细胞中找到150多种其他氨基酸。这些氨基酸大多是蛋白质中存在的L型α-氨基酸的衍生物。但是有一些是β- ，γ- ，或σ-氨基酸，并且有些事D型氨基酸。如细菌细胞壁的肽聚糖中发现有D-谷氨酸和D-丙氨酸；在一种抗生素短杆菌肽S（gramicidin S）中含有D-苯丙氨酸。这些氨基酸中有一些事重要的代谢物前体或代谢中间物。例如存在于肌肽和鹅肌肽中的β-丙氨酸是遍多酸（一种维生素）的一个成分；γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid）由谷氨酸脱羧产生的，它是传递神经冲动的化学介质，称神经递质（neurotransmitter）。肌氨酸（sarcosine）是一碳单位代谢的中间物，它和D-缬氨酸也是放线菌素D的结构成分。D-环丝氨酸（cycloserine）是一种链酶菌属（Streptomyces）细菌产生的抗生素，能抑制细菌细胞壁的形成，用作抗结核菌药物。羊毛硫氨酸（lanthionine）的内消旋体和外消旋体混合物可从羊毛的碱水解物中分离获得，它也是肽类抗生素枯草菌素（subtilin）和乳酸链球菌肽（nisin）的组成成分。瓜氨酸（L-citruline）和鸟氨酸（L-ornithine）是尿素循环的中间物。此外，甜菜碱（betaine）、高半胱氨酸（homocysteine）、高丝氨酸homoserine）等也都是重要的代谢中间物。 三、氨基酸的酸碱化学 掌握氨基酸的酸碱性质是及其重要的，是了解蛋白质的很多性质的基础，也是氨基酸的分析分离工作的基础。而氨基酸的分析分离是测定蛋白质的氨基酸组成和序列的必要步骤。 （一） 氨基酸的兼性离子形式过去曾长期认为，氨基酸在晶体甚至在水溶液中是以不解离的中性分子形式R?H2NCHCOOH存在的。后来发现氨基酸晶体的熔点很高，一般在200℃以上，例如甘氨酸在233℃熔解并分离；L-酪氨酸的熔点更高，344℃；但是普通的有机化合物如二苯胺（diphenylamine），熔点为53℃.此外还发现氨基酸能使水的介电常数（dielectric constant）增高，而一般的有机化合物如乙醇、丙酮等却使水的介电常数降低。如果氨基酸在晶体或水中主要是以兼性离子（zwitterion）亦称偶极离子（dipolar ion）的形式存在： 不带电荷的中性分子为数极少，那么上述的两个事实就很容易解释。也就是说氨基酸晶体是由离子晶格组成的，像氯化钠晶体一样，维持晶格中质点的作用力是强大的异性电荷之间的静电吸引，因此熔点高；而一般的有机化合物晶体是由分子晶格组成的，分子晶格中质点的维系是靠范德华力（van der Waalsforce），这种力比静电引力要弱得多，因此它们的熔点低。介电常数与介质分子的极性结构有关，极性分子的介电常数高。在20℃，水的介电常数为80，而1mol/L浓度的α-氨基酸水溶液，其介电常数为102~108。 （二） 氨基酸的解离 依照Br?nsted-Lowry的酸碱质子理论，酸是质子（H+）*的供体（donor），碱是质子的受体或接纳体（acceptor）。酸碱的相互关系如下： 这里原使得酸（HA）和生成的碱（A-）被称为共轭酸-碱对。酸和碱有同一性，互为存在条件；在一定条件下，又各向着和自己相反的方面转化；这一理论是符合辩证法的。 根据这一理论，氨基酸在水中的偶极离子既起酸（质子供体）的作用： 也起碱（质子受体）的作用： 因此是一类两性电解质。氨基酸完全质子化时，可以看成是多元酸，侧链不解离的中性氨基酸可看作二元酸，酸性氨基酸和碱性氨基酸可视为三元酸。现以甘氨酸为例，说明氨基酸的解离情况。甘氨酸盐酸是完全质子化的氨基酸，实质上是一个二元酸。它分步解离如下： 第一步解离，Ka1=[A°][H+]/[A+]第二步解离，Ka2=[A-][H+]/[ A°]-解离的最终产物（A）相当于甘氨酸钠盐。*在上列公式中，Ka1和Ka2分别代表α-碳上的-COOH和-NH3的解离常数（dissociationconstant）。一般，共轭酸的解离常数按其酸性递降顺序编号为Ka1，Ka2等。氨基酸的解离常数可用测定滴定曲线的实验方法求得。滴定可从甘氨酸（或称等电甘氨酸）溶液、甘氨酸盐酸或甘氨酸纳溶液开始（图3-9）。当0.1mol甘氨酸溶于水时，溶液的pH约等于6.0.如果用标准氢氧化钠溶液进行滴定，以加入的氢氧化钠的摩尔数对pH作图，则得滴定曲线B段（图3-9），在pH 9.60处有一个拐点。从甘氨酸的的解离公式（2）可知，当滴定至甘氨酸的兼性离子有一半变成阴离子，即[ A°]= [A-]时，则Ka2=[H+]，两边各取对数得pKa2=pH，这就是曲线B段拐点处的pH 9.60。如果用标准盐酸滴定，以加入的盐酸的摩尔数对pH作图，则得滴定曲线A段，在pH2.34处有一个拐点。同样，从解离公式（1）可知，pKa1=2.34，这两甘氨酸的等点兼性离子和阳离子的摩尔数相等，即[A°]=[A+]。如果利用Handerson-Hasselbalch公式： 以及所给的pKa1和pKa2等数据，即可计算出在任一pH条件下一种氨基酸的各种离子的比例。为了判断滴定曲线上的两个拐点，pH2.34和pH9.60，各种代表甘氨酸分子中的哪个基团的解离，可以把它们与简单的脂肪酸和脂肪胺的pKa值进行对比。脂肪酸的-COOH基pKa值一般为4~5，脂肪胺中的-NH3基pKa值在10~11。所以最可能的是pKa1=2.34代表甘氨酸的α-COOH解离，而pKa2=9.60代表它的α-NH3解离。甘氨酸中的α-COOH基的酸性（acidity）要比相应的脂肪酸—醋酸（pKa=4.76）强200多倍，这是因为甘氨酸中与羧基相邻的α-NH3基是一个强吸引电子的基团，产生一个强场效应而稳定羧基阴离子。同样，α-COO-基的存在也影响α-NH3的解离，甘氨酸的α-氨基的碱性（basidity）明显低于乙胺（pKa=10.75）。 R基不解离的氨基酸都具有类似甘氨酸的滴定曲线。这类氨基酸的pKa值相当pKa1的范围2.0~3.0，pKa2为9.0~10.0（表3-3）。带有可解离R基的氨基酸，相当于三元酸，有3个pKa值，因此滴定曲线比较复杂。甘氨酸滴定曲线（图3-9）中，两个解离基团的pKa值分的较开，两段（A、B）滴定曲线不重叠。当解离基团的pKa值比较接近时，两段曲线会发生重叠。这种情况在谷氨酸滴定曲线（A、B段）和赖氨酸滴定曲线（B、C段）中见到（图3-10）。 20种基本氨基酸，除组氨酸外，在生理pH（7左右）下都没有明显的缓冲容量，因为这些氨基酸的pKa值都不在pH7附近（表3-3），而缓冲容量只有在接近pKa值时才显现出来。从表3-3可知，组氨酸咪唑基的pKa值为6.0，在pH 7附近有明显的缓冲作用。红细胞中运载氧气的血红蛋白由于含有较多的组氨酸残基，使得它在pH 7左右的血液中具有显著的缓冲能力，这一点对红细胞在血液中起运输氧气和二氧化碳的作用来说是重要的。 （三） 氨基酸的等电点从甘氨酸的解离公式或解离曲线（图3-9）可以看到，氨基酸的带电状况与溶液的pH有关，改变pH可以使氨基酸带上正电荷或负电荷，也可以使它处于正负电荷数相等即净电荷为零的兼性离子状态。图3-9中曲线A段和曲线B段之间的拐点（pI=5.97）就是甘氨酸处于净电荷为零时的pH，称为等电点（isoelectric point，缩写为pI）或等电pH（pH1）。在等电pH时，氨基酸在电场中既不向正极也不向负极移动，即处于等电兼性离子（极少数为中性分子）状态，少数解离成阳离子和阴离子，但解离称阳离子和阴离子的数目和趋势相等。 对侧链R基不解离的中性氨基酸来说，其等电点是它的pKa1和pKa2的算术平均值：pI=0.5（pKa1+pKa2）， 这可由氨基酸的解离公式推导出来。将前面所列的Ka1和Ka2的等式， Ka1=[A°][H+]/[A+]Ka2=[A-][H+]/[ A°] 相乘得：Ka1·Ka2=[H+]2[A-]/[A+]在等电点时，[A-]=[A+]，因此：[H+]2=Ka1·Ka20.5[H+]=（Ka1·Ka2）如以I代表等电点的氢离子浓度，则： 0.5I= Ka1·Ka2）等式两边取负对数得： pI=0.5（pKa1+pKa2） 例如，甘氨酸的等电点： pI=0.5（2.34+9.60）=5.97 从上式可以看出，pI值与该离子浓度基本无关，只取决于等电兼性离子（A°）两侧的pKa值。同样，对有3个可解离基团的氨基酸例如谷氨酸和赖氨酸来说，只要写出它的解离公式，然后取的等电兼性离子两边的pKa值的平均值，则得其pI值。谷氨酸解离如下： 等电点时，谷氨酸主要以兼性离子[A°]存在，[A+]和[A-]很小而且相等，A的量可以忽略不计，因此： pIGlu=0.5（pKa1+pKa2）=0.5（2.19+4.25）=3.22赖氨酸的解离情况是： 2+在这里[A]极小，A°是等电pH时的主要形式，因此 pILys=0.5（pKa2+pKa3）=0.5（8.95+10.53）=9.74在等电点以上的任一pH，氨基酸带净电荷，并因此在电场中将向正极移动。在低于等电点的任一pH，氨基酸带有净电荷，在电场中将向负极移动。在一定pH范围内，氨基酸溶液的pH离等电点愈远，氨基酸所携带的净电荷愈大。 2-（四） 氨基酸的甲醛滴定氨基酸虽然是一种两性电解质，既是酸又是碱，但是它却不能直接用酸、碱滴定来进行定量测定。这是因为氨基酸的酸、碱滴定的等电点pH或过高（12~13）或过低（1~2），没有适当的指示剂可被选用。然而向氨基酸例如甘氨酸溶液中加入过量的甲醛，用标准氢氧化钠滴定时，由于甲醛与氨基酸中的-NH2作用形成-NH·CH2OH，-N（CH2OH）2等羟甲基衍生物（图3-11）而降低了氨基酸的碱性，相对地增强了-NH3的酸性解离，使pKa2减少2~3个pH单位，pKa2移至7附近（见图3-12）。氢氧化钠滴定曲线B段向pH低的方向转移（变成曲线C段），滴定终点也移到pH 9附近。在有甲醛存在的情况下，滴定曲线发生显著变动的原因也可以这样来解释。从下面的关系式： -看出，甲醛与H2NCH2COO结合，有效地减低了后者的浓度，所以对于加入任何量得碱，--[H2NCH2COO]/[H3NCH2COO]的比值总要比不存在甲醛的情况下小得多。加入甲醛的甘氨酸溶液用标准盐酸滴定时，滴定曲线A段并不发生改变。由此可见用氢氧化钠滴定是和-NH3的氢离子发生反应，在没有加入甲醛的条件下，pKa2=9.60代表甘氨酸中-NH3的解离。氨基酸的甲醛滴定（formol titration）是测定氨基酸的一种常用方法。当氨基酸溶液中存在1 mol/L甲醛时，滴定终点由pH 12左右移至pH 9附近，亦即酚酞指示剂的变色区域。这是S?rensen甲醛滴定法的基础。 四、氨基酸的化学反应 氨基酸的化学反应主要是指它的α-氨基和α-羧基以及侧链上的功能团所参与的反应。下面我们着重讨论在蛋白质化学中具有重要意义的氨基酸化学反应。（一） α-氨基参加的反应 1. 与亚硝酸反应 氨基酸的氨基也和其他的伯胺一样，在室温下与亚硝酸作用生成氮气，其反应式如下： 在标准条件下测定生成的氮气体积，即可计算出氨基酸的量。这是Van Slyke法测定氨基酸的基础。此法可用于氨基酸的定量和蛋白质的水解程度的测定。这里值得注意的是生成的氮气（N2）只有一半来自氨基酸。此外应该指出，除α-NH2外，赖氨酸的ε-NH2也能与亚硝酸反应，但速度较慢；而α—NH2作用3~4min即反应完全。 2. 与酰化试剂反应 氨基酸的氨基与酰氯或酸酐在弱碱溶液中发生作用时，氨基即被酰基化。例如与苄氧（苯甲氧）甲酰氯（carbobenzyloxychloride）反应： R?这里-NH2中的一个H被苄氧甲酰基（简写为Cbz）取代生成Cbz-NH-CH-COOH。除苄氧甲酰氯外，酰化试剂还有叔丁氧甲酰氯（tertiary butyloxycarbonyl chloride）、对甲苯磺酰氯（p-toluenesulfonyl chloride）以及邻苯二甲酰酐（phthalic anhydride）等。这些酰化试剂在多肽和蛋白质的人工合成中被用作氨基的保护试剂。它们的化学结构如下所示： 另一个酰化试剂是丹磺酰氯（dansyl chloride），它是5-二甲基氨基萘-1-磺酰氯（5-dimethylaminonaphthalene-1-sulfony chloride）的简称，被用于多肽链N末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定。 3. 烃基化反应 氨基酸氨基的一个H原子可被烃基（包括环烃及其衍生物）取代，例如与2,4-二硝基氟苯（2,4-dinitrofluorobenzene或1-fluoro-2,4-dinitrobenzene，简写为DNFB或FDNB）在弱碱性溶液中发生亲核芳环取代反应而生成二硝基苯基氨基酸（dinitrophenyl amino acid，简称DNP-氨基酸）。这个反应首先被英国的Sanger用来鉴定多肽、蛋白质的N末端氨基酸。α-氨基另一个重要的烃基化反应式与苯异硫氰酸酯（phenylisothiocyanate，缩写为PITC）在弱碱性条件下形成相应的苯氨基硫甲酰（phenylthiocarbamotl，缩写为PTC衍生物。后者在硝基甲烷中与酸（如三氟乙酸）作用发生环化，生成相应的苯乙内酰硫脲（phenylthiohydantoin，缩写为PTH）衍生物。这些衍生物是无色的，可用层析法加以分离鉴定（层析法基本原理见本章后面）。这个反应首先被Edman用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。它在多肽和蛋白质的氨基酸序列分析方面占有重要地位。 4. 形成西佛碱反应 氨基酸的α-氨基能与醛类化合物反应生成弱碱，即所谓西佛碱（Schiff’s base）。 西佛碱是以氨基酸为底物的某些酶促反应例如转氨基反应的中间物。 5. 脱氨基反应 氨基酸在生物体内经氨基酸氧化酶（amino acid oxidase）催化即脱去α-氨基而转变成酮酸（见下册第30章）。 （二） α-羧基残基的反应 氨基酸的α-羧基和其他有机酸的羧基一样，在一定的条件子啊可以发生成盐、成酯、成酰氯、成酰胺以及脱羧和叠氮化等反应。1. 成盐和成酯反应 氨基酸与碱作用即生成盐，例如与氢氧化钠反应得氨基酸钠盐，其中重金属盐不溶于水。氨基酸的羧基被醇酯化后，形成相应的酯。例如氨基酸在无水乙醇中通入干燥氯化氢气体或加入二氯亚砜，然后回流，生成氨基酸乙酯的盐酸盐。氨基酸酯是制备氨基酸的酰胺或酰肼的中间物。 当氨基酸的羧酸变成甲酯、乙酯或钠盐后，羧基的化学反应性能即被掩蔽或者说羧基被保护，而氨基的化学反应性能得到加强或说氨基被活化，容易和酰基或烃基结合，这就是为什么氨基酸的酰基化和烃基化需要在碱性溶于中进行的原因。2. 成酰氯反应 氨基酸的氨基如果用适当的保护基，例如苄氧甲酰基保护后，其羧基可与二氯亚砜或五氯化磷作用生成酰氯： 这个反应可使氨基酸的羧基活化，使它容易与另一氨基酸的氨基结合，因此在多肽人工合成中是常用的。3. 脱羧基反应在生物体内氨基酸经氨基酸脱羧酶（amino acid decarboxylase）作用，放出二氧化碳并生成相应的一级胺： 谷氨酸脱羧后形成γ-氨基丁酸，详见下册第30章。 4. 叠氮反应氨基酸的氨基通过酰化加以保护，羧基经酯化转变为甲酯，然后与肼和亚硝酸反应即变成叠氮化合物。此反应使氨基酸的羧基活化。氨基酸叠氮化合物常用于肽的人工合成。（三） α-氨基和α-羧基共同参加的反应 1. 与茚三酮反应在氨基酸的分析化学中，具有特殊意义的是氨基酸与茚三酮（ninhydrin）的反应。茚三酮在弱酸性溶液中与α-氨基酸共热，引起氨基酸氧化脱氨、脱羧反应，最后茚三酮与反应产物—氨和还原茚三酮（hydrindantin）发生作用，生成紫色物质。其反应过程见图3-13。用纸层析或柱层析把各种氨基酸分开后，利用茚三酮显色可以定性鉴定并用分光光度计法在570nm定量测定各种氨基酸。定量释放的CO2可用测压测量，从而计算出参加反应的氨基酸量。 两个亚氨基酸，脯氨酸和羟脯氨酸，与茚三酮反应并不释放NH3，而直接生成亮黄色化合物，最大光吸收在440nm。其结构式如下所示：2.成肽反应一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基可以缩合成肽，形成的键称肽键。例如甘氨酸在乙二醇中加热缩合，生成二酮吡嗪（diketopiperazine）或称甘氨酸酐。 （四） 侧链R基参加的反应 氨基酸侧链具有功能团时也能发生化学反应。这些功能团有羟基、酚基、巯基（包括二硫键）、吲哚基、咪唑基、胍基、甲硫基以及非α-氨基和非α-羧基等。每种功能团都可以喝多种试剂起反应。其中有些反应是蛋白质化学修饰的基础。所谓蛋白质的化学修饰就是在较温和的条件下，以可控制的方式使蛋白质与某种师姐（称化学修饰剂）起特异反应，以引起蛋白质中个别氨基酸侧链或功能团发生共价化学改变。化学修饰在蛋白质的结构与功能的研究中是很有用的。关于侧链基团的反应仅举几个重要例子加以说明。酪氨酸的酚基还可以与重氮化合物（例如对氨基苯磺算的重氮盐）结合生成橘黄色的化合物： 这就是Pauly反应，可用于检测酪氨酸。组氨酸的侧链咪唑基与重氮苯磺酸也能形成相似的化合物，但颜色稍有差异，呈棕红色。此化合物的结构如下： 精氨酸的侧链胍基在硼酸钠缓冲液（pH8~9,25~35℃）中，与1,2-环己二酮（cyclohexandeione）反应，生成缩合物： 此缩合物在该反应条件下是稳定的，但在羟胺缓冲液中反应可逆转，重新生成精氨酸。此反应曾用于氨基酸序列分析以及结构与功能的研究。色氨酸的侧链吲哚基在温和条件下可被N-溴代琥珀酰亚胺（N-bromosuccinimide）氧化。此反应可用于分光光度法测定蛋白质中色氨酸的含量，并能在色氨酸和酪氨酸残基处选择性化学断裂肽键。N-溴代琥珀酰亚胺和色氨酸氧化产物的结构如下： 蛋氨酸侧链上的甲硫基是一个很强的亲核基团，与烃化试剂如甲基碘容易形成锍盐（sulfonium salt）： 此反应可被巯基试剂逆转。在逆转反应中，原有的甲基和新加入的甲基除去的机会是相等的，因此当用14C标记的甲基碘处理时，获得的蛋氨酸将有50%是同位素标记的。半胱胺酸侧链上的巯基（-SH），反应性能很高，在微碱性pH下，-SH基发生解离形成硫醇阴离子（-CH2-S-）。此阴离子是巯基的反应形式，能与卤化烷例如碘乙酸、碘乙酰胺、甲基碘等迅速反应，生成相应的稳定烷基衍生物 半胱氨酸的巯基能打开乙撑亚胺（ethyleneimine），即氮丙啶（aziridine）的环： 生成的侧链带有正电荷（ε-NH3），它为胰蛋白酶水解肽链提供了一个新位点，这对氨基酸序列测定是很有用的。同时此反应也可用来保护肽链上的-SH基，以防止被重新氧化为二硫键。巯基能和各种金属离子形成稳定程度不等的络合物： 此反应是蛋白结晶学中制备重原子衍生物最常用的方法之一。由于许多蛋白质，如SH酶，其活性中心涉及-SH基，当遇到重金属离子而生成硫醇盐时，将导致酶的失活，因此制备这类蛋白质时应避免进入重金属离子。 半胱氨酸可与二硫硝基苯甲酸（dithionitrobenzoic acid，缩写为DTNB）或称Ellman试剂繁盛硫醇-二硫化物交换反应： 反应中1分子的半胱氨酸引起1分子的硫硝基苯甲酸的释放。它在pH 8.0时，在412nm波长处有强烈的光吸收，因此可利用分光光度法定量测定—SH基。2+2+2+2+巯基很容易受空气或其他氧化剂氧化。当有痕量的金属离子如Cu，Fe，Co或Mn存在下，巯基的空气氧化将显著提高。这些离子可能是反应所需的催化剂，巯基的这些金属络合物可能是与氧作用的真正反应物。硫醇氧化中一般遇到的只有两种氧化衍生物：二硫化物和磺酸。前者是硫醇的空气氧化产物： 例如半胱氨酸氧化成胱氨酸（见本章氨基酸的分类部分）。后者是更强的氧化剂作用下产生的，例如用过甲酸（performic acid）处理，-SH基和-S-S-（二硫键）被氧化成磺酸基（-SO3H）。胱氨酸中的二硫键在稳定蛋白质的构象上起很大的作用。氧化剂和还原剂都可打开二硫键。过甲酸可以定量地打开二硫键，生成磺基丙氨酸（cysteic acid）。还原剂如巯基化合物（R-SH）也能打开二硫键，生成半胱氨酸及相应的二硫化物： 这里使用的还原剂有巯基乙醇（mercaptoethanol）、巯基乙酸（mercaptoacetic acid）、二硫苏糖醇（dithiothreitol，缩写为DTT）等。其中最有用的是二硫苏糖醇及其异构体二硫赤藓糖醇（dithioerythritol）： 反应中，二硫苏糖醇形成一个含分子内二硫键的稳定六元环，因此平衡向右方移动。 由于半胱氨酸中的巯基很不稳定，极易被氧化成二硫键，因此利用还原剂巯基乙醇等打开二硫键时，需要进一步用上面已述及的卤化烷如碘乙酰胺、碘乙酸以及3-溴丙胺（3-bromopropylamine）等试剂与巯基作用把它保护起来，防止它的重新氧化。 五、氨基酸的光学活性和光谱性质 （一） 氨基酸的光学活性和立体化学前面曾谈到，α-氨基酸的α-碳是一个不对称碳原子（手性碳原子），除非与它相连的R基为氢原子。不对称碳原子上的4个取代基在空间的取向可以有两种方式即两种构型，D型和L型。氨基酸的构型（指α-碳的构型）也和单糖一样以D-甘油醛为参考物。从蛋白质的酸水解液或酶促水解液中分离获得的氨基酸都是属L型。但是D型氨基酸也在自然中找到，特别是作为某些肽抗生素和某些微生物细胞壁的成分存在（见本章“非蛋白质氨基酸”）。 旋光性物质在化学反应中，只要其不对称原子经过对称状态的中间阶段，便将发生消旋作用并转变为D型和L型的等摩尔混合物，成[外]消旋物（racemate）。蛋白质用碱进行水解时，或用一般的有机合成方法合成氨基酸时，得到的氨基酸都是无旋光性的DL-消旋物。苏氨酸、异亮氨酸，羟脯氨酸和羟赖氨酸除了α-碳原子是一个不对称碳原子外，还有第二个不对称碳原子。因此在实验室里可以存在4种光学异构体，它们分别称为L-，D-，L-别-（L-allo-）和D-别-（D-allo-）氨基酸，例如L-苏氨酸，D-苏氨酸，L-别苏氨酸（L-allo-threonine）和D-别苏氨酸（D-allo-threonine）和D别苏氨酸（D-allo-threonine）。 苏氨酸的光学异构体示于图3-15.L-和D-，L-别和D-别各位一对对映体；苏氨酸和别苏氨酸互为非对映体。实验证明，苏氨酸的4种异构体在蛋白质中只发现其中一种，即L-苏氨酸。 胱氨酸是一种特殊情况，因为两个不对称中心是相同的。在这种情况下两个不对称中心的构型可以使相同的，这是产生D型和L型两个异构体；也可以是不相同的，这时一个不对称中心的构型将是里一个不对称中心的构型的镜像，这样，分子内部互相抵消而无旋光性。这种胱氨酸异构体称为内消旋氨酸（meso-cystine）。 氨基酸的旋光符号和大小取决于它的R基性质，并且与测定的容易pH有关，这是因为在不同的pH条件下氨基和羧基的解离状态不同。 比旋是α-氨基酸的物理常数之一，是鉴别各种氨基酸的一种根据。L型α-氨基酸的比旋见表3-4. （二） 氨基酸的光谱性质 现代生物化学中最重要和最令人振奋的进展之一是光谱学方法的应用，此方法能测定被分子和原子吸收或发射的不同频率的能量。蛋白质、核酸和其他生物分子的光谱学研究为深入了解这些分子的结构和动态过程提供了许多新的信息。1.紫外吸收光谱氨基酸的光谱测定已阐明氨基酸的结构和化学方面的许多细节。参与蛋白质组成的20种氨基酸在电磁波谱的可见光区都没有光吸收，在红外区和远紫外区（λ3-1-1数（molar absorptivity或molar absorption coefficient）ε275=1.4×10mol·L·cm；2-1-1苯丙氨酸的λmax再257nm，ε257=2.0×10mol·L·cm；色氨酸的λmax在280nm，3-1-1ε280=5.6×10mol·L·cm。 蛋白质由于含有这些氨基酸，所以也有紫外吸收能力，一般最大吸收在280nm波长处，因此能利用分光光度法很方便地测定样品中蛋白质的含量。但是不同的蛋白质中这些氨基酸的含量不同，所以它们的摩尔吸收系数是不完全相同的。分光光度法定量分析所依据的是Lambert-Beer定律： 芳香族氨基酸在紫外区呈现较弱的荧光（fluorescence），近来证明了色氨酸显现磷光（phosphorescence），一种寿命较长的反射光。这些荧光和磷光性质在研究蛋白质结构和动力学中特别有用。2. 核磁共振波谱20世纪50年发展起来的核磁共振（nuclear magnetic resonance，NMR）是一项涉及在外磁场存在下某些原子核吸收射频（radio frequency）能量的波谱技术。原子核带有正电荷，只要自旋量子数不等于零，其行为就像绕轴自旋（spining）的小磁体，因而能与外加磁场互相作用。例如H,C，H，N和P的核都属于这一类，能发生核磁共振。当无强的外磁场存在时，磁核的自旋是随机的。然而当含有自旋核的样品置于强磁铁的两极之间时，核就采取特定的取向，犹如指南针在地球磁场中有自己的取向那样。一个自旋的H核或C核取向的结果是使自己的小磁场与外磁场平行或与外磁场反平行。这两种取向的核能量是不同的，因而两种磁核的数量是不等的。平行取向的能力消耗，使这种自旋态比反平行取向的略多。如果现在已取向的核用一个合适频率的电磁辐射照射，则会发生能量吸收，从低能态“自旋翻转”（spin-filp）成高能态。当发生这种自旋翻转时，称此核处于与外加磁场共振，繁盛的能量吸收称为共振吸收，并因此得名核磁共振（NMR）。共振所需的射频能量，即相邻两个能及之间的能量差（ΔE）决定于外加磁场强度（H0）和被照射原子核的旋磁比（magetogyric*ratio，γ），后者是原子核的特征常数，不同的核，其值不同。 1实验中磁场场强度一般用14100高斯即1.41T（特斯拉）。在此磁场强度下，为使H核13进入共振需要60MHz（1MHz=1兆赫兹=百万周/秒）范围的射频能量，要使C核将在它们的NMR谱上只出现一个单一吸收峰。但是实际并不是如此，在分子中的每个原子核的周围都有电子云和其他核的存在。绕核的环流电子云会产生自己的局部磁场（Hloc），在外加磁场中该磁场的方向与外加磁场的方向相反，致使原子核实际上受到的有效磁场强度（H）比外加磁场强度（H0）小： 这一现象称为电子云对核的屏蔽作用。 O O‖ ‖1 分子中既使同一种原子核，例如CH3-C-O-CH3中CH3-C-和-O-CH3基团的H核，由于所处的化学（电子）环境不尽相同，因而它们被屏蔽的程度也不一样。如果NMR仪器足够灵敏，就能在波谱上观察到这些细微差别，呈现不同的NMR信号。这种由于环境差别引起外加磁场（H0）或共振频率（γ）偏离标准值而产生移动的现象称化学位移（chemical shift）。在NMR波谱图上横坐标为化学位移，纵坐标为射频能量吸收强度。化学位移常用δ表示，为113确定δ值大小常选用四甲基硅（TMS）作为H和C NMR谱的参考物，规定它的化学位移为-6零。一个δ单位等于波谱仪工作频率的百万分之一（ppm，即10）.例如用一台60MHz的仪1器测定样品的H NMR谱，1ppm=60Hz。一般说，化学位移： NMR波谱的吸收峰经常会分裂成几个峰，这一现象称为自旋-自旋分裂或自旋-自旋偶合。这是由于基团间的核自旋相互作用（偶合）的结果。有相互作用和无相互作用时跃迁能量称为偶合常数（coupling constant）。谱线的分裂一般服从n+1的规律，当相邻基团上有n个质子时，则该基团的质子吸收峰将分裂成n+1个峰。NMR波谱技术在氨基酸和蛋白质化学表征起着重要作用。经过这些研究已提出几个重要原则。第一，氨基酸质子的化学位移决定于它的特定化学环境，并因而也决定于氨基酸的电离状态；第二，滴定时电子密度的变化将迅速传递到脂肪氨基酸的整个碳链和芳香族氨基酸的脂肪链部分，这已被有关质子的化学位移发生变化所证实；第三，相邻碳上质子间的偶合常数大小在某些情况下取决于氨基酸的电离状态。这些测定已被用于研究蛋白质中氨基酸残基的电离行为。更先进的高磁场NMR也用于肽和小蛋白质的三维结构测定。113六、氨基酸混合物的分析分离 为了测定蛋白质的氨基酸组成或从蛋白质水解液中制取氨基酸，需要对氨基酸混合物进行分析分离工作。（一） 分配层析法的一般原理层析即色层分析也称色谱（chromatography）,最先由俄国植物学家M.C.Цbet于1903年提出来的。他所进行的色层分析实际上式一种吸附层析（adsorption chromatography）。1941年英国学者Martin与Synge提出分配层析。此后这种方法得到了很大的发展，至今已有很多形式的分配层析，但它们的基本原理是一样的。所有的层析系统通常都由2个相组成，一个为固定相或静相（staionary phase），一个为流动相或动相（mobile phase）。混合物在层析系统中的分离决定于该混合物的组分在这亮相中的分配情况，一般用分配系数（partition或distribution coefficient）来描述。1891年Nernst提出了分配定律（partiton law）：当一种溶质在两种给定的互不相溶的溶剂中分配时，在一定温度下到达平衡后，溶质在两相中的浓度比值为一常数，即分配系数（KD）。 物质分配不仅可以在互不相溶的两种溶剂即液相-液相系统中进行，也可以在固相-液相或气相-液相间发生。层析系统中的静相可以使固相、液相或固-液混合相（半液体）；动相可以使液相或气相，它充满于静相的空隙中，并能流过静相。这里需要提出有效分配系数（Keff）的概念，因为某一物质在层析系统中的行为并不直接决定于它的分配系数Kd而是取决于有效分配系数Keff。 对液相-液相层析系统来说： 这里，cA和cB的意义同前；VA和VB分别为A相和B相的体积；Rv为A、B两相的体积比。由此可见，Keff是Rv的函数，溶质的有效分配系数可以调整两相的体积比而加以改变。利用层析法分离混合物例如氨基酸混合物，其先决条件是各种氨基酸成分的分配系数要有差异，哪怕是很小的差异。一般差异越大，越容易分开。现在我们举逆流分溶或逆流分配（countercurrent distri）的方法作为分配层析原理的说明。此方法的基本原理如图3-22所示。取一系列试管（称为分溶管），向其中第1号管加入互不相溶的两种溶剂，A溶剂为上相，图中作为动相，B溶剂为下相，作为静相，并假设上下两相的体积相等。然后加入物质Y（Kd=1）和物质Z（Kd=3）的混合物（假设总量各为64份），各组分物质将按自身特有的分配系数在上下相中进行分配。达平衡后，将上相转移到第2号管内，其中含有相同体积的新下相。从第1号管转移来的样品将在第2号管的上下相中再分配。与此同时，向第1号管内加入新的上相，这里也将发生样品的再分配。这样完成了第1次转移。如是上相（动相）将连续地向第3、4、5,,,,号管作第2、3、4,,,,次得转移。一般说来，转移n次后，某一物质在静相（下相）和动相（上相）中的分数含量，即p+q=1。例如物质Y的Kd=q（动相）/p（静相）=1，即p+q=0.5+0.5=1转移n次后，在第k号管中某一物质的含量可由下式计算： 例如，物质Z，转移4次后在第3号管中的含量为： 因为物质Z的总量为64，所以该管中的含量应是：27从图3-22中的分溶曲线可以看出，分配系数大的物质Z（Kd=3）沿一系列分溶管的“移动”速度，要比分配系数小的物质Y（Kd=1）快。从分溶曲线还可以看出，每一种物质在一系列分溶管中是相当集中的，分溶曲线呈峰形，因此只要使用足够数目的分溶管，继续进行分配，就可以使两个峰彼此完全分开。一定量得某一溶质在一定量的溶剂系统中分配时，转移次数（或称理论板数，这是借用蒸馏技术中的术语）越多，即分溶管数越多，其分溶曲线的峰形越窄而高（图3-23），这样有利于混合物中各物质的完全分离。 上述的这种连续分配操作可以在完全自动化的逆流分溶仪上进行。逆流分溶仪一般只用于制备分离，特别是用于蛋白质、肽、核酸和抗生素等的分离纯化。目前在分析分离上使用较广的分配层析（partition chromatography），包括柱层析、纸层析和薄层层析等都是在上述的分配分离的基础上发展起来的。方法的基本原理与逆流分溶法相同。（二） 分配柱层析层析柱中的填充物或称支持剂（图3-24）都是一些具有亲水性的不溶物质，如纤维素、淀粉、硅胶等。支持剂吸附着一层不会流动的结合水，可以看作为固定相，沿固定相流过的与它不互溶的溶剂（如苯酚、正丁醇）是流动相。由填充料构成的柱床可以设想为由无数的连续板层组成，每一板层起着微观的“分液管”作用。当用洗脱剂（eluent）洗脱时，即流动相移动时，加在柱上端的氨基酸混合物样品在两相之间将发生连续分配，混合物中具有不同分配系数的各种成分沿柱以下不同的速度向下移动。分部收集柱下端的洗出液（eluate）。收集的组分分别用茚三酮显色定量。以氨基酸量对洗出液体积作图，得洗脱曲线。曲线中的每个峰相当于某一种氨基酸。（三） 纸层析[滤]纸层析（filter-paper chromatography）也是分配层析的一种。这里，滤纸纤维素上吸附的水是固定相，展层用的溶剂是流动相。层析时，混合氨基酸在这两相中不断分配，使它们分布在滤纸的不同位置上。纸层析也是分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术，可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。将氨基酸混合物点在滤纸的一个角上，称原点。然后再密闭的容器中用一个溶剂系统（如丁醇-乙酸）沿滤纸的一个方向进行展层（development）。烘干滤纸后，旋转90°，再用另一个溶剂系统（如苯酚-甲酚-水）进行第二向展层。当用茚三酮溶液显色时，得到一个双向纸层析谱（two-dimensional paper chromatogram）。如果混合物中所含的氨基酸种类较少，并且其Rf值彼此相差较大，则在一个溶剂系统中进行单向层析即可。在纸层析中，从原点至氨基酸停留的距离（X）与原点至溶剂前沿的距离（Y）之比，即X/Y称为Rf值，即相对迁移率。只要溶剂系统、温度、湿度和滤纸型号等试验条件确定，则每种氨基酸的Rf值是恒定的。(四)薄层层析薄层层析（thin-layer charomatography）分辨率高，所需样品量微，层析速度快，可使用的支持剂种类多。如纤维粉、硅胶和氧化铝粉等，因此应用比较广泛。薄层层析的大体步骤如下：把支持剂涂布在玻璃板上使称一个均匀的薄层，把要分析的样品滴加在薄层的一端，然后用合适的溶剂在密闭的容器中进行展层，使样品中各个成分分离开来，最后进行鉴定和定量测定。（五）离子交换层析交换柱层析（ion-exchan column charomatography）是一种用离子交换树脂作支持剂的层析法。离子交换树脂是具有酸性或碱性基团的人工合成聚苯乙烯-苯二乙烯（polystyrenedivinybenzene）等不溶性高分子化合物。聚苯乙烯-苯二乙烯是由苯乙烯（单体）和苯二乙烯（交联剂）进行聚合和交联反应生成的具有网状结构的高聚物。它是离子交换树脂的基质（matrix），带电基团是通过后来的化学反应引入基质的。树脂一般都制成球形的颗粒。+阳离子交换树脂含有的酸性基团如-SO3H（强酸型）或-COOH（弱酸型）可解离处H离子，+当溶液中含有其他阳离子时，例如在酸性环境中的氨基酸阳离子，它们可以和H发生交换而“结合”在树脂上。同样地阴离子交换树脂含有的碱性基团如-N（CH3）（强碱型）或-NH3OH3OH-（弱碱型）可解离除OH，能和溶液里的阴离子，例如和碱性环境中的氨基酸阴离子发生交换而结合在树脂上： 分离氨基酸混合物经常使用强酸型阳离子交换树脂。在交换柱中，树脂先用碱处理成纳型，将氨基酸混合液（pH2~3）上柱。在pH2~3时，氨基酸主要以阳离子形式存在，与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上。氨基酸在树脂上结合的牢固程度即氨基酸与树脂间的亲和力，主要决定于它们之间的静电吸引，其次是氨基酸侧链与树脂基质聚苯乙烯之间的疏水相互作用。在pH 3左右，氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引的大小次序是2++0碱性氨基酸（A）＞中性氨基酸（A）＞酸性氨基酸（A）。因此氨基酸的洗出顺序大体上式酸性氨基酸，中性氨基酸，最后碱性氨基酸。由于氨基酸和树脂之间还存在疏水相互作用，所以氨基酸的全部洗出顺序（分离图谱）。为了使氨基酸从树脂柱上洗脱下来，需要降低它们之间的亲和力，有效的方法是逐步提高洗脱剂的pH和盐浓度（离子强度），这样各自氨基酸将以不同的速度被洗脱下来。目前已有全部自动化的氨基酸分析仪（amino acid analyzer）。氨基酸分析仪的图解见图3-30.（六）气液层析当层析系统的流动相为气体如氢、氦、氮，固定相为涂渍在固体颗粒表面的液体时，此层析技术称为气液层析或气液色谱（gas-liquid chromatography），简称为气相层析或气相色谱。利用气相层析法进行分离组分的目的。涂有薄层液体的惰性颗粒（固定相）被装在一根长的不锈钢管或玻璃管中，称层析柱（chromatographic column），保持在适当的温度下，令高压的气体（流动相）连续地通过层析柱。待分析的样品注入进样室后经气化导入气相，流经固定相。此时，气化的样品将在流动的气相和固定的液相之间发生分配，把组分分离开来。被分开的组分和载气直接进入检测器。在这里组分的量变化转变为易测量的电信号，并被送入记录仪而记录下来，这就是气相层析洗脱曲线。气相层析分析需用气相层析仪（gas-chromatograph）进行。气相层析仪的基本组件。 气相层析法具有微量快速的优点。它在分析生物成分方面的一个限制是要求能气化和热稳定性高。氨基酸由于含有各种极性基团，气化十分困难，必须把它转变成溶液挥发的化合物才能进行气相层析。氨基酸与苯异硫氰酸酯反应生成PTH-氨基酸（见本章氨基酸的化学反应部分），然后经三甲基硅烷基化（trimethylsilylation），便可得到能很好气化的氨基酸衍生物。(七)高效液相层析高效液相层析（high performance liquid chromatography，简称HPLC）曾称高压液相层析（high pressure liquid chromatography）。这是近二十多年内发展起来的一项快速。灵敏、高效的分离技术。HPLC的特点是：①使用的固相支持剂颗粒很细，因此比表面积很大；②溶剂系统采取高压，因此洗脱速度增大。多种类型的柱层析都可用HPLC来代替，例如分配层析、离子交换层析、吸附层析以及凝胶过滤（见第7章）。 本文由(www.wenku1.com)首发，转载请保留网址和出处！
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