masson染色里面为什么要用冰醋酸处理_百度知道
masson染色里面为什么要用冰醋酸处理
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苏木素染5～10分钟　　3. 盐酸酒精分化　　4. 丽春红酸性品红液中染5～8分钟　　6： 苯胺蓝 2 g 蒸馏水 98 ml 醋酸 2 ml　　亮绿液，蒸馏水洗（苏木素可不染）　　5、　　丽春红酸性品红液： 丽春红 0.2g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 0.2 ml　　染色步骤：　　1. 切片脱蜡至蒸馏水　　2　　Masson 三色染色。　　Masson 三色染色法. 蒸馏水洗　　7. 1% 磷钼酸中染1～3分钟　　8. 不用水洗直接入苯胺蓝液或亮绿液5分钟 （如染色效果不佳.7 g 酸性品红 0.3 g　　蒸馏水 99ml 冰醋酸 1 ml　　苯胺蓝液： 亮绿 0. 水速洗，置60℃温箱中烘干，二甲苯透明，封固　　结果. 流水蓝化，可在冰醋酸内脱色后重染）　　9
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Masson染色问题
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这个帖子发布于2年零38天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人做神经损伤后观察肌肉的萎缩程度的实验，用Masson染色法染腓肠肌，正常的腓肠肌为红色，很清楚明亮，但是损伤神经后的腓肠肌的肌纤维总是会被苯胺蓝染成紫色，请教这属于正常情况吗还是染色液有问题或者怎样，急急急
最后一个是正常的，苯胺蓝染色大概在1分钟左右，都不敢染太久了
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染液可能有问题，重新染色试试。这个结果没法看。
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染液是自己配的，用苯胺蓝和冰醋酸，蒸馏水，换过一两次没有用，还是这样，之前自己配置的亮绿染液（变色酸2R-亮绿髓鞘染色）也是染的乱七八糟，后来买的现成的，好多了，正好有打算试试看有没有现成的买了试试，同时也非常感谢2楼的回答，到时候试试看能不能行再过来讨论一下哈
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有没有谁买过现成的2%苯胺蓝溶液的，有什么推荐或者建议吗
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关于丁香园Re:【求助】小鼠肾脏masson染色问题 - 形态学讨论版 -丁香园论坛
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Re:【求助】小鼠肾脏masson染色问题 - 形态学讨论版 -丁香园论坛
Masson 三色染色法1、试剂配制：丽春红酸性品红液： 丽春红 0.7 g 酸性品红 0.3 g蒸馏水 99ml 冰醋酸 1 ml 苯胺蓝液: 苯胺蓝 2 g 蒸馏水 98 ml 醋酸 2 ml 亮绿液： 亮绿 0.2g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 0.2 ml苦味酸酒精液:苦味酸在95%酒精中的饱和液 20 ml,加95%酒精10 ml2、染色步骤：（1）切片脱蜡至蒸馏水（2）苏木素染5～10分钟 （3）盐酸酒精分化（4）流水蓝化，蒸馏水洗(苏木素可不染)（5）丽春红酸性品红液中染5～8分钟（6）蒸馏水洗（7）1% 磷钼酸中染1～3分钟（8）不用水洗直接入苯胺蓝液或亮绿液5分钟 (如染色效果不佳,可在冰醋酸内脱色后重染)（9）水速洗，置60℃温箱中烘干，二甲苯透明,封固3、结果:胶原纤维蓝色（苯胺蓝复染）或绿色（亮绿复染）,肌纤维、纤维素红色。4、注意： （1） 此法广泛用于胶原纤维和平滑肌的鉴别，也为肾组织活检，观察肾小球病变的重要染色法，常用于观察缺血病变的心肌。 用于观察肾小球病变时，一定要用2um以下半薄切片。（2） 细胞核染色后分化很重要，观察控制着色程度。而HE染色则是最常用的一种常规染色方法，但无法区别胶原纤维和肌肉。
TA的最新馆藏[转]&
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来源:北京索莱宝科技有限公司
浏览人数: 5515
北京索莱宝科技有限公司 张净花 010- & &fax：010-
Masson 三色染色试剂盒的说明
& & Masson 三色染色是结缔组织染色知更鸟最经典的一种方法，是显示组织中纤维的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量容易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构稀松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或***胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson 三色染色试剂盒的特点
◆染色稳定；
◆分化时间短，1-2分钟；
◆色彩清楚鲜艳；
◆使用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；
◆所染切片保存时间长且不易褪色。
Masson 三色染色试剂盒的组成成分：
试剂（A-1） 苏木素染色液 25ml
试剂（A-2） 三氯化铁水溶液 25ml
试剂（B） 盐酸乙醇分化液 50ml
试剂（C） 氨水水溶液 50ml
试剂（D） 丽春红酸性品红染色液 50ml
试剂（E） 乙酸水溶液 50ml
试剂（F） ***钼酸水溶液 50ml
试剂（G） ***胺蓝染色液 50ml
注：临用时取A1、A2等量混合，成为试剂A，不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合。形成不容性沉淀，等量混合后，一般24小时后失去人力。
主要成分：
试剂（A）:主要由苏木素和三氯化铁组成。
试剂（B）:主要由乙醇和盐酸水溶液组成。
试剂（C）:主要由稀氨水水溶液组成。
试剂（D）:主要由丽春红和酸性品红组成。
试剂（E）:主要由乙酸水溶液组成。
试剂（F）:主要由***钼酸水溶液组成。
试剂（G）:主要由***胺蓝和弱酸组成。
操作步骤：
固定液应选用甲醛盐溶液、中性福尔马林试剂（10%，NBF）进行固定。
1、 切片脱蜡至水。
2、 试剂（A）染色5min-10min。
3、 试剂（B）分化、水洗。
4、 试剂（C）返蓝、水洗。
5、 蒸馏水或者去离子水洗1min。
6、 试剂（D）染色5-10min。
7、 试剂（E）洗1min。
8、 试剂（F）洗1-2min
9、 试剂（E）洗1min。
10、直接放入试剂（G）中染色1-2min。
11、试剂（E）洗1min。
12、95%乙醇快速脱水。
13、无水乙醇（1）5-10秒。
14、无水乙醇（2）5-10秒。
15、无水乙醇（3）5-10秒。
16、二甲***（1）1-2分。
17、二甲***（2）1-2分。
18、二甲***（3）1-2分。
19、中性树胶封固。
染色结果：细胞核呈蓝色、胞浆、肌肉、红细胞呈红色，胶原纤维/蛋白呈蓝色。
注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净。
2、 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液或缩短染色时间
3、 经典masson三色染色中，常要求使用试剂A染核，也可用Harris 苏木精染核，但Harris 苏木精染核后切片颜色不够鲜艳，因为色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维，一般也可以省略该染色步骤。
4、 试剂B的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
5、 试剂E为0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清楚鲜艳、如果使用量大可自行配制。
6、 用试剂F分化要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色。纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定。一般1-2min。
7、 返蓝液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot 促蓝液或0.1-1%碳酸锂水溶液。
8、 戴一次性手套操作。
9、 使用场所应通风，并远离火源。
储存条件：
2-25℃ 避光
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Masson染色
Masson染色
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Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一。
Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液： 丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液： 冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤
1． 石蜡切片脱蜡至水。
2． 铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
3． 依次自来水和蒸馏水洗。
4． 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。
5． 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。
6． 蒸馏水洗。
7． 用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。
8． 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9． 1%磷钼酸水溶液分化3-5min。
10. 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。
11．以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12．95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色（如光绿液染色为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。
体会与说明：
1．控制好染色步骤。
2．组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3．0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。
4．磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。
(责任编辑：大汉昆仑王)
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