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2015年 优化卷（六）(第8题)
有关赫尔希和蔡斯证明遗传物质是 的实验中，导致离心后的上清液或沉淀物中出现放射性的叙述错误的是（&&&&）
A.用 标记的亲代噬菌体，上清液具有放射性是由于部分噬菌体未侵入细菌或子代噬菌体已释放出来
B.用 标记的亲代噬菌体，沉淀物具有放射性是由于 分子的相对分子质量大
C.用 标记的亲代噬菌体，上清液具有放射性是由于噬菌体的外壳不能进入细菌
D.用 标记的亲代噬菌体，沉淀物具有放射性是由于部分噬菌体外壳吸附在细菌表面
【正确答案】
【命题立意】
本题考查人类对遗传物质的探索过程，意在考查考生的实验与探究能力。
【解题思路】已知 标记的是亲代噬菌体的 ， 标记的是亲代噬菌体的蛋白质外壳。用 标记的亲代噬菌体进行实验，上清液具有放射性是由于部分亲代噬菌体还没有入侵细菌或者是部分子代噬菌体已经释放出来，A正确；沉淀物具有放射性则是由于亲代 分子已经注入细菌细胞中，而非DNA的相对分子质量大，B错误；用 标记的亲代噬菌体进行实验，上清液具有放射性是由于蛋白质外壳并不能进入细菌中，而沉淀物具有放射性是搅拌不彻底导致部分噬菌体外壳仍吸附在细菌表面，C和D均正确。(
17:27:30 )
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利用光合细菌处理浓缩池上清液
发布时间： 11:40:28&&中国污水处理工程网
摘要：随着城市人口数量的增加、生产规模的扩大，各种污水水量也在不断增加。对于污水处理行业来说，解决这些问题的方法是在扩建污水厂的同时最大限度地挖掘现有的污水处理能力的潜力，最大限度地节约能源。 关键词：光合细菌　浓缩池　上清液
随着城市人口数量的增加、生产规模的扩大，各种污水水量也在不断增加。如何解决好这些新产生的问题，是保护好自然环境，实现可持续发展的重要部分。对于污水处理行业来说，解决这些问题的方法是在扩建污水厂的同时最大限度地挖掘现有的污水处理能力的潜力，最大限度地节约能源。
1. 传统污水厂污泥处理过程
各处理单元产生的泥量，通常占处理水量的0.3% ~0.5%，它们被排入浓缩池，经浓缩处理后进入消化池，产生的上清液、消化液重新混入进水，进行生物处理。
由此公式可以看出污泥中的水所占的体积是很大的。
2. 此处理方法的优缺点分析
这样的工艺节省了污水厂的建设费用，简化了工艺，但这样也会对工艺运行造成影响。首先，在浓缩池上清液，消化池消化液中含有大量有机污染物，加重了后面处理单元的负担，要降解这些有机污染物不得不调整工艺参数。其次，由于这些高浓度有机物的掺入干扰了化验监测，如果在远离上清液排出口的地点取样会出现一沉池的BOD负去除率的现象，使工艺控制困难。
3. 光合细菌的特性
光合细菌是一大类能进行光合作用 的原核生物，能在厌氧、光照条件下进行不产氧的光合作用。光合细菌是紫外线耐性菌，能忍受1mg/L的余氯，能在PH6.0~9.0的范围中生长，适应温度25~35 ℃，但温度降到10& ℃左右其处理效果仍无大幅度降低。近些年来由于光合细菌在高浓度有机废水的处理及菌体的综合利用方面显示出很大的应用价值。PSB菌体形态极其多样，PSB菌体能通过光合作用、脱氮或发酵及好氧呼吸等多种形式获得能量。
它们既不像好氧的活性污泥微生物那样受到污水中溶解氧浓度的限制，又不象严格厌氧的甲烷细菌等对氧的存在非常敏感，即使生境中氧量增加，其降解有机物的活性也不受限制。光合细菌的适应性极强，在小河淤泥、水沟、稻田、垃圾堆、污水处理厂污水中都有光合细菌生长。
4. 实际观察
采用酵母膏、NHCl、MgCl、KHPO、NaCl、NaHCO作为营养物质在30 ℃PH7的情况下光照培养。
取上清液，测得起始BOD值一般在mg/L之间，加入菌体，混合均匀，PH值调节至7.3，将此溶液装入灭菌的三角瓶中。另取灭菌的三角瓶加入上清液，不加菌体，作为参照。将两瓶光照培养（瓶内不残留气泡）。
在开始时，两瓶均呈黑色，一段时间后在沉淀作用下，上层液体成灰黑色，随着时间增长加入菌体的试样溶液呈浅黄绿色，逐渐呈绿色，有悬浮絮状物产生。而另一瓶没有菌种的则没有绿色，一直呈灰黑色。6天后，测得加入菌体的上清液BOD值为300mg/L左右。
5. 光合细菌的合理性分析
活性污泥法产生的污泥厌氧消化开始阶段，在细胞外酶的作a用下，水解为小分子溶解性有机物，然后渗入细胞体内，分解产生挥发性有机酸、醇类、醛类。光合细菌在厌氧、光照下以低级脂肪酸、多种二羧酸、醇类、糖类、芳香族化合物等低分子有机物作为光合作用的电子供体，进行光合异样，其反应为：
由上实验表明，利用光合细菌对排入我厂进水的浓缩池上清液进行处理可以大幅度降低有机物含量，这种方法简单易行，节约能源，效果显著，减轻了后续处理单元的负担，采用这种方法为我厂节约能源，提高处理能力提供了技术支持。来源：谷腾水网Pandey, S. S., Singh, P., Samal, B., Verma, R. K. and Chatterjee, S.
(2017). Xanthoferrin Siderophore Estimation from the Cell-free Culture Supernatants of Different Xanthomonas Strains by HPLC. Bio-protocol 7(14): e2410. DOI: .
参见作者原研究论文
本实验方案简略版
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Xanthomonads can scavenge iron from the extracellular environment by secreting the siderophores, which are synthesized by the proteins encoded by xss (Xanthomonas siderophore synthesis) gene cluster. The siderophore production varies among xanthomonads in response to a limited supply of iron where Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) produces less siderophores than Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) and Xanthomonas oryzae pv. oryzicola (Xoc). Siderophore production can be measured by HPLC and with the CAS ()-agar plate assay, however HPLC is a more accurate method over CAS-agar plate assay for siderophore quantification in Xanthomonads. Here we describe how to quantify siderophores from xanthomonads using HPLC.
Keywords: Xanthomonas siderophores(黄单胞菌属铁载体), Xanthoferrin(黄单胞菌铁蛋白), Bacterial siderophore estimation(细菌铁载体估测), HPLC(HPLC), Amberlite XAD-16 resin columns(Amberlite XAD-16树脂柱)
BackgroundThe Xanthomonas group of bacterial phytopathogens possess an xss (Xanthomonas siderophore synthesis) operon, which is required to produce xanthoferrin (an α-hydroxy carboxylate- similar to vibrioferrin) and to encode an outer membrane receptor involved in the siderophore-mediated iron uptake (Pandey and Sonti, 2010; Pandey et al., 2016a and 2016b). Siderophores are small iron-chelating compounds secreted by bacteria to utilize the insoluble form of iron (Neilands, 1995). For the past three decades, CAS ()-agar plate assay has been mostly employed to measure bacterial siderophores by monitoring the halo formation around bacterial colonies (Schwyn and Neilands, 1987; Pandey and Sonti, 2010). However, the above assay cannot reliably be used to quantify siderophores from bacteria which also secrete organic acids (e.g., oxalic acid, citric acid, and isocitric acids) along with siderophores, as the organic acids are capable of chelating iron from CAS dye to compromise the accuracy to quantify siderophore (Rai et al., 2015). Since the above mentioned assay only gives the idea about the bacterial siderophore production qualitatively, hence HPLC-mediated siderophore quantification is a better method than the CAS-agar plate assay for bacteria that produce both siderophores alon such as Xanthomonas species (Rai et al., 2015; Pandey et al., 2016a and 2016b).
黄单胞菌属可以通过分泌铁载体来从细胞外环境中清除铁，这些铁载体由由xss 编码的蛋白质（anthomonas
基因簇。 由于Xanthomonas campestris
pv的铁供应有限，铁载体生产因黄托曼德而异。 野蓟菊（Xcc）产生比黄单胞菌（Xanthomonas oryzae）pv更少的铁载体。 米曲霉（Xoo）和黄单胞菌Xanthomonas oryzae
pv。 oryzicola（Xoc）。 铁载体生产可以通过HPLC和CAS测量（）标准板测定，然而HPLC是在Xanthomonads中用于铁氰菊酯定量的CAS-琼脂平板测定的更准确的方法。 在这里我们描述如何使用高效液相色谱来量化黄单胞菌中的铁载体。【背景】细菌植物病原体 Xanthomonas 具有（α-羟基羧酸盐型铁载体;类似于弧菌铁蛋白）和编码参与铁载体介导的铁吸收的外膜受体（Pandey和Sonti）所需的操纵子，2010; Pandey等人，2016a和2016b）。铁载体是由细菌分泌以利用不溶性铁的小铁螯合物（Neilands，1995）。在过去三十年中，CAS（（） - 琼脂平板测定法主要用于通过监测细菌菌落周围的晕圈形成来测量细菌铁载体（Schwyn和Neilands，1987; Pandey和Sonti，2010），然而，上述测定不能可靠地用于量化铁载体的铁载体同时也分泌有机酸（例如草酸，柠檬酸和异柠檬酸）的细菌以及铁载体，因为有机酸能够螯合CAS染料中的铁，以损害量铁素体的准确性（Rai等人，2015）由于上述测定法仅定性地提出了关于细菌铁载体生产的想法，因此HPLC介导的铁载体定量是比CAS-琼脂平板测定更好的方法同时产生有机酸的铁载体的细菌，如黄单胞菌素（Xanthomon）作为物种（Rai等人，2015年; Pandey等，，2016a和2016b）。
关键字：黄单胞菌属铁载体, 黄单胞菌铁蛋白, 细菌铁载体估测, HPLC, Amberlite XAD-16树脂柱
材料和试剂
移液头（Corning，Axygen (R)，目录号：TF-300-R-S，TF-200-R-S和TF-1000-R-S）
文化管（Borosil，目录号：9800U06）
培养皿（Tarson Products，目录号：MM）
Stericup (R)孔径为0.22μm的过滤单元（EMD Millipore，目录号：SCGPU02RE）
离心管：500ml，50ml，15ml，2ml和1.5ml（Tarson Products，Kolkata，India）
软木蛀虫8±0.2毫米（HiMedia实验室，目录号：LA737）
注射器驱动的具有0.22μm孔隙率的过滤器单元（Millex
-GS）（EMD Millipore，目录号：SLGS033SS）
黄单胞菌（Xanthomonas campestris） pv。 campestris 8004，X。 oryzae
pv。 oryzicola BXOR1，X。 oryzae
pv。 ae ae ae ynthesis基因A（实验室收集）
2,2'-联吡啶（DP）（Sigma-Aldrich，目录号：14453）
注意：本产品已停产。
Amberlite XAD16N，20-60目（Sigma-Aldrich，目录号：XAD16-1KG）
甲醇（Thermo Fisher Scientific，目录号：Q32407）
标准弧菌素（Fujita等人，2011;见注2和3）
三氟乙酸（TFA）（Sigma-Aldrich，目录号：T6508-25ML）
乙腈（CH 3 CN）（Sigma-Aldrich，目录号：34888-1L）
注意：本产品已停产。
蛋白胨（HiMedia Laboratories，目录号：CR001）
蔗糖（HiMedia Laboratories，目录号：GRM601-500G）
氢氧化钠（NaOH）（Sigma-Aldrich，目录号：221465）
Chrome Azural S（CAS）（默克，目录号：1.）
氯化铁（FeCl 3）（标准试剂，目录号：SRCF005C）
盐酸（HCl）（Fisher Scientific，目录号：29507）
十六烷基三甲基溴化铵（HDTMA）（Sigma-Aldrich，目录号：HG）
TM琼脂（BD，Bacto
TM，目录号：214010）
TM 蛋白胨（BD，Bacto
TM，目录号：211677）
琼脂（HiMedia Laboratories，目录号：RM026-500G）
蛋白胨 - 蔗糖（PS）培养基（Tsuchia等人，1982;见食谱）
CAS解决方案（Schwyn and Neilands，1987; see Recipes）
胨 - 蔗糖 - 琼脂（PSA）培养基（见食谱）
PSA-CAS-DP板（参见食谱）
锥形瓶：500ml（Vensil Glass Works，目录号：1161）
锥形瓶：2,000毫升（Borosil，目录号：4980030）
微量移液器（Eppendorf，目录号：EPPR4396）
振荡孵化器（Eppendorf，New Brunswick
TM ，型号：Innova (R) 43）
SORVALL RC-5B PLUS超速离心机（Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA，USA）
pH计（Thermo Fisher Scientific，Thermo Scientific
TM ，目录号：EC-PH510 / 11S）
Agilent 1100系列HPLC系统（Agilent Technologies，型号：Agilent 1100系列）
Agilent C-18（4.6 mm x 250 mm x 5μm）色谱柱（Agilent Technologies，Santa Clara，CA，USA）
滴定管（BOROSIL，目录号：2123016），滴定管支架和夹具
真空浓缩机加（Eppendorf，型号：Concentrator Plus，目录号：）
Millipore真空，压力泵（EMD Millipore，目录号：XI04 220 50）
高压灭菌器
化学工作站软件; Rev. A.10.02 [1757]（Agilent，Santa Clara，CA，USA）
Microsoft Office Excel 2013（Microsoft Corporation，Redmond，USA）
无细胞培养上清液的制备
在含有利福平（50μg/ ml）的PSA板上，从其甘油储备液中分离细菌菌株，并在28℃的静态培养箱中孵育2-3天。为了开始初级培养，将单个菌落从上述板转移到含有3ml新鲜PS培养基（参见食谱）的高压灭菌培养管中，其中利福平（50μg/ ml）。黄单胞菌属的主要培养物可以在振荡培养箱中在28℃和200rpm下生长至晚指数生长（OD 600?1.0），持续16-20小时。
通过使用从上述原代培养物中的0.2％接种物（2ml）开始二次培养，加入补充有适量2,2' - 联吡啶（150μM，
pv. campestris str。μM用于米曲霉米曲霉，50μM用于米曲霉oryzicola）。在28℃的培养箱中以200rpm的振荡孵育第二培养物48小时。
在4℃下以17,000×g离心细菌培养物1小时以沉淀细胞和外多糖。
为了从上清液中除去剩余的细胞，用Stericups（孔径0.22μm）和真空压力泵过滤上清液。
用浓HCl（6N）将pH调节至2.0，以降低铁载体在水中的溶解度（Rey等，1996）。
使用XAD-16树脂柱的色谱柱
通过装入220g Amberlite XAD-16聚合物树脂制备2.4×30cm柱。
注意：在需要色谱柱前一天，将水浸泡过夜，以准备Amberlite树脂。
用两倍的床体积（440ml）的甲醇洗涤填充柱，并平衡柱体积为三倍体积（660ml）的无菌MilliQ水。
将无细胞细菌上清液（方法A;步骤A5）通过平衡的XAD-16树脂柱（见注7）。
用200ml甲醇洗脱，并在2.0ml离心管中收集约100个级分（约2ml）（见附注7;图1）。
图1. Xad-16树脂柱（在滴定管中制备），带有滴定管支持设备，用于收集黄腐败铁载体的洗脱液的不同部分
CAS平板测定
准备PSA-CAS-DP板（参见食谱）。
用无菌软木钻孔器在板上打几个孔，保持孔间距离约2.5厘米。
将大约250μl的每个级分（根据洗脱顺序，程序B;步骤B4）放入分开的孔中，将盖直立放置在顶部，并在28℃下在静态培养箱中孵育。
24小时后观察分数的活度。
特征的黄色晕圈（光环13-24）表示铁载体的存在，而蓝色和红色的晕圈（光环1-12）表示有机酸的存在（图2）。
图2.具有多个孔的PSA-CAS-DP板，其表现出与洗脱液的不同部分（由XAD-16树脂柱分离）孵育24小时后形成的不同着色晕圈，用于从X离子铁载体分离。 oryzae
pv。蓝色和红色晕圈（光环1-12）表示含有机酸的级分，而黄色光环（卤素13-24）表示含有黄铁腐体铁载体的级分。
我们还没有将第二十四分之二的铁载体洗脱液用于HPLC运行。因为我们已经观察到，与在其它杂质的存在相比，存在于这些级分中的铁载体可以忽略不计，在HPLC运行期间产生更多的噪声。添加这些用于HPLC的片段与活性片段一起（第13-20）将使杂质水平增加到更大的程度，而不显着增加样品中铁载体的总量。注意，学生的t检验（配对）用于分析针对HPLC运行的主要活性成分（第13至20号）中这些级分对杂质水平和铁载体量的贡献程度。
为了最小化由于对应于光晕21-24的部分中存在的其他不需要的成分引起的干扰程度（在加热和试验方法之后），只有对应于光晕13-20的铁载体的活性部分应当从各自剩余的主要库存（每个约1.75毫升）中进行HPLC定量。
HPLC定量＆
从程序B中汇集所有活性级分（对应于光晕13-20）;步骤B4进入在PSA-CAS-DP板上显示特征性黄色晕圈的15ml离心管（方法C;步骤C5）。
为了除去溶剂，使用真空浓缩器（在酒精模式30℃下）将样品完全干燥。
用1ml甲醇重建，用孔径0.22μm的注射器驱动的过滤器过滤
注射每个菌株的推荐体积的过滤样品（25μl，用于刺激野生乳杆菌），10μl用于X，oryzae
pv。oryzicola和X 。oryzae
pv。oryzae）进入Agilent 1100系列HPLC系统（图3A-3B）。
使用梯度：使用Agilent C-18柱（4.6mm×250mm×5μm）进行分离：A = H 2 O / 0.1％TFA，B = CH 3 CN / 0.1％TFA; 10分钟内为0-30％B，15分钟为30-45％B，20分钟为45-0％B，流速为1 ml / min。
制作标准曲线，绘制趋势线，并从已知量的弧菌素（Fujita等人，2011）或黄高铁蛋白与通过HPLC色谱图获得的各自的峰面积获得等式（使用Microsoft Excel）（参见注1，2和3）。
从标准的弧菌铁蛋白或黄高铁蛋白得到的公式计算黄铁烷铁载体（存在于未知样品中）的量。
图3. HPLC程序和仪器。 A.化学工作站软件中的HPLC程序; Rev. A.10.02 [1757]。 B.一部分HPLC机器，指示样品取向和自动注射针。＆
将样品（程序D;步骤D5）和空白（XAD-16树脂柱的空缓冲液洗脱液）的HPLC HPLC信号加载到ChemStation软件的离线模式。从样品信号中减去空白信号，然后自动积分，自动识别峰。记录对话框中生成的RT（保留时间）值和峰值区域。可以观察到纯黄素铁蛋白信号，同时监测来自黄单胞菌属（Xenonmonmonasas）的SSX突变体的分离的铁载体的HPLC色谱图中的缺失峰。与其各自的野生型相比。从黄烷铁蛋白的活性级分中，可以分离纯化的级分，真空干燥，称重并用作“标准黄高铁蛋白”，通过采用HPLC运行的不同已知量绘制标准曲线。通过绘制各个HPLC运行后获得的“相对于平均峰面积”绘制黄铁蛋白的标准曲线（图4）。使用标准曲线确定未知样品黄高铁蛋白铁载体的量。验证差异中的显着性水平，如果两个不同组所获得的数据之间存在任何差异，则使用配对的Student's 测试。
注意：对于一组实验，至少需要三次独立的生物重复。
图4. Xanthoferrin标准曲线;显示用于描绘HPLC运行中使用的铁载体量用于获得各个峰值区域的方程
可以使用ΔxSA突变体作为阴性对照。在ΔxssA突变株中，黄曲霉素峰将不存在或显着降低。对应于从ΔxssA突变体（Pandey等人，2016a）分离的铁载体的HPLC色谱图的缺失峰，可以从野生型菌株中收集纯黄高铁蛋白并用作标准。
虽然可以通过称重干黄素铁蛋白直接测定铁载体的质量，但优选为大量样品（> 5）创建标准曲线。
由于我们在300nm（保留时间?11分钟）时检测到铁（III） - 亚铁铁氰酸盐络合物，所以预期分离的黄铁锈铁铁载体主要作为铁铁载体配合物存在。因此，优选使用铁铁载体络合物（1:1比例）制备标准曲线。
细菌接种和CAS平板测定应在无菌条件下进行
由于长期储存和频繁的冻融循环可能导致黄铁烷铁载体的降解，因此可以在4℃下储存最多1周。
2,2'-联吡啶的浓度可能稍微变化（高达±25μM），这取决于介质组分中作为杂质的铁的可用性。
柱制备和色谱法应在室温下进行。色谱步骤（洗涤，平衡和洗脱）应通过重力流程进行。
胨 - 蔗糖（PS）培养基
1％蛋白胨（w / v）
1％蔗糖（w / v）
在MilliQ水中溶解上述试剂
用3N氢氧化钠将pH调节至7.4，在121℃和15psi下高压灭菌20分钟
CAS解决方案
0.06克铬Azurol S染料在50ml MilliQ水中
Fe（III）溶液：10 ml
1mM FeCl 3
0.072g HDTMA在40ml MilliQ水中
将所有三种溶液分别混合，然后混合在一起，在121℃和15psi下高压灭菌20分钟以消毒
胨 - 蔗糖 - 琼脂（PSA）培养基
TM 蛋白胨（w / v）
1％蔗糖（w / v）
在MilliQ水中溶解上述试剂，用3N氢氧化钠将pH调节至7.4，加入1.4％Bacto TM琼脂（w /最终），并在121℃和15psi下高压灭菌20分钟
PSA-CAS-DP板（140mm板）
60 ml熔融PSA
2,2'-联吡啶基（75μM，野草莓，野菜），50μM用于米曲霉或米曲霉和米曲霉X，oryzae
pv。oryzicola）
7.2 ml CAS溶液
我们承认Masaki J. Fujita博士（日本北海道大学）为本研究提供纯的弧菌素。我们从实验室（Rai，2015年）向以前的研究提出了确认，从那里我们修改了Xcc的铁载体估计协议。这项工作得到了DBT印度，CSIR-HRDG-印度，DST-SERB-印度和CDFD核心资金的SC的资助。 SSP是来自CSIR印度的JRF和SRF的接收者。 PS和BS是UGC-India的JRF和SRF的接受者。 RKV是DBT-India的JRF和SRF的接收者。
Fujita，MJ，Kimura，N.，Sakai，A.，Ichikawa，Y.，Hanyu，T。和Otsuka，M。（2011）。＆ a class =“ke-insertfile”href =“http：// www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/“target =”_ blank“>来自海洋宏基因组文库的弧菌铁蛋白生物合成基因簇的克隆和异源表达 Biosci Biotechnol Biochem
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Pandey，SS，Patnana，PK，Rai，R。和Chatterjee，S.（2016b）。<a class =“ke-insertfile”href =“https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed Xanthoferrin，Xanthomonas campestris的α-羟基羧酸盐型铁载体。野菜花是需要用于白菜中最佳的毒力和生长的。 Mol Plant Pathol 。
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引用：Pandey, S. S., Singh, P., Samal, B., Verma, R. K. and Chatterjee, S.
(2017). Xanthoferrin Siderophore Estimation from the Cell-free Culture Supernatants of Different Xanthomonas Strains by HPLC. Bio-protocol 7(14): e2410. DOI: .
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基础实验方案
试剂与设备本题难度：0.65&&题型：选择题
（2016o海南校级模拟）在“噬菌体侵染细菌的实验”中，噬菌体与细菌保温时间长短与放射性高低的关系图可能如图，下列关联中最合理的是（35S标记的噬菌体记为甲组，32P标记的噬菌体记为乙组）（　　）
A、甲组-上清液-bB、乙组-沉淀物-dC、甲组-沉淀物-cD、乙组-上清液-a
来源：2016o海南校级模拟 | 【考点】噬菌体侵染细菌实验．
（2016o安徽三模）下列有关教材实验中涉及“分离”的叙述正确的是（　　）
A、在观察细胞有丝分裂的实验中，解离的目的是使细胞核中的染色体彼此分离B、在观察DNA和RNA在细胞中的分布的实验中，盐酸能够使染色质中的蛋白质与DNA分离C、在观察植物细胞质壁分离的实验中，滴加蔗糖溶液的目的是使细胞质与细胞壁分离D、在噬菌体侵染细菌的实验中，离心的目的是使吸附在细菌表面的噬菌体外壳与细菌分离
（2016春o海口校级期中）在噬菌体侵染细菌过程中，合成子代噬菌体DNA分子和蛋白质所需的原料（　　）
A、噬菌体的脱氧核苷酸和噬菌体的氨基酸B、噬菌体的脱氧核苷酸和细菌的氨基酸C、细菌的脱氧核苷酸和噬菌体的氨基酸D、细菌的脱氧核苷酸和细菌的氨基酸
（2016o湖南模拟）基础知识填空：（1）与抗体合成、加工、分泌直接相关的具膜细胞器有&&&&．（2）半透膜模拟的是成熟植物细胞中的&&&&．（3）细胞有氧呼吸生成C02的场所是&&&&．（4）在噬菌体侵染细菌的实验中，搅拌的目的是&&&&．（5）RNA复制病毒依靠&&&&&酶进行复制．（6）某生物种群中AA、Aa和aa的基因型频率分别为0.3、0.4和0.3．该种群中a基因的频率为&&&&．（7）若受体蛋白识别的信号分子是抗利尿激素，那么靶细胞是&&&&．（8）裸岩上群落初生演替至森林的过程有（用箭头和文字表示）裸岩→&&&&→森林．
在噬菌体侵染细菌的实验中，如果用32P和35S分别标记噬菌体的DNA和蛋白质外壳，结果复制出来的子代噬菌体（　　）
A、含32P和35SB、含31P和35SC、含31P、32P、32SD、含31P、32P、35S
（2014秋o岳阳校级月考）根据教材内容填空：（1）ATP是细胞的直接能源物质，根细胞形成它时所需能量来自&&&&（填生理过程）．（2）硝化细菌能将土壤中的氨气氧化为亚硝酸，进而将亚硝酸氧化成硝酸，利用这两个化学反应中释放出的化学能，将&&&&合成为糖类．（3）细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有&&&&．（4）人类的色盲、血友病的遗传表现与果蝇眼色的遗传非常相似，它们的基因位于性染色体上，所以遗传上总是&&&&，这种现象叫做伴性遗传．（5）基因的自由组合定律的实质是：在进行减数分裂形成配子的过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，&&&&自由组合．（6）萨顿提出基因在染色体上的研究方法是&&&&．（7）在噬菌体侵染细菌的实验中，用35S标记的一组感染实验的实验结果是：放射性元素主要分布在&&&&中．（8）在基因对性状的控制中，基因与基因、&&&&、基因与环境之间存在着复杂的相互作用．
解析与答案
（揭秘难题真相，上）
习题“（2016o海南校级模拟）在“噬菌体侵染细菌的实验”中，噬菌体与细菌保温时间长短与放射性高低的关系图可能如图，下列关联中最合理的是（35S标记的噬菌体记为甲组，32P标记的噬菌体记为乙组）（　　）甲组-上清液-b乙组-沉淀物-d甲组-沉淀物-c乙组-上清液-a”的学库宝（/）教师分析与解答如下所示：
【分析】1、T2噬菌体侵染细菌的实验步骤：分别用35S或32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌然后离心检测上清液和沉淀物中的放射性物质．2、上清液和沉淀物中都有放射性的原因分析：①用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌上清液中有少量放射性的原因：a．保温时间过短部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内经离心后分布于上清液中使上清液出现放射性．b．保温时间过长噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代经离心后分布于上清液中也会使上清液的放射性含量升高．②用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌沉淀物中也有少量放射性的原因：由于搅拌不充分有少量35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面随细菌离心到沉淀物中使沉淀物中出现少量的放射性．
【解答】解：（1）甲组用35S标记的噬菌体侵染细菌而35S标记的是噬菌体的蛋白质外壳噬菌体在侵染细菌时蛋白质外壳没有进入细菌内经过搅拌离心后蛋白质外壳分布在上清液中且放射性强度与保温时间长短没有关系对应于曲线c．（2）乙组用32P标记的噬菌体侵染细菌而32P标记的是噬菌体的DNA噬菌体在侵染细菌时只有DNA进入细菌内经过搅拌离心后DNA随着细菌分布在沉淀物质．保温时间过长噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代经离心后分布于上清液中这会使上清液的放射性含量升高沉淀物中放射性含量降低对应于曲线d．故选：B．
【考点】噬菌体侵染细菌实验．
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知识点讲解
经过分析，习题“（2016o海南校级模拟）在“噬菌体侵染细菌的实验”中，噬菌”主要考察你对
等考点的理解。
因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
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