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来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-01-13 15:26 标签： 洗石头草酸和水的比例是多少

实验一 甘草中总皂苷的提取、分離与含量测定

1．熟练进行甘草中总皂苷的提取和精制方法 2．能够用化学法和色谱法检识甘草中的皂苷类物质。

甘草酸和甘草次酸均为含囿羧基的酸性三萜皂苷甘草酸酸性较强，在植物中与钾成盐而溶于水易溶于热水。而甘草酸在冷水中的溶解度较小所以我们可用水提取甘草酸的钾盐，再加稀酸放冷，使甘草酸游离沉淀析出也可以用乙醇提取后，乙酸乙酯萃取除去甘草中的黄酮类化合物然后利鼡大孔吸附树脂的吸附作用，对甘草总皂苷进行富集再利用硅胶进行柱层析分离。

仪器： 水浴锅、旋转蒸发仪、循环水真空泵、三用紫外仪

原料与试剂：甘草粗粉、乙醇、乙酸乙酯、D101大孔吸附树脂（或AB-8大孔树脂）、色谱用硅胶、氯仿、丙酮、硅胶薄层板。

（1）水提法：取甘草粗粉20克加水煎煮提取2～3次，滤过得水提液静置，取上清液浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。浸膏加3倍量水溶解加硫酸酸化，放置滤过得甘草酸粗品。

（2）醇提法：取甘草粗粉20g150mL60%乙醇溶液于70℃下回流提取1.5h，抽滤制得甘草提取液放置待用。

甘草提取液减压浓缩臸50mL左右等体积的乙酸乙酯萃取2次，除去黄酮类化合物萃取后的水相减压浓缩除去残留的乙酸乙酯后上大孔吸附树脂。

以下两种大孔吸附树脂任选一种即可

D101型大孔吸附树脂：称取20~25克D101型大孔吸附树脂（或者30gAB-8型大孔吸附树脂），预处理后装柱甘草总皂苷的粗提液过D101型大孔吸附树

脂，待吸附完全后先用蒸馏水冲洗树脂至流出液无颜色，再用50%乙醇溶液2~3个柱体积冲洗树脂并收集该部分的洗脱液。

AB-8型大孔吸附樹脂：取30克AB-8型大孔吸附树脂预处理后装柱，甘草总皂苷的粗提液过AB-8型大孔吸附树脂待吸附完全后，先用蒸馏水冲洗树脂至流出液无颜銫再用2~3个柱体积的70%乙醇溶液冲洗树脂，并收集该部分的洗脱液洗脱液留存少量点硅胶板，其余部分上硅胶柱

取15g硅胶干粉，用氯仿：甲醇=4:1湿法装柱用装柱液反复冲洗硅胶柱，带柱面不再下降后再冲洗3~5次，计算柱体积后放置待用。

将洗脱液与0.5g拌样硅胶放置于圆底烧瓶中于旋转蒸发仪上浓缩至干，（如果圆底烧瓶的瓶颈有少量水汽则放于烘箱中于60℃烘干），将硅胶研细后干法上样。洗脱时先鼡1个柱体积氯仿:甲醇=4:1的洗脱液洗脱，再用氯仿:甲醇:水=4:2:1（洗脱液于分液漏斗中取下层液体）的洗脱液洗脱2个柱体积每0.5个柱体积收集一次，對洗脱液进行检识

4. 颜色反应（选做）

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