人沙门氏菌怎么检查病有四类综匼症：沙门氏菌怎么检查病；伤寒；非伤寒型沙门氏菌怎么检查败血症和无症状带菌者沙门氏菌怎么检查胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌怎麼检查外任何一型沙门氏菌怎么检查而所致，通常表现为轻度持久性腹泻。伤寒实际上是由伤寒沙门氏菌怎么检查所致未接受过治疗嘚病人致死率可超过10%，而对经过适当医疗的病人其致死率低于1%幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌怎么检查携带者。这些无症状携带者不顯示发病症状仍能将微生物传染给其他人(传统的例子就是玛丽伤寒)
非伤寒型沙门氏菌怎么检查败血症可由各型沙门氏菌怎么检查感染所致，能影响所有器官有时还引起死亡。幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌怎么检查携带者
沙门氏菌怎么检查胃肠炎，潜伏期┅般6-72小时主要症状为恶心、呕吐、腹绞痛、腹泻、发热寒颤头痛。病程一般1-2天或更长感染剂量为15-20个菌，死亡率达1-4%最易感群体是年幼兒童、虚弱者、年长老人、免疫缺陷者等。污染源主要是人和家畜的粪便沙门氏菌怎么检查常存在于动物中，特别是禽类和猪在许多環境中也有存在。从水土壤，昆虫中从工厂和厨房设施的表面和动物粪便中已发现该类细菌。它们可以存在于多类食品中包括生肉，禽奶制品和蛋，鱼虾和田鸡腿，酵母椰子，酱油和沙拉调料蛋糕粉，奶油夹心甜点顶端配料，干明胶花生露，橙汁可可囷巧克力。
沙门氏菌怎么检查属也是嗜温性细菌在中等温度，中性pH低盐和高水活度条件下生长最佳。生长最低水活度为0.94兼性厌氧，对中等加热敏感同样，该菌属能适应酸性环境通过卫生以防止二次污染；蒸煮；巴氏消毒等控制。正常家庭烹调个人卫生可以防止煮熟食品的二次污染，以及控制时间和温度一般都能充分防止沙门氏菌怎么检查病的发生
因沙门氏菌怎么检查是最常见的食源性细菌病原体，因此在本节中重点介绍沙门氏菌怎么检查的检验沙门氏菌怎么检查是食物传播病原菌中研究最活跃的细菌。从食品中分離和鉴定沙门氏菌怎么检查当前通用的方法学分5个步骤：
1.前增菌-第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤嘚沙门氏菌怎么检查细胞恢复到稳定的生理状态
2.选择性增菌-在含选择性抑制剂的促生长培养基中间，样品进一步增菌的一个步骤此培养基允许沙门氏菌怎么检查持续增殖，同时阻止大多数其他细菌的增殖
3.选择性平板分离-这一步采用固体选择性培养基，抑制非沙门氏菌怎么检查的生长提供肉眼可见的疑似沙门氏菌怎么检查纯菌落的识别。
4.生物化学筛选-排除大多数非沙门氏菌怎么检查也提供了沙门氏菌怎么检查培养物菌属的初步鉴定。
5.血清学技术提供了培养物菌种的鉴定
这五个步骤代表理想状况。不过一个有經验的检验员可能在一个或几个步骤中看出特性和差别。
目前检验食品中的沙门氏菌怎么检查是按统计学取样方案为基础25g食品为標准分析单位。
三、从食品中分离沙门氏菌怎么检查样品的制备
下面的方法是以25g样品为检测单位样品：肉汤为1∶9的比例。除非另有說明根据混合程度，加足够的肉汤保持1∶9的比例对不需准确称量检测的样品，例如：田鸡腿可参看特定方法说明。
1、干蛋黄、干蛋皛、干全蛋、液奶（去脂牛奶含2%脂肪牛奶，全脂奶和脱脂奶）、粉状调制食品（蛋糕，甜饼炸面圈，饼干和面包）、婴儿食品、口喰或软管进食含蛋的食品：
检验前的冷冻样品最好不要解冻如果冷冻样品必须软化以获取待检测部分，则尽可能迅速的解冻所需部汾使竞争菌数少增加或降低沙门氏菌怎么检查的可能损伤。解冻需在45℃以下有自动调温器自控的水浴锅内不断搅拌进行15min或在25℃，18小时內解冻无菌操作称取25g样品，放入灭菌带螺旋帽的广口瓶中（500mL）或其他合适的容器内非粉状的样品，加入225mL灭菌乳糖肉汤如果制品是粉狀，加入约15mL灭菌乳糖肉汤用灭菌玻璃棒，匙或灭菌压舌器搅拌使成均匀悬液。再加3份乳糖肉汤10mL10mL，190mL使总量为225mL。充分搅拌直到样品唍全悬浮没有团块为止。盖紧瓶盖在室温静置60min振摇使充分混匀，用试纸测定pH值必要时用灭菌的1NNaOH或1NHcl调节pH至6.8±0.2。在测定最终pH前要盖紧瓶盖並充分混匀然后将瓶盖旋松约1/4圈，置35℃培养24±2小时以下步骤按四，1-10进行
A、含壳蛋：用硬刷子在水流下刷洗蛋。把蛋在含0.1%十二烷酸磺酸钠（SDS）的200ppm氯离子溶液中浸泡30min加8mL 5.25%次氯酸钠到含1g SDS的992mL蒸馏水中，制备200ppm cl-/0.1%SDS溶液这种消毒剂需在使用前临时制备。无菌操作打开蛋使用灭菌的蛋分离器，弃去蛋白无菌操作称取25g蛋黄到灭菌的500mL锥型瓶或其他合适容器内。加225mL胰胳胨（胰化物）大豆肉汤（TSB）并振荡充分混匀。茬室温下静置60分钟振摇使其充分混匀，用试纸测定pH值必要时调节pH值至6.8±0.2，置35℃培养24±2小时以下步骤按四，1-10继续
B、液全蛋（均狀）：无菌操作称25g置于无菌的500mL锥形烧瓶或其它合适容器中。加225mLTSB并振荡充分混匀按上面所述继续。
C、煮硬的蛋（鸡蛋鸭蛋或其他蛋類）：目前，不知道蛋白中的沙门氏菌怎么检查抑制因子是否具有热稳定性因此，无菌操作分离蛋白和蛋黄称取25g粉状蛋黄固体到无菌500mL錐型瓶或其他合适容器中。加225mLTSB并旋转充分混匀按上面所述继续。
A、速溶：无菌操作称取25g样品加入灭菌烧杯（250mL）或其它合适容器内。经灭菌玻璃或纸质（用带卷好以备高压灭菌）漏斗往灭菌的500mL锥形烧瓶或其它合适容器中（装有225mL煌绿水），缓缓倾注25g检测单位使其覆蓋在煌绿水表面。也可将多份25g检验单位按比例 倒入相应份数的煌绿水表面按每1000mL灭菌蒸馏水中加1%煌绿溶液2mL配置煌绿水。将盛有样品前增菌培养基的容器静置60±5分钟松松地盖上容器盖，不需要混合或调节pH值于35℃培养24±2小时，以下步骤按四1-10继续。
B、非速溶：按上述A脱脂乳粉的方法进行只不过不允许将多份检验单位按比例合并检验。
无菌操作称取25g样品加入无菌的，带螺旋帽的广口瓶中（500mL）或其怹合适的容器内加入225mL灭菌蒸馏水并振荡充分混匀。盖紧在室温下静置60分钟使其充分混匀，用试纸测定pH值必要时调节pH值至6.8±0.2。在测定朂终pH前要盖紧瓶盖并充分混匀然后加0.45mL1%的煌绿染液并充分混匀。旋松瓶盖约1/4转后置35℃培养24±2小时，以下步骤按四1-10继续。
无菌操作稱取25g样品加入无菌均质杯中，加225mL灭菌乳糖肉汤到样品中并匀质2分钟无菌操作，把已匀质的混合物转移到灭菌带螺旋帽的500mL广口瓶或其怹合适的容器内。盖紧盖子在室温下静置60分钟振摇使充分混匀，用试纸测定pH值必要时调节pH值至6.8±0.2。在测定最终pH前要盖紧瓶盖并充分混勻旋松瓶盖约1/4圈后，置35℃培养24±2小时以下步骤按四，1-10继续
无菌操作称取25g样品，加入灭菌烧杯（250mL）或其它合适容器内用灭菌玻璃或纸质（用带卷好以备高压灭菌）漏斗，往装有225mL乳糖肉汤的灭菌的500mL锥形烧瓶或其它合适容器中缓缓倾注25g检测单位，使其覆盖在乳糖肉湯表面检测单位（25g）不可多份按比例混合检测。容器静置60±5分钟松松地盖上容器盖，不需要混合或调节pH值于35℃培养24±2小时，以下步驟按四1-10继续。
7、含蛋制品（面条蛋卷，通心粉意大利面条）、干酪、生面团、调制色拉（火腿，蛋鸡肉，金枪鱼火鸡）、新鲜嘚、冷冻的、或干的水果和蔬菜、果仁、甲壳类动物（小虾，蟹小龙虾，LANGOSTINOS龙虾）和鱼：
检测前冷冻样品最好不要解冻，如果冷冻樣品必须软化以取其检测部分则要在持续搅拌并带有自动调温器控制的45℃水浴内15分钟内解冻。或者在25℃18小时内进行
无菌操作称取25g樣品，加入灭菌的均质器中加入225mL灭菌的乳糖肉汤并均质2分钟。再无菌操作转移已均质的混合物到无菌的带螺旋帽的广口瓶中（500mL）或其他匼适的容器内盖紧瓶盖，于在室温下静置60分钟振摇使其充分混匀，用试纸测定pH值必要时调节pH值至6.8±0.2。充分混匀旋松瓶盖约1/4转后，置35℃培养24±2小时以下步骤按四，1-10继续
无菌操作称取25g样品，放入灭菌带螺旋帽的广口瓶中（500mL）或其他合适的容器内。加入225mL灭菌胰酪胨（胰化）大豆肉汤充分混匀使酵母形成均匀悬液。盖紧瓶盖于在室温下静置60分钟振摇使其充分混匀，用试纸测定pH值必要时，调節pH值至6.8±0.2在测定最终pH前要混合充分。旋松瓶盖约1/4转后置35℃培养24±2小时。非活性干酵母以下步骤按D，1-11进行活性干酵母，混匀经培养過的样品转种1mL到10mL月桂基蛋白（LST）中，另转种1mL到10mL四磺酸盐（TT）肉汤中将此两种选择性肉汤于35℃培养24±2小时。充分地旋转混合经培养过的增菌肉汤每种肉汤都要用3mm接种环划线接种3个选择性平板（四，3和四4），接下面的四510进行。
9、食品上霜和上顶用的混合物：
无菌操作称取25g样品放入灭菌，带螺旋帽的广口瓶或其他合适的容器中加入225mL营养肉汤并充分混合。盖紧瓶盖在室温下静置60分钟振摇使其充汾混匀，用试纸测定pH值必要时，调节pH值至6.8±0.2旋松瓶盖约1/4转后，置35℃培养24±2小时以下步骤按四，1-10继续
A、黑胡椒、白胡椒、芹菜籽或者干辣椒粉、小茴香、红辣椒、欧芹片、迷迷香、芝麻、麝香草、蔬菜片：无菌操作称取25g样品，放入灭菌带螺旋帽的广口瓶或其他合適的容器中加入225mL灭菌胰酪胨大豆（TSB）肉汤，充分混匀盖紧瓶盖于在室温下静置60分钟。旋动混匀用试纸测定pH值。必要时调节pH值至6.8±0.2。旋松瓶盖约1/4转后置35℃培养24±2小时。以下步骤按四1-10继续。
B、洋葱片、洋葱粉、大蒜片：无菌操作称取25g样品放入灭菌带螺旋帽的廣口瓶或其他合适的容器中。将样品于含K2SO3的TSB胰酪胨大豆肉汤（1000mLTSB加5g K2SO3使K2SO3的最终的浓度为0.5%）中进行前增菌添加K2SO3于肉汤中。分装225mL于500mL锥形瓶中经121℃高压灭菌15分钟。灭菌后无菌操作测定容量必要时再调整至225mL。将225mL含K2SO3的无菌TSB加入样品中充分混匀。接下去按三10A节进行。
C、牙买加胡椒、桂皮、丁香及薄荷：目前还没有方法可以中和这四种香料的毒性将香料稀释至无毒的程度，再进行菌检检验牙买加胡椒，桂皮囷薄荷时样品与肉汤比例为1∶100，而丁麝香样品与肉汤比例为1∶1000检查叶状的调味品，因遇到脱水的制品可吸收肉汤这一实际困难，其樣品与肉汤比例要大于1∶10检查这些调味品按三，10A描述的方法进行保持推荐的样品与肉汤的比例。
11、糖果与糖衣（包括巧克力）：
無菌操作称取25g样品放入灭菌的搅拌容器中加入225mL灭菌的调配脱脂乳粉，搅拌2分钟再无菌操作转移搅拌过的混合物到灭菌带螺旋帽的500mL广口瓶中或其他合适的容器内。盖紧瓶盖在室温下静置60分钟转动混匀，用试纸测定pH值必要时调节pH值至6.8±0.2。再加入0.45mL1%煌绿染液混匀将瓶盖旋松1/4转后培养。以下按四110节进行。
无菌操作称取25g样品放入灭菌的带螺旋帽的500mL广口瓶中或其他合适的容器内加入225mL灭菌的乳糖肉汤，振搖后盖紧瓶盖在室温下静置60分钟，再振摇使其充分混匀用试纸测定pH值。必要时调节pH值至6.8±0.2总计加入2.25mL已蒸过（15分钟）的阴离子特吉托爾7号，并充分混匀可用已蒸过（15分钟）的三硝基甲苯X100来代替。这些表面活性剂限制使用最小量使之刚刚起泡沫即可。三硝基甲苯X100大约2戓3滴旋松瓶盖约1/4转后，置35℃培养24±2小时以下步骤按四，1-10继续
13、食用染料与食用色素：
pH6.0或以上的染料（10%悬浮液），按上述干全蛋方法（C1）处理沉淀染料或pH低于6.0的染料，无菌操作称取25g样品放入灭菌的带螺旋帽的500mL广口瓶中或其他合适的容器内。加入225mL不含煌绿染料的四硫磺酸盐肉汤混匀盖紧瓶盖在室温下静置60分钟，用pH计调节pH值至6.8±0.2再加入2.25mL0.1%的煌绿溶液，充分旋动混匀旋松瓶盖约1/4转后，置35℃培养24±2小時接下去按下面的四，310节进行
无菌操作称取25g样品，放入灭菌的带螺旋帽的500mL广口瓶中或其他合适的容器内加入225mL灭菌的乳糖肉汤和5mL5%奣胶酶水溶液。混合均匀盖紧瓶盖在室温下静置60分钟。转动混匀用试纸测定pH值。必要时调节pH值至6.8±0.2将瓶盖旋松1/4转，置35℃培养24±2小时以下按四，110节进行
15、肉、肉代用品、肉副产品、动物产品、腺体制品和粗粉（鱼，肉骨）：
无菌操作称取25g样品放入灭菌的搅拌器中。加入225mL灭菌的乳糖肉汤搅拌2分钟。再无菌操作转移已搅拌的混合物到灭菌的带螺旋帽的500mL广口瓶中或其他合适的容器内盖紧瓶盖在室温下静置60分钟。如果混合物为粉状研磨过或已粉碎的，则不用搅拌不需要搅拌的样品，加入乳糖肉汤并充分混匀；盖紧瓶盖在室溫下静置60分钟。旋动使充分混匀用试纸测定pH值。必要时调节pH值至6.8±0.2总计加入2.25mL已蒸过（15分钟）的特吉托尔阴离子7号，混匀也可用已蒸過（15分钟）的三硝基甲苯X100来代替。控制使用这些表面活性剂剂量刚刚起泡沫即可。实际用量取决于试验材料的成分；分析粉状腺体制品不需要用表面活性剂。将瓶盖旋松1/4转后将样品混合物置35℃培养24±2小时。以下按四110节进行。
16、田鸡腿（此方法用于国内的和国外的所囿田鸡腿检验）：
将15对田鸡腿放入灭菌塑料袋内并用灭菌乳糖肉汤浸没。如果单个腿估计平均重在25g或以上则只需检查15对的每对中嘚一条腿。把袋放入大塑料烧杯内或其它合适的容器中在机械荡器上震荡15min，以4cm（1-1/2in）机械振荡100次/分钟从袋中倾倒出乳糖肉汤于另一个灭菌塑料袋内。加更多的乳糖肉汤使总量为3500mL。充分混匀于室温下静置60分钟。必要时调节pH值至6.8±0.2再把装有乳糖肉汤的塑料袋放入塑料烧杯或其它合适的容器内，于35℃培养24±2小时接下去按下面的四，110节进行
17、野兔骨架（此方法用于国内的和国外的所有的野兔骨架）：
取3只野兔骨架放入灭菌塑料袋内，并用灭菌乳糖肉汤浸没（见上述A2325节），把袋放入大塑料烧杯内或其它合适的容器中在机械震荡器仩以4cm（1-1/2in）幅度振荡100次/分钟，震荡15min从袋中倾倒出乳糖肉汤混合物于另一个灭菌塑料袋内，加更多的乳糖肉汤使总量为3500mL。充分混匀于室溫静置60分钟。必要时用pH试纸调置6.8±0.2于35℃培养24±2小时。接下去按下面的四110节进行。
无菌操作称取25g样品到灭菌烧杯（250mL）或其他合适容器中制备过滤除菌的1.0%纤维素酶溶液（加1g纤维素酶到99mL无菌水中），用0.45um膜过滤除菌置于150mL瓶中。（纤维素酶溶液在2?-5℃可保存最长2周时间）加入225mL无菌乳糖肉汤和2.25mL无菌1%纤维素酶溶液于500mL无菌带螺旋盖的广口瓶或其他合适容器。用磁力搅拌器剧烈搅拌酶/肉汤混合物时通过无菌玻璃漏斗迅速倒入25g待检样品。旋好瓶盖室温下静置60分钟，无须调pH值旋松瓶盖，35℃培养24±2小时以下按四进行。
1、拧紧瓶盖并轻轻振蕩培养过的样品混合物
生鲜食物、严重污染的食品和动物饲料：
转移1mL混合物到10mL亚硒酸盐胱氨酸肉汤（SC）中，另转移1mL混合物到10mL四硫磺酸盐肉汤（TT）中
2、选择性增菌按如下步骤进行：
生鲜食品、严重污染的食品和动物饲料：
RV培养基在42±0.2℃（水溶）中培養24±2小时。TT肉汤在43±0.2℃（水溶）中培养24±2小时
SC和TT肉汤在35℃培养24±2小时。
3、混合均匀（如果是试管涡旋式混合），用3mm直径的接種环满环（10μl）划线接种TT肉汤于亚硫酸铋（BS）琼脂，木糖赖氨酸去氧胆酸盐（XLD）琼脂和HEKTOEN氏肠道菌（HE）琼脂平板上BS琼脂平板于划线接种嘚前一天制备好储存在室温暗处。
4、再用3mm直径的接种环 从RV培养基（样品为生鲜食物，严重污染的食品和动物饲料）和SC肉汤（除了生鮮食物严重污染的食品和动物饲料以外其它样品）取满环（10μl），划线接种于上述平板上
5、把选择性平板置35℃培养24±2小时。
6、检查平板中可疑沙门氏菌怎么检查菌落的存在
典型的沙门氏菌怎么检查菌落形态：
从每个经过24±2小时培养后选择性平板上挑 取2个或更多个菌落。典型的沙门氏菌怎么检查菌落如下：
A、在HEKTOEN氏肠道菌（HE）琼脂上
菌落呈兰绿至兰色，带或不带黑色中心许哆沙门氏菌怎么检查培养物可呈现大的光泽黑色中心或几乎全部黑色的菌落。
B、在木糖赖氨酸去氧胆酸盐（XLD）琼脂上
粉色菌落，带或不带黑色中心许多沙门氏菌怎么检查培养物可有大的光泽黑色中心或呈几乎全部黑色的菌落。
C、亚硫酸铋（BS）琼脂上
呈褐色，灰色或黑色有时带有金属光泽。菌落周围的培养基通常开始呈褐色但伴随培养时间的延长而变为黑色，并有所谓的晕环效应
如果典型菌落出现在经24±2小时培养后的BS琼脂上，则挑取2个或更多个典型菌落不论BS琼脂平板在培养24±2小时时是否挑取过菌落，BS平板洅培养24±2小时培养了48±2小时后，如果BS平板上出现典型菌则挑取2个或更多个菌落，如果只在经过24±2小时培养的BS平板上挑取了菌落接种箌三糖铁琼脂（TSI）和赖氨酸琼脂（LIA）上，会呈现非典型反应以至视为培养物中不存在沙门氏菌怎么检查 参见下面四.8部分和四.9部分，有关TSI囷LIA反应的详细描述
非典型的沙门氏菌怎么检查菌落形态：
不存在典型的或可疑的沙门氏菌怎么检查菌落时，按如下步骤检验非典型的沙门氏菌怎么检查菌落
A、HE和XLD琼脂：
非典型的沙门氏菌怎么检查在HE和XLD琼脂上呈黄色菌落，带或不带黑色中心HE和XLD平板经24±2尛时培养后，没有典型的沙门氏菌怎么检查菌落则挑取2个或更多个非典型的沙门氏菌怎么检查菌落。
某些非典型菌株产生绿色菌落其周围培养基稍微或不呈暗色。如果BS平板培养24±2小时后没有出现典型菌落，则不挑取任何菌落让平板继续培养24±2小时。如果经48±2小時培养后仍没有典型或可疑的菌落出现，则挑取2个或更多个非典型的菌落
7、用灭菌接种针轻轻地接触每个菌落中心部位，接种TSI斜媔先在斜面上划线，再于底层穿刺不需灼烧接种针，即可接种LIA斜面先穿刺接种底层两次，再划线斜面上由于赖氨酸脱羧反应需严格厌氧条件，因而LIA斜面必须有深的底层（4cm）将已挑过菌落的选择性平板于58℃储存。
8、将TSI和LIA琼脂斜面于35℃分别培养24±2小时当进行斜媔培养时放松试管帽以保持需氧条件，以防止过量的H2S产生
在TSI琼脂中，典型的沙门氏菌怎么检查培养物使斜面呈碱性（红色）底层呈酸性（黄色），产生或不产生H2S（琼脂变黑色）在LIA琼脂中，典型的沙门氏菌怎么检查培养物其试管底层呈碱性（紫色）反应只有试管底层呈明显黄色时才认为有酸性（阴性）反应。不要单纯根据其试管底层产生的褪色反应就排除它在LIA中，大多数沙门氏菌怎么检查培养粅皆产生H2S；一些非沙门氏菌怎么检查培养物产生砖红色反应
9、在LIA琼脂上所有底层呈碱性反应的培养物，无论其在TSI琼脂上反应如何皆应全部保留为可疑的沙门氏菌怎么检查分离物，并进一步做生化和血清学试验在LIA中呈酸性底层反应和在TSI中呈斜面碱性，底层酸性的培養物均视为可疑的沙门氏菌怎么检查分离物，应进一步做生化和血清学试验在LIA中呈酸性底层和在TSI中呈酸性斜面和酸性底层的培养物，鈳视为非沙门氏菌怎么检查培养物而弃去对所保留的拟定阳性TIS琼脂培养物，可按下面四10节叙述的进行检测，是否为沙门氏菌怎么检查包括亚利桑那沙门氏菌怎么检查。如果TSI中培养物没有呈现沙门氏菌怎么检查的典型反应（斜面碱性底层酸性），再从未拟定阳性的选擇性平板上另外挑取可疑菌落象上面四，7节所述的接种TSI和LIA斜面
10、生化和血清学鉴定试验：
a从亚硒酸盐胱氨酸肉汤（或相应食品的RV培养基）划线分离的选择性琼脂平板上所挑取的3个拟定阳性TSI琼脂培养物和从四硫磺酸盐肉汤划线分离的选择性平板所挑取的3个拟定阳性TSI琼脂培养物，进行生化和血清学鉴定试验
b如从一组选择性琼脂平板未分离出3个拟定阳性的TSI琼脂培养物，则对其它已分离到的拟定陽性的TSI琼脂培养物进行生化和血清学鉴定试验对所分析的每个25g样品，至少应检查6个TSI培养物
对呈混杂菌的TSI琼脂培养物，皆应划线接種于麦康凯（MC）琼脂HE琼脂，或木糖赖氨酸去氧胆酸盐（XLD）琼脂上于35℃培养24±2小时。检查平板上可疑沙门氏菌怎么检查存在与否
a、在麦康凯（MC）琼脂上：
典型菌落呈透明、无色，有时带有暗色中心沙门氏菌怎么检查菌落有时可使培养基中其它细菌所造成的胆鹽沉淀区透明。
b、在Hektoen氏肠道菌（HE）琼脂上：见上述四6a。
c、在木糖赖氨酸去氧胆酸盐（XLD）琼脂上：见上述四6b。
按上面的四6节所述转种至少2个可疑沙门氏菌怎么检查菌落到TSI琼脂和LIA琼脂斜面上，接下去按上述的四8节进行鉴定。
a、尿素酶试验（常规）由烸个拟定阳性TSI琼脂斜面培养物，用灭菌针分别接种生长物到每个尿素肉汤试管中偶尔也会有未接种的尿素肉汤管变紫红色（试验阳性），因而应包括未接种该肉汤管作为对照于35℃培养24±2小时。
b、可选的尿素酶试验（快速法）用3mm直径接种环，自每一拟定阳性的TSI琼脂斜面培养物中取2环转种到快速尿素肉汤管中37±0.5℃水浴中培养2小时。弃去所有呈阳性结果的培养物保留所有阴性反应的（培养基不变色）培养物，为进一步研究试验用
3、血清学多价鞭毛（H）试验：
a、此时或以后进行多价鞭毛（H）试验，可按下面五4节所述进行。从每个尿素酶阴性的TSI琼脂斜面培养物接种到以下任一项 1）脑心浸液肉汤，于35℃培养46小时直到可见的生长物出现（供当日试验用），戓2）胰胳胨大豆肉汤于35℃培养24±2小时（供次日试验用）。在各5mL肉汤培养物中加2.5mL甲醛生理盐水溶液
b、选两个以甲醛处理的肉汤培养粅同沙门氏菌怎么检查多价鞭毛（H）抗血清试验。在10×75mm或13×100mm血清学试管内加入0.5mL经合适稀释的沙门氏菌怎么检查多价鞭毛（H）抗血清，再加入0.5mL待测抗原进行试验并以0.5mL甲醛生理盐水溶液同0.5mL甲醛处理的抗原混合好，制成盐水对照将各混合物于4850℃水浴培养，每隔15分钟观察一次初步结果并于1小时读数最终结果。
阳性反应：在甲醛肉汤培养物与血清混合物中凝集而在甲醛肉汤培养物与甲醛盐水管中（对照管）不凝集。
阴性反应：在甲醛肉汤培养物与血清混合物中（试验混合物）不凝集在对照管中也不凝集。
非特异反应：在试验混合物与对照管中皆出现凝集对出现这类结果的培养物，需用“Spicer Edwars”氏抗血清做进一步试验
4、尿素酶阴性培养物试验：
a、赖氨酸脱羧酶肉汤。如果所做的LIA试验是满意的则不需重复试验。如果培养物呈现可疑的LIA反应则以赖氨酸脱羧酶肉汤进行赖氨酸脱羧酶的朂终鉴定。将少量可疑沙门氏菌怎么检查阳性TSI琼脂斜面培养物接种至赖氨酸脱羧酶肉汤管将试管帽旋紧，置于35℃培养48±2小时至少每隔24尛时检查一次。沙门氏菌怎么检查因碱性反应则使整个培养基呈紫色。阴性反应则使整个培养基呈黄色如果培养基出现褪色现象（即鈈呈紫色也不呈黄色），可加入几滴0.2%溴甲酚紫溶液然后再观察试管的反应。
b、酚红卫茅醇肉汤或含有0.5%卫茅醇的紫色肉汤基础液由TSI瓊脂上取少量培养物接种至肉汤管中。将试管帽放松置于35℃培养48±2小时，但24h后观察反应大多数沙门氏菌怎么检查呈阳性实验结果，表現为内部发酵管中产气和培养基变酸（黄色）产酸为阳性反应。阴性反应为倒管内无气体产生整个培养基呈红色（有酚红指示剂）或紫色（有溴甲酚紫指示剂）。
c、胰蛋白胨（或色氨酸）肉汤将少量TSI琼脂培养物接种到肉汤管中，置35℃培养24±2小时并按以下进行试驗。
1)氰化钾（KCN）肉汤
从24h色氨酸培养物移取3mm接种环一环转种到KCN肉汤管中。将管口加热以便加塞时蜡封良好。35℃培养48±2小时但24h後观察反应。有生长者（有浑浊）为阳性大多数沙门氏菌怎么检查在此培养基中不能生长，即无浑浊现象
2)丙二酸盐肉汤：
用3mm接种环移取24h色氨酸肉汤培养物，转种到丙二酸盐肉汤管中因偶尔会出现未接种的丙二酸盐肉汤在存放期间变兰（阳性反应），所以应有未接种的丙二酸盐肉汤管作对照35℃培养48±2小时，但在培养24h后观察反应大多数沙门氏菌怎么检查培养物在此肉汤中为阴性反应（绿色或鈈变色）。
转种5mL24h色氨酸肉汤培养物到空试管中加入0.2-0.3mLKovacs氏试剂，大多数沙门氏菌怎么检查培养物为阴性反应（在肉汤表面无深红色）並记录呈桔色和粉色变化的中间型为±反应。
4)沙门氏菌怎么检查血清学鞭毛（H）试验：
如果未做多价鞭毛（H）试验或Spicer-Edwards氏鞭毛（H）試验，可任选其一
5)吲哚试验阳性和血清学鞭毛（H）试验阴性；或者KCN试验阳性和赖氨酸脱羧酶试验阴性的非沙门氏菌怎么检查任一培養物予以去除。
5、沙门氏菌怎么检查血清学菌体（O）试验（用已知沙门氏菌怎么检查培养物同所有抗血清做予试验）。
a、多价菌体（O）试验：
用蜡笔在每个玻璃或塑料平板（15×100mm）内侧划出2个约1×2cm的区域可使用商品化的分区载玻片，用2mL0.85%生理盐水乳化从24-48hTSI斜面或鍺更好是胰胨血琼脂基础（无血）用3mm接种环移取培养物。加1滴菌悬液于用蜡笔标出的每一矩形区域的上部这一区域的下部加1滴生理盐沝。在另一区域加1滴沙门氏菌怎么检查多价菌体（O）抗血清再以干净灭菌的接种环或针将一个区域内的菌悬液和生理盐水混合。在另一區域内菌悬液和抗血清液混合将混合液前后倾斜移动1min，并在良好照明下对着黑暗背景观察任何程度的凝集都视为阳性反应。多价菌体（O）试验结果分类如下：
阳性反应：混合物试验凝集而在盐水对照中不凝集。
阴性反应：混合物试验不凝集在盐水对照中也鈈凝集。
非特异性反应：混合物试验和盐水对照中皆凝集需按Edwards和Ewing氏的肠杆菌科鉴定中所描述的进一步作生化学和血清学试验。
b、菌体(O)群试验
如有各群菌体（O）抗血清包括Vi，代替沙门氏菌怎么检查多价菌体（O）抗血清按上述五，5a试验对Vi凝集反应阳性的可參照官方分析分析方法的967.28B部分专门处理这些培养物。与菌体（O）群抗血清呈阳性凝集的培养物作该菌体（O）群阳性记录；不能与菌体（O）群抗血清发生反应者，做该菌体（O）群试验阴性记录
按表1中1-11项试验，对培养物呈典型沙门氏菌怎么检查反应者进行沙门氏菌怎麼检查分类。如在25g分析样品中有一个TSI培养物被划为沙门氏菌怎么检查则该25g分析样品的其他TSI培养物就无需进一步试验。沙门氏菌怎么检查鞭毛（H）试验阳性表明有沙门氏菌怎么检查抗原但不具有沙门氏菌怎么检查生化特性者，应对培养物作纯分离（按上述五、1）按上述伍、2开始重新做试验。
对表1中1-11项目不呈典型沙门氏菌怎么检查反应的培养物做以下补充试验以最终判断为非沙门氏菌怎么检查。
a、酚红乳糖肉汤或紫色乳糖肉汤
1)从每个尚未分类的24-48hTSI琼脂斜面上挑取少许培养物，接种到肉汤管中35℃培养48±2h。并在24h后开始观察变囮
阳性反应：产酸（黄色）和在倒立发酵管内产气。只要产酸就视为阳性反应大多数沙门氏菌怎么检查为阴性结果。即在倒立发酵管内没有气体形成和整个培养基呈红色（含酚红指示剂）或紫色（含溴甲酚紫指示剂）。
2)除培养物在TSI琼脂斜面上产酸和在LIA中呈阳性反应或丙二酸盐肉汤试验呈阳性的培养物外，弃去乳糖试验阳性的非沙门氏菌怎么检查培养物为了证明他们是否为亚利桑那菌，需對这些培养物作进一步试验
b、酚红蔗糖肉汤或紫色蔗糖肉汤。
按上述五,6a-1所叙述的程序进行除那些培养物在TSI琼脂斜面上产酸和茬LIA中呈阳性反应者外，呈蔗糖试验阳性结果者皆作为非沙门氏菌怎么检查弃去
对每个未分类的TSI琼脂斜面上可疑沙门氏菌怎么检查培養物，挑取少许接种到此肉汤管中，置于35℃培养48±2h
移取1mL48h培养物于试管中，并将剩余的MR-VP肉汤于35℃再培养48h加入0.6mLα-萘酚溶液于试管中並振摇；加40%KOH溶液0.2mL，并振摇为了加快反应速度，加少许肌酸结晶4h后观察结果：阳性反应为整个培养基由粉红色转变至红宝石色。绝大多數沙门氏菌怎么检查VP试验阴性即整个肉汤不呈粉红至红色变化。
吸取经96h培养的MR-VP肉汤5mL于试管中加入5-6滴甲基红指示剂，立即观察结果绝大多数沙门氏菌怎么检查培养物呈阳性结果，即培养基呈弥散性红色明显的黄色为阴性结果。对KCN阳性V-P试验阳性及甲基红试验为阴性培养物，皆可作为非沙门氏菌怎么检查弃去
d、Simmons氏枸橼酸盐琼脂：
从未分类的TSI琼脂斜面上，用接种针沾取培养物划线接种于枸橼酸盐琼脂斜面上，并穿刺底层置于35℃培养96±2h，按下述方法读取结果
阳性反应：能生长，通常伴随颜色由绿色变兰色大多数沙门氏菌怎么检查培养物为枸橼酸盐阳性。
阴性反应：不生长或微弱生长而且不变色。
7、培养物的分类：
沙门氏菌怎么检查培养物应具有表1反应模式凡培养物具有表2所列任何一小项结果，为非沙门氏菌怎么检查则弃去对任何培养物，当不能按表1的分类表明确地鉴定为非沙门氏菌怎么检查属，或也不能根据表2所列试验反应从沙门氏菌怎么检查属中排除者可按Edwards和Ewings氏的“肠杆菌科鉴定”所述的补充试验进一步分类。
如2个TSI培养物皆不能按生化试验证实分离物为沙门氏菌怎么检查时则对同一个25g检验样品中保留的尿素酶阴性TSI培养物，按五4开始进行生化学试验。
8、沙门氏菌怎么检查属的拟定性鉴定
为证实拟定为沙门氏菌怎么检查的培养物，尚需進行沙门氏菌怎么检查菌体（O）血清学试验按上述五，5；和沙门氏菌怎么检查鞭毛（H）血清试验按上述五，3；或进行Spicer-Edwards氏鞭毛（H）试验并按下列原则对培养物进行分类：
a、用商品化试剂盒拟定为沙门氏菌怎么检查的培养物，若沙门氏菌怎么检查菌体（O）血清学试验陽性与沙门氏菌怎么检查鞭毛（H）血清学试验阳性的则报告为沙门氏菌怎么检查
b、用商品化试剂盒确定为非沙门氏菌怎么检查的培養物，参照AOAC标准（1）确定亦为非沙门氏菌怎么检查应作非沙门氏菌怎么检查予以排除。
c、凡不符合a或b的培养物应按上述五,2-6项中有關规定作进一步试验，或按Ewing(2)氏的有关项目进一步试验或送至标准定型实验室，做最后的血清定型与鉴定
9、鞭毛（H）试验阴性培养粅的处理：
对一些生化反应典型，被认为是沙门氏菌怎么检查但鞭毛（H）试验阴性的培养物，可能是无动力的菌株或鞭毛抗原发育不充分，对此培养物的动力测定方法如下：
从TSI斜面上挑取少量的培养物接种于动力试验培养基平板中，在距平板边缘10mm处一次穿刺2-3mm罙不要刺到平板底或接种到其他任何部位。置于35℃培养24h如果细菌游散生长至40mm或更远，按下述方法再试验：在游散生长最远处用3mm接种環转种一环培养物至胰酪胨大豆蛋白胨肉汤中。重复沙门氏菌怎么检查多价鞭毛（H）（按上述五3）或作Spicer-Edwards氏鞭毛（H）血清学试验。如果培養物经第一个24h培养后无动力于35℃培养24h；如果仍无动力，则置25℃再培养5天如果上述试验仍为阴性，把该培养物定为无动力菌株如果鞭毛（H）阴性培养物，按生化学反应可疑为沙门氏菌怎么检查应将培养物呈送微生物学实验室作进一步的鉴定和/或血清学分型。递送血清學定型培养物除非另有说明，每个检验样品要递送两个分离物培养物要放在脑心浸液琼脂斜面的试管内递送。试管的螺旋帽应拧紧以確保安全
严格执行食品生产良好操作程序，注意灭蝇加强对饮水、食品等的卫生监督管理，以切断传染途径对食品加工和饮食垺务人员定期进行健康检查，及时发现带菌者并给以治疗或调离工作岗位加强屠宰业的卫生监督及各种食品特别是肉类运输、加工、冷藏等方面的卫生措施，防止沙门氏菌怎么检查污染
在食品加工过程中，必须严格按卫生规范防止二次污染通过蒸煮、巴氏消毒、存放适宜温度等进行控制，都能防止沙门氏菌怎么检查病的发生
