浸胶纸什么用途定点怎么设置

定点突变是指通过聚合酶链式反應(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等定点突变能迅速、的提高DNA所表达的目的的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段

定点突变一般有以下流程:

1.对待突变基因测序结果进行分析,设计突变方案;   

2.根据突变方案设计合成覆盖突变位点的双向引物合成目的DNA两端引物,进行高保真PCR反应;   

3.默认情况下将PCR产物克隆至T载,或者根据要求亚克隆至目的载体;DNA测序验证突变序列的正确性

定点突变一般须有含有待突变基因嘚高纯度质粒,不少于10μg电泳图清晰,达酶切及测序要求

根据生物学理论知识,基因会发生突变突变可以自发,也可以诱发但在加拿大生物化学家M·史密斯(1932-2000年)发明定点突变法之前,突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法诱使基因体突变这类方法属于隨机突变,突变株必须在生物形状上有所改变才能确定有突变发生,但除非用分子生物方法或遗传方法找到此突变处否则无法确定突變位置。也就是说这种突变是盲目的。而史密斯发明的定点突变法却是有目的的该法可经由设计好的寡核苷酸,在任何一个基因片段仩进行随意或设计好的突变也就是说,这种突变是预先设定好的所以也有人将该法称为“反遗传法”。

几乎每个生物实验室都会用定點突变法来研究基因或蛋白质的功能定点突变法的应用不仅广泛用于基因工程技术领域,还可用于农业培育抗虫、抗病的良种用于医學矫正遗传病、治疗癌症等病。

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